【正文】 量微生物對(duì)某一致死因子的抗性強(qiáng)弱，即可以作為微生物在某一致死條件下死亡的快慢、難易程度的指標(biāo)。 NNkt0ln1?應(yīng)用對(duì)數(shù)殘留定律計(jì)算滅菌溫度 微生物的熱致死效應(yīng)同樣遵守 “ 對(duì)數(shù)殘留定律 ” ，由于微生物種類(lèi)以及生理狀態(tài)不同，死亡速率常數(shù) k值也不相同，例如121℃ 時(shí)大多數(shù)的營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞的 k值從每分鐘10到 1010不等，而芽孢的 k值大約為每分鐘1左右，足見(jiàn) 芽孢較營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞耐熱。 菌絲生長(zhǎng)的測(cè)定 0:00 45:22 17:04 6:36 1:40 （ 二 ） 菌落生長(zhǎng)速率的測(cè)定 將待測(cè)菌株點(diǎn)接于培養(yǎng)基平板的中心，每隔一段時(shí)間 測(cè)量菌落的半徑和面積 ，直到菌落長(zhǎng)滿平板為止。 當(dāng)主菌絲形成初級(jí)分枝后 ， 就開(kāi)始了線性生長(zhǎng)期 。 該區(qū)的菌絲其原生質(zhì)充分液泡化 ， 并有糖原和脂的積累 。徑向生長(zhǎng)速率是邊沿生長(zhǎng)區(qū)寬度的函數(shù)。菌絲自溶的程度與菌種的遺傳特性和培養(yǎng)條件有關(guān) 。 頂體 (Spitzenkorper)的作用 頂體是在高等真菌生長(zhǎng)中的菌絲頂端發(fā)現(xiàn)的，在光學(xué)顯微鏡下表現(xiàn)為一塊相對(duì)較暗的結(jié)構(gòu)，而在電子顯微鏡下發(fā)現(xiàn)， 頂體是由菌絲頂端聚集并分布于微絲網(wǎng)絡(luò)狀結(jié)構(gòu)中的分泌囊泡所構(gòu)成的。另外， Johns等人也對(duì)菌絲頂端的向外的作用力進(jìn)行了監(jiān)測(cè)，發(fā)現(xiàn) 作用力有波動(dòng)現(xiàn)象 ，并推測(cè)這種波動(dòng)可能反映了菌絲 內(nèi)部膨壓的微弱變化 ，或者表現(xiàn)了 細(xì)胞壁硬化及軟化的脈沖性交替 。另外， Harris等通過(guò)分子途徑也證明構(gòu)巢曲霉芽管的正常萌發(fā)依賴(lài)于微絲骨架的完整性。 因此 ， 人們認(rèn)為菌絲頂端生長(zhǎng)動(dòng)力的另一來(lái)源可能是微絲骨架 ， 在正常膨壓條件下 ， 這一壓力可以忽略 ， 但當(dāng)膨壓為零， 壁可塑性增大時(shí) ， 微絲產(chǎn)生的壓力就能有效的推動(dòng)菌絲頂端向前生長(zhǎng) 。 另外 ， Ca2+有可能通過(guò)與壁上的大分子物質(zhì)之間的相互交聯(lián) ， 增加細(xì)胞壁剛性 ， H+則可能導(dǎo)致壁上 Ca2+的解離使細(xì)胞壁具有一定的可塑性 ， 它們共同調(diào)節(jié)著菌絲頂端細(xì)胞壁剛性和可塑性之間的平衡 ， 以抵抗細(xì)胞膨壓維持菌絲的生長(zhǎng) 。 7. 信號(hào)傳遞 建立在激酶和 G蛋白基礎(chǔ)之上的信號(hào)系統(tǒng)在生物體內(nèi)是普遍存在的，同樣，它們也存在于頂端生長(zhǎng)這一過(guò)程中。 M期 ， G1。一個(gè)由 隔膜蛋白 （ septins）形成的環(huán)參與了細(xì)胞的分裂，該蛋白環(huán)決定了分裂面將紡錘體軸一分為二。 （ 3）酵母菌出芽過(guò)程中的紡錘體極板（ Spindle Pole Body ， SPB） 在出芽酵母 Saccharomyces cerevisiae中，紡錘體極板 (SPB)是唯一的 微管聚集的位點(diǎn) ， 在酵母的整個(gè)生物周期中，SPB始終嵌入在核膜中，能夠使細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)中的微管聚集。 SPB組分的沉積 1 SPB的復(fù)制 ， 半橋的延長(zhǎng) 2 復(fù)制的 SPB平行排列 3 SPB的復(fù)制途徑 SPB的分離 4 從 SPB發(fā)出的微管向著 出芽方向 并在有絲分裂期向著細(xì)胞核和核內(nèi)紡錘體的方向排列。 formation)而相互接觸，隨后細(xì)胞質(zhì)膜融合。但在饑餓的條件下，減數(shù)分裂被誘導(dǎo)，導(dǎo)致胞子形成，最終產(chǎn)生四個(gè)以 2： 2分離的單倍體的孢子 。 SPB是一個(gè)體積呈現(xiàn)動(dòng)態(tài)變化的細(xì)胞器 。 （ 2）酵母菌的隔膜蛋白 在目前所檢測(cè)的真菌、哺乳動(dòng)物以及其它的真核細(xì)胞中（除了植物以外），隔膜蛋白是非常保守的。當(dāng)母細(xì)胞生長(zhǎng)到一定大小時(shí)，出芽過(guò)程就開(kāi)始了，當(dāng)然 DNA的合成也同時(shí)開(kāi)始。 圖 828 Rho GTPases介導(dǎo)的細(xì)胞內(nèi)信號(hào)傳導(dǎo)途徑 第三節(jié) 酵母菌的生長(zhǎng) 多數(shù)酵母菌的無(wú)性繁殖以 出芽 方式進(jìn)行 ， 少數(shù)種類(lèi)的酵母以 二分裂 方式進(jìn)行 。 細(xì)胞內(nèi)有 20多種受 CaM調(diào)節(jié)的酶，如腺苷酸環(huán)化酶、鈣依賴(lài)性磷酸二脂酶、 Ca2+ATPase、鈣依賴(lài)性蛋白磷酸酶和鈣離子、 CaM依賴(lài)的蛋白激酶（CaMKⅡ s）等。除了微絲的結(jié)構(gòu)，其運(yùn)輸功能也受到 Ca2+的調(diào)節(jié)。 4 膨壓的作用 長(zhǎng)期以來(lái) ， 人們普遍認(rèn)為菌絲頂端生長(zhǎng)動(dòng)力的來(lái)源是 胞內(nèi)膨壓 。 （ 1） 微絲骨架 微絲在生長(zhǎng)中的菌絲頂端都是普遍存在的，雖然不同的物種微絲結(jié)構(gòu)有所不同。一直以來(lái) 微管都被認(rèn)為是囊泡長(zhǎng)距離運(yùn)輸?shù)?細(xì)胞內(nèi)通道 ，那么位于頂體中的 MTOC就可以用來(lái)解釋頂體的囊泡聚集功能。 菌絲的頂端生長(zhǎng)在很大程度上與細(xì)胞壁性質(zhì)有關(guān)。 3. 衰退期 真菌生長(zhǎng)進(jìn)入 衰退期的標(biāo)志是菌絲干重的下降 。 隨著菌落直徑的增加 ， 菌落中心老化 ，菌絲發(fā)生自溶 。 成熟的菌落至少可分為三個(gè)不同的形態(tài)區(qū)域 又稱(chēng)邊沿生長(zhǎng)區(qū) ， 由基內(nèi)菌絲構(gòu)成 ， 無(wú)氣生菌絲 。 將菌種接種到液體培養(yǎng)基內(nèi)振蕩培養(yǎng) ， 經(jīng)過(guò)一定時(shí)間后 ， 收集菌絲并洗滌 ， 然后置于 80—100℃ 烘箱烘干至恒重 ， 測(cè)定菌絲重量 。 菌絲的生長(zhǎng)是以頂端生長(zhǎng)方式進(jìn)行的 。 1/10衰減時(shí)間（ D） D定義為微生物活細(xì)胞數(shù)減少到原來(lái)數(shù)目的十分之一所需的時(shí)間 。 如果細(xì)胞在不良條件下暫時(shí)不表現(xiàn)出活性而并未死亡 ， 這種情況稱(chēng)為 殘留 。 因此穩(wěn)定期的細(xì)胞與對(duì)數(shù)期的細(xì)胞在細(xì)胞組分上一般是不同的 。例如大腸桿菌利用葡萄糖和色氨酸的 ks值分別為 1 106和 2 107mol/L。則 Ks+S=S，這時(shí) u=um，說(shuō)明這時(shí)細(xì)菌以最大生長(zhǎng)速度生長(zhǎng)，營(yíng)養(yǎng)物濃度不限制生長(zhǎng)。設(shè)單位體積的 細(xì)胞數(shù)量為 N，單位體積的 菌體質(zhì)量為 M，則可列出下述一階微分方程： uNdtdN ? uMdtdM ?U:比生長(zhǎng)速率常數(shù) ?? ? ttNN udtNdNt00lnNt –lnN0= u(tt0) Nt=N0eu(tt0) )( 00 ttuNN t ???根據(jù) 世代時(shí)間 (代時(shí) ） g的定義 ， 當(dāng) Nt=2N0時(shí) ， g = t— t0， ggu ??微生物的生長(zhǎng)是一個(gè)及其復(fù)雜的生命過(guò)程 ， 為什么近似地遵循普通的一級(jí)化學(xué)反應(yīng)呢 ？ 微生物體內(nèi)進(jìn)行著各種各樣的分解和合成反應(yīng) ，但 總反應(yīng)速度取決于最慢的一步反應(yīng) ， 這個(gè)步驟稱(chēng)為生長(zhǎng)限制反應(yīng)或控制步驟 ， 由于該生長(zhǎng)限制反應(yīng)遵循一級(jí)反應(yīng)規(guī)律 ， 所以微生物的生長(zhǎng)速率也遵循一級(jí)反應(yīng)規(guī)律 。 如接種前后細(xì)菌所處的營(yíng)養(yǎng)條件不同， 需要重新合成必需的酶類(lèi)、輔酶或某些中間代謝產(chǎn)物，以適應(yīng)新的環(huán)境而出現(xiàn)生長(zhǎng)的延滯。由細(xì)菌的數(shù)量和時(shí)間作圖得到群體生長(zhǎng)曲線。 測(cè)量菌體數(shù)目的方法有 ： （ 1）顯微鏡直接計(jì)數(shù)法。 對(duì)大多數(shù)的 ， 對(duì) Salmonella typhimurin 和 Bacillus subtilis來(lái)說(shuō) ， 不管生長(zhǎng)速率如何 ， 每個(gè)復(fù)制原點(diǎn)所對(duì)應(yīng)的細(xì)胞質(zhì)量是一定的 。D也是相當(dāng)固定的， D通常為15—20min。 在多細(xì)胞的微生物中 （如絲狀真菌），如果細(xì)胞數(shù)目增加的同時(shí)并不伴有個(gè)體數(shù)目的增加，那么此過(guò)程只能稱(chēng)為生長(zhǎng)，只有形成有性和無(wú)性孢子的過(guò)程才能稱(chēng)為繁殖。 高等生物 、 絲狀真菌：生長(zhǎng)和繁殖是兩個(gè)可以分開(kāi)的過(guò) 程 單細(xì)胞的微生物：生長(zhǎng)和繁殖往往是難以區(qū)分的 在單細(xì)胞微生物中， 細(xì)胞內(nèi)的原生質(zhì)和各種細(xì)胞結(jié)構(gòu)協(xié)調(diào)增加，細(xì)胞體積增大，這便是生長(zhǎng)。有一個(gè)明確的 DNA合成期 C，一個(gè)細(xì)胞分裂期 D（相當(dāng)于 G2+M），在細(xì)胞分裂結(jié)束后到下一輪DNA合成開(kāi)