【正文】 型 ? 核酶催化功能 RNA在生物進(jìn)化中的地位 ? RNA比相應(yīng) DNA序列含有更多信息； ? RNA是獲得性遺傳的分子基礎(chǔ)； ? RNA在生物進(jìn)化中的地位 ? DNA是信息分子； ? 蛋白質(zhì)是功能分子； ? RNA既是信息分子，又是功能分子。 ( 參考 B . L e w i n : 《 G E N E S 》Ⅵ , 1 9 9 7 ， F i g 3 1 . 1 4 ) 線蟲(chóng) coxII 基因的編輯 TU A U A U G U U U U G UU G U U U A UU A U G U GA UU A U GG U U U U G U U U U U U A UU GG U A U U U U U U A U A UUU AUUU AA U U U G UU GA U A A A U A C A U U U U A U U U G UU UG UU AA U U U U U U U G U U U U G U G U U U U U GG UU TT TTTTU A GG U U U U U U U G UU G U U G UU G U U U U G U A UU A U GA UU GA G UUU G UU G U U U GG U U U U U U G U U U U TT TTTTUU G U G A A A C C A G UU A U G A GA G U U U GC A UU G UU A UUU A UU ACA UU A A G UU GG U G U U U U U GG UU C 圖 1 3 4 4 錐蟲(chóng) ( T . b r u ce i ) c o x Ⅱ 基因的部分 R N A 順序。 tRNA內(nèi)含子切除過(guò)程 真核 mRNA前體內(nèi)含子的 剪接反應(yīng) (一 ) 結(jié)構(gòu)特點(diǎn)： 1. 邊界順序 :符合 GUAG法則 。 核酶發(fā)現(xiàn)的意義 ? （ 1）突破了酶的概念 . 是一種自體催化； ? （ 2）揭示了內(nèi)含子自我剪接的奧秘；促進(jìn)了 RNA的研究。 A CG CC C 5 39。 ) 位點(diǎn) 外顯子 A64G7 3 G10 0 T100A62AG8G84T63… 1 2 P y N C65A1 00G100 N 外顯子 內(nèi)含子 圖 1 3 2 1 內(nèi)含子和外顯子的交界順序 G T A G 法則 ( 仿 B. L e w i n : 《 G E N E S 》Ⅵ , 1 9 9 7 ， Fi g 3 0 . 3 ) RNA內(nèi)含子的 3種剪接方式 ? 第一類：自我剪接內(nèi)含子（ Ⅰ 型、 Ⅱ 型） ? 第二類：蛋白質(zhì)（酶）參與剪接內(nèi)含子 ? 第三類： snRNP參與剪接內(nèi)含子 三類內(nèi)含子的分布 I型內(nèi)含子的剪接 Cech等 1981年 用四膜蟲(chóng)分離得到了 35S的前體rRNA， 它含有一個(gè)長(zhǎng) 413bp的內(nèi)含子 。C ? C 端的正常結(jié)構(gòu)。 原核轉(zhuǎn)錄的終止 以大腸桿菌為例 （ 體外實(shí)驗(yàn) ） 終止子 （ terminator,t） ? 弱終止子－需要 ρ 因子 （ rho factor） 又稱為 依賴 ρ 因子終止子 ? 強(qiáng)終止子－內(nèi)在終止子 （ intrinsic terminators） 又稱為 不依賴 ρ 因子終止子 a. 依賴于 ρ因子的終止 ρ因子 是一個(gè)相對(duì)分子質(zhì)量為 105的六聚體蛋白。 加上～ 200A后反應(yīng)停止 復(fù)合體解離 5 ’ 3 ’ C P S F C F Ⅱ A A U A A A C s t F C F Ⅰ P A P 5 ’ 3 ’ C P S F C F Ⅱ AAUAAA 3 ’ C s t F 5 ’ C F Ⅰ P A P C P S F A A U A A A AAAAAA 3 ’ C s t F P A P P B P C P S F AAUAAA AAAAAAAAAAAAAAAAA 3 ’ CstF A A U A A A AAAAAAAAAAAAAAAAA 3 ’ 圖 13 3 ’ 端加尾反應(yīng)和相關(guān)的蛋白 質(zhì)因子 C P S F ： s p e c i f i c i t y c o m p o n e n t C s t F ： 剪切活化因子 C F ： c l e a v a g e f a c t o r s P B P ： P o l y ( A ) 結(jié)合蛋白 ( G E N E S V I F i g . 3 0 . 2 8 ) 各種 3 ’加工成分組裝成復(fù)合體 剪切因子 ( C F ) 產(chǎn)生 3 ’ 端 3 ’末端 P o l y ( A ) 聚合 酶 ( P A P ) 加 A P B P 與 P o l y ( A ) 結(jié)合 RNA合成的延伸 終止和抗終止 RNA合成的延伸 酶的后端移 酶的前端動(dòng) 1 b p 3 5 b p 不移動(dòng) RN A 上加 1 N t酶的合端繼續(xù)移動(dòng) , 酶的前端每移動(dòng) 1 b p RN A 就 不移動(dòng)增加 1 N t , 目前已增 3 4 bp加了 8 N t . 酶的前端把連續(xù)地 向前移動(dòng)數(shù)個(gè) bp酶的合端繼續(xù)移 2 7 bp動(dòng) 1 b p , RN A 已增加 9 N t 3 5 bp 圖 1 2 1 1 在延伸時(shí) RN A p o l 的移動(dòng)特點(diǎn) 延伸速度快慢和 轉(zhuǎn)錄暫停 延伸速度 ? 延伸速度快慢與 DNA模板含 G、 C的區(qū)域有關(guān)； ? 在富含 G、 C區(qū)慢或暫停。 （ 1）帽子的結(jié)構(gòu) （ 2）帽子的功能 Ⅰ 、 有助于 mRNA穿過(guò)核孔進(jìn)入 細(xì)胞質(zhì)； Ⅱ 、 保護(hù) 5′不被酶降解； Ⅲ 、 有助于在 翻譯時(shí)起始因子 IFⅢ 和核糖體識(shí)別 。 mRNA的 5/端無(wú)帽子結(jié)構(gòu)， 3/段沒(méi)有多聚 A的尾巴結(jié)構(gòu)或只有較短多聚 A的尾巴。 加 尾生化反應(yīng) 第一步 加一個(gè)短的寡聚 A序列 （ 10nt） ， 此反應(yīng)依賴于 AAUAAA序列 （ 加尾信號(hào) ） ； 此反應(yīng)由 poly（ A）聚合酶在特殊因子指導(dǎo)下完成 的 。寡聚 U的存在使雜合鏈的 339。 b、不依賴于 ρ 因子的終止 若終止點(diǎn)上游存在一個(gè)富含 GC堿基的二重對(duì)稱區(qū)，由這段 DNA轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的 RNA容易形成 發(fā)卡式結(jié)構(gòu)