薄層色譜法概述ppt課件-文庫吧在線文庫
【正文】 實 2022/5/31 20 ?容量因子（ k）與比移值（ Rf） ?k=ts/ tm（物質(zhì)在兩相中滯留時間之比） ? 又 k=K（ Vs/ Vm） ?Rf=Vm/（ Vm+KVs） =1/（ 1+k） ?k ∞ 9 4 2 1 0 ?Rf 0 1 2022/5/31 21 ?分離參數(shù) ?R= ?因 Ls=Rf L。流動相強度越高，表示它與吸附劑相互作用力強。 ? 對于易揮發(fā)的溶劑，難于配制穩(wěn)定組成的流動相。 2022/5/31 30 ? 斑點的擴散與形狀 在 TLC中斑點的移動與擴散是二維的，因為斑點在展開方向和與之垂直方向上的擴散速度是不相等的，展開劑的移動速度也是不等的，在單位體積或單位質(zhì)量薄層內(nèi)所含的溶劑量越接近溶劑前沿減少得越明顯，直至溶劑前沿時為零，這一現(xiàn)象稱為“ 溶劑的體積梯度 ”，在各種展開形式中均存在。 ? 實際工作中常常使固定相預(yù)吸附一定量單一或混合溶劑蒸氣，預(yù)吸附量越大，溶劑前沿運動速度越快，物質(zhì)斑點的 Rf值越小。 ? 間接法 ——將部分照射光的能量轉(zhuǎn)換成較長波長的熒光，即 熒光 測量。當(dāng)對薄層進(jìn)行掃描時，測量其反射吸收度，可得到反射光譜。 2022/5/31 42 ? 測量方式 ? 吸光度測量 ——測定的是 漫反射光 。 2022/5/31 46 ? 掃描定量中的標(biāo)準(zhǔn)曲線校正 ?薄層板上由于光被吸附劑散射，不能得到象通常溶液測定時的吸光度和濃度之間的簡單直線關(guān)系。 ? 展開方法 ——使用直線化功能定量時，為避免展開距離不同產(chǎn)生的誤差，實際定量時，將已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)品在同一塊板上展開是較理想的。 ?分光光度法、 HPLC法、 GC法、質(zhì)譜法 ? 直接定量 ?斑點面積測量 ——用透明紙覆蓋在薄層表面，描出斑點界限，然后測量其面積。 ? 檢測限 ? 定量限 ? 準(zhǔn)確度 2022/5/31 55 應(yīng)用 ? 藥物鑒別 ——采用標(biāo)準(zhǔn)對照法 ? 雜質(zhì)檢查 ?雜質(zhì)對照品法 ?高低濃度法 ?藥物標(biāo)準(zhǔn)品對照法 ?不允許有雜質(zhì)斑點存在，即以方法靈敏度來控制雜質(zhì)量。 ? 靈敏度 ——通常以標(biāo)準(zhǔn)曲線的斜率表示。通過加熱、噴霧等方法施加反應(yīng)試劑。 2022/5/31 47 吸光度 0 物質(zhì)量 經(jīng)變換后的直線 理論曲線 直線化方法示意圖 校正過度 校正適當(dāng) 校正不足 未校正 試樣量 積分值 校正情況判斷 2022/5/31 48 ? 使用直線化功能時的注意事項 ? 發(fā)色試樣 的測定 ——對于沒有吸收的試樣進(jìn)行發(fā)色測定時，一般不使用直線化功能就可以得到近似的直線關(guān)系。 濾光片 熒光 檢 測 器 2022/5/31 44 ? 熒光淬滅測量 ——吸附劑有熒光，樣品斑點無熒光，在紫外光照射下，被測物在熒光背景上顯示出暗灰斑點。光束落在薄層上的截面為一長方形帶。 ? 單光束雙波長 ——對背景不均勻引起的干擾有補償作用，選擇的兩個波長應(yīng)接近些。 同一物質(zhì)在同一薄層板上出現(xiàn)中間部分的 Rf值比邊緣的 Rf值小 ，即邊緣效應(yīng)，若在展開前先將展開槽與薄層板用 展開劑蒸氣飽和后再展開 ，邊緣效應(yīng)可消失。如兩個相鄰斑點中后面的一個展開速度較其單獨展開時為大。 ? 流動相中較強組分的 體積比 小于 5%或大于 50%，選擇性最大，此時最有利于溶質(zhì)與流動相組分的選擇性相互作用。 2022/5/31 26 ? 一些常用溶劑的溶劑強度與溶解度參數(shù) ? 溶劑 ?? ? 溶劑 ?? ? ? 正己烷 環(huán)己烷 ? 苯 乙醚 ? 二氯甲烷 正丙醇 ? 正丁醇 / 四氫呋喃 ? 乙酸乙酯 氯仿 ? 甲乙酮 / 二氧六環(huán) ? 吡啶 丙酮 ? 乙醇 / 乙酸 ? 二甲亞砜 甲醇
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