【正文】 對象單一等等問題都提高了生產(chǎn)成本。一般，抗病力弱的品種，生長期中露日多、露期長、露溫高、田間悶熱潮濕以及地勢低洼、施肥不足等情況下，發(fā)病較重。實(shí)驗(yàn)觀察結(jié)果顯示，在接種了枯草芽孢桿菌的培養(yǎng)基上，玉米小斑病菌的菌絲較對照組所占的培養(yǎng)皿面積少很多，菌體生長受到抑制。 在拮抗實(shí)驗(yàn)中，接種枯草芽孢桿菌的培養(yǎng)基中玉米小斑的有明顯的抑菌帶，說明枯草芽孢桿菌的拮抗性強(qiáng)且穩(wěn)定，對玉米小斑病菌有較好的拮抗作用，在第一天和第二天，實(shí)驗(yàn)組和對照組的病原菌菌絲生長狀態(tài)幾乎同步，因?yàn)樗臃N的枯草芽孢桿菌距離病原菌距離較遠(yuǎn)，還不能對病原菌的生長起到一定的抑制作用，從第三天開始對照組與實(shí)驗(yàn)組的菌絲生長狀況開始出現(xiàn)變化，實(shí)驗(yàn)組的枯草芽孢桿菌已經(jīng)明顯發(fā)揮抑菌作用而使得病原菌菌絲的生長幾乎停滯，而對照組的菌絲仍然處于生長狀態(tài)，可見枯草芽孢桿菌是一種較為理想的拮抗細(xì)菌，在植物病害尤其是農(nóng)作物的生物防治方面表現(xiàn)出一定的生防潛力。在產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)化的問題上，國家應(yīng)逐步建立、完善行業(yè)生產(chǎn)及檢測標(biāo)準(zhǔn)，制定有關(guān)法律及實(shí)施細(xì)則，使生產(chǎn)標(biāo)準(zhǔn)化。另外新菌種有待開發(fā)來生產(chǎn)更多功效的菌肥，能用于工業(yè)生產(chǎn)的微生物只占所有微生物很小的一部分，所以對新型工業(yè)菌的開發(fā)研究是當(dāng)前一項(xiàng)有待解決的任務(wù)。 從生物菌肥使用的范圍來看，其推廣應(yīng)用具有一定的廣泛性。現(xiàn)已有部分國家對生物菌肥的監(jiān)測衡量制定了一個(gè)明確的標(biāo)準(zhǔn)，以便對生物菌肥規(guī)格有一個(gè)明確的規(guī)定，避免了市場銷售及應(yīng)用的混亂。參考文獻(xiàn)[1] 葛誠，、應(yīng)用及問題「J」.中國農(nóng)學(xué)通報(bào),1994,(3)。謹(jǐn)向所有關(guān)心和幫助過我的老師、師兄師姐和同學(xué)以深深的致謝。感謝公司能夠給我這次鍛煉的機(jī)會(huì)，讓我邁出了從學(xué)校走向社會(huì)的第一步?，F(xiàn)在，我國也制定了農(nóng)業(yè)部標(biāo)準(zhǔn)和成立微生物質(zhì)量檢測中心，并已于1996年正式對微生物肥料制品進(jìn)行產(chǎn)品登記、檢測及發(fā)放生產(chǎn)許可證等工作。 生物菌肥的發(fā)展前景 生物菌肥的作用已逐漸被人們認(rèn)可。生物菌肥中的有效微生物可以同通過其新陳代謝的產(chǎn)物來降解難溶物質(zhì)，活化土壤，促進(jìn)植物對磷、鉀等元素的吸收，從而提高農(nóng)作物的品質(zhì)及產(chǎn)量。與化肥行業(yè)、農(nóng)藥行業(yè)相比，微生物肥料行業(yè)還處在稚嫩的發(fā)展階段，但是，它又與我國農(nóng)業(yè)可持續(xù)發(fā)展戰(zhàn)略息息相關(guān)，在有機(jī)食品生產(chǎn)方面有著不可替代的地位，是我國肥料行業(yè)發(fā)展的方向之 一。同時(shí)，枯草芽孢菌劑在不同條件下使用時(shí)，對菌體本身可能產(chǎn)生的影響，密切注意它們的變化趨勢和可能發(fā)生的不良變異和影響，并提出合理有效的預(yù)防方法[14]。在該發(fā)酵模擬試驗(yàn)中，當(dāng)取樣觀察發(fā)現(xiàn)視野內(nèi)有大量芽孢存在時(shí)，既說明發(fā)酵已經(jīng)處于發(fā)酵末期。2. 材料與方法 實(shí)驗(yàn)材料與器材 實(shí)驗(yàn)材料蔗糖，馬鈴薯，麥芽糖，酵母膏，瓊脂，燕麥片，胰蛋白胨，牛肉膏，硫酸銨，K2HPO4,5%孔雀綠溶液，%堿性復(fù)紅溶液，香柏油，擦鏡液，無菌水 實(shí)驗(yàn)菌種枯草芽孢桿菌A16（Bacillus subtilis A16） 玉米小斑病菌(Bipolaris maydis) 實(shí)驗(yàn)儀器顯微鏡，酒精燈，載玻片，蓋玻片，吸水紙，膠頭滴管，試管，試管夾，培養(yǎng)皿，三角瓶，燒杯，控溫?fù)u床，移液槍，高壓蒸汽滅菌鍋，電子天平，PH測試儀，接種環(huán)，直尺，無菌操作臺(tái) 實(shí)驗(yàn)方法 發(fā)酵種子培養(yǎng) 配制LB培養(yǎng)基①用燒杯稱取32g馬鈴薯，32gNaCl, 16g酵母膏放至鍋中，燒杯用水沖洗，加入部分水，使藥品溶解②用30% NaOH調(diào)pH,至7，補(bǔ)齊3200ml水③分裝至6個(gè)三角瓶中，每個(gè)500ml④121℃滅菌23min。 立題依據(jù)玉米小斑病是由Bipolaris maydis所引起的一種真菌病害，是甜玉米生育期的常發(fā)性病害。大多數(shù)的枯草芽孢桿菌制劑還處于實(shí)驗(yàn)室研究階段，沒有進(jìn)入實(shí)際應(yīng)用。迄今為止，已有多種枯草芽孢桿菌制劑應(yīng)用于農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中，例如由美國研發(fā)并登記注冊的殺菌劑Serenade和Souata AS, 可防治蔬菜水果灰霉病、白粉病等真菌和細(xì)菌病害。根腐消主要防治三七根腐病?？莶菅挎邨U菌可以從植物體內(nèi)分離出來，研究表明植物內(nèi)生菌對植物生長具有促進(jìn)作用，內(nèi)生菌可增進(jìn)宿主植物對N、P等營養(yǎng)元素的吸收，對宿主植物的生長起促進(jìn)作用[7]。 生物菌肥中的有效微生物 自然界中不少微生物（病毒、細(xì)菌、真菌和線蟲）具有殺蟲、殺菌、除草及植物生物調(diào)節(jié)活性。 生物菌肥的作用 促進(jìn)土壤形成微生物在土壤形成過程中起到了至關(guān)重要的作用，土壤中含有的有機(jī)質(zhì)和微生物的活動(dòng)使土壤中含有豐富的礦物質(zhì)元素，從而可以培養(yǎng)農(nóng)作物，生物菌肥含有大量的微生物，進(jìn)一步提高了土壤培養(yǎng)農(nóng)作物的能力。該菌作為植物病害生防細(xì)菌之一，具有較強(qiáng)的防病作用，在極端的條件下，還可以誘導(dǎo)產(chǎn)生抗逆性很強(qiáng)的內(nèi)源孢子[2].由于該菌能產(chǎn)生耐熱的芽孢，既易于生產(chǎn)，進(jìn)行劑型加工，又易于存活，定殖與繁殖[3]。 Bipolaris maydis ?？莶菅挎邨U菌作為一種具有研究、應(yīng)用和商業(yè)價(jià)值的微生物菌種在生物菌肥的研究中起到了重要作用，近年來國內(nèi)外對枯草芽孢桿菌的研究應(yīng)用有了很大的進(jìn)展，利用其對玉米小斑病菌的拮抗作用可研發(fā)生產(chǎn)有效防治玉米小斑病的生物菌劑。由于含有大量的微生物，生物菌肥主要以微生物生命活動(dòng)的產(chǎn)物來活化土壤，改善作物營養(yǎng)條件和生長環(huán)境，另外，生物菌肥還具有改良土壤、抗旱、培肥地力、促早熟、抵抗病蟲害等功效，還能解決土壤化肥農(nóng)藥殘留等問題，從而發(fā)揮土壤的潛在肥力，提高農(nóng)產(chǎn)品的產(chǎn)量和品質(zhì)。從成分上可分為：單純生物肥和有機(jī)無機(jī)生物復(fù)合肥。在生物菌肥進(jìn)入土壤之后，一方面有益菌在植物根際大量繁殖，在植物根區(qū)形成優(yōu)勢種群，同時(shí)有益菌在生長繁殖過程中，還會(huì)分泌出多種有機(jī)酸和抗生素等物質(zhì)，從而抑制病原菌等有害菌的繁殖；另一方面，有些有益菌群在植物根部形成一道生物屏障，以阻止有害菌的入侵和定殖[5]。由于生物防治對環(huán)境生態(tài)和人類健康無毒害的優(yōu)點(diǎn)而備受重視，從而得到了越來越廣泛的應(yīng)用。紋曲寧是100億活芽孢／％井岡霉素的復(fù)混制劑。表1 我國已注冊的枯草芽孢桿菌菌劑產(chǎn)品[8]Table 1 Bacillus subtilis bacterium agent products registered in China產(chǎn)品名公司有效成分劑型主要防治對象文曲寧江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)院植保研究所B. subtilis B916+井岡霉素水劑水稻紋枯病、稻曲病百抗云南農(nóng)業(yè)大學(xué)，中國農(nóng)業(yè)大學(xué)和云南星耀生物制品廠B. subtilis B908可濕性粉劑水稻紋枯病，三七、煙草、花卉、小麥、白菜等土傳病害臺(tái)灣寶光華化工股份有限公司B. subtilis可濕性粉劑白粉病、灰斑病、炭疽病等疾病麥豐靈南京農(nóng)業(yè)大學(xué)B. subtilis B3粉劑小麥紋枯病亞寶香港經(jīng)綸全汛有限公司B. subtilis可濕性粉劑水稻紋枯病、稻瘟病、甘藍(lán)黑斑病枯草芽孢桿菌 BS208殺菌劑武漢天惠生物有限公司B. subtilis Bs208可濕性粉劑，水劑黃瓜白粉病、草莓白粉病和灰霉病、番茄灰霉病、棉花黃萎病、枯萎病和立枯病等增產(chǎn)劑中國農(nóng)業(yè)大學(xué)植物生態(tài)工程研究所與上海農(nóng)樂生物工程為制品廠Bacillus. spp可濕性粉劑，水劑