【正文】 層多和 交聯(lián)致密，故遇乙醇或丙酮作脫色劑處理時(shí)，因失水反而使網(wǎng)孔縮小，再加上它不含類(lèi)脂，故乙醇處理不會(huì)溶出縫隙，因此能把結(jié)晶紫與碘復(fù)合物牢牢留在壁內(nèi)，使其仍呈紫色。傘毛（Pilus)（菌毛、纖毛、線(xiàn)毛）功能：作為噬菌體的吸附位點(diǎn)；作為附著到哺乳動(dòng)物細(xì)胞或其他物體的工具。糖被的有無(wú)、厚薄與菌種遺傳性有關(guān)，還與環(huán)境條件（特別是營(yíng)養(yǎng)）密切相關(guān)。休眠期間的芽孢不能檢查出任何代謝活力，稱(chēng)為穩(wěn)生態(tài)。①活化（activation)在人為條件下，活化作用可由短期熱處理或用低pH、強(qiáng)氧化劑的處理而引起。同形裂殖；異形裂殖菌落：將單個(gè)微生物細(xì)胞或一小堆同種細(xì)胞接種在固體培養(yǎng)基中，當(dāng)它占有一定的發(fā)展空間并給予適宜的培養(yǎng)條件時(shí)，該細(xì)胞就迅速進(jìn)行生長(zhǎng)繁殖。基內(nèi)菌絲（Substrate mycelium)：向基質(zhì)的四周表面和內(nèi)部伸展的菌絲，較細(xì)，顏色較淡，具吸收營(yíng)養(yǎng)排泄代謝廢物功能。特點(diǎn) ：①個(gè)體一般以單細(xì)胞狀態(tài)存在；②多數(shù)營(yíng)出芽繁殖，也有的裂殖；③能發(fā)酵糖類(lèi)產(chǎn)能；④細(xì)胞壁常含甘露聚糖；⑤喜含糖量高、酸性的水生環(huán)境生長(zhǎng)形態(tài)和大小——酵母菌是典型的真核微生物，其細(xì)胞直徑為細(xì)菌的10倍，在光學(xué)顯微鏡下，可模糊看到酵母細(xì)胞內(nèi)的種種結(jié)構(gòu)分化。無(wú)性酵母菌的繁殖方式芽裂繁殖：是一種界于出芽和橫隔形成兩者之間的一種裂殖法，這種繁殖法很少見(jiàn)。有性假酵母（擬酵母）：只進(jìn)行無(wú)性繁殖的酵母菌 真酵母：具有有性繁殖的酵母菌 生活史生活史又稱(chēng)生命周期：指上一代生物個(gè)體經(jīng)一系列生長(zhǎng)、發(fā)育階段而產(chǎn)生下一代個(gè)體的全部過(guò)程。②不產(chǎn)假菌絲的酵母菌，其菌落更為隆起，邊緣十分圓整，而產(chǎn)生假菌絲的酵母菌，則菌落較平坦，表面和邊緣較粗糙，酵母菌的菌落，由于存在酒精發(fā)酵，一般還會(huì)散發(fā)出一股酒香。④子實(shí)體： 菌絲束在適宜條件下會(huì)形成菌蕾，然后再分化、膨大呈大型子實(shí)體。 (2)裂解期（risephase）緊接在潛伏期后的一段宿主細(xì)胞迅速裂解、溶液中噬菌體粒子急劇增多的一段時(shí)間。溶源菌是一類(lèi)能與溫和噬菌體長(zhǎng)期共存的宿主細(xì)胞。類(lèi)病毒：是一類(lèi)只含有RNA一種成分、專(zhuān)性寄生在活細(xì)胞內(nèi)的分子病原體，為含246～375個(gè)核苷酸的單鏈環(huán)狀RNA分子。（一）水－，酵母菌次之，水中溶質(zhì)越高水活度越低。硝酸鹽也能被大部分微生物利用，但吸收后需被還原成NH3才能進(jìn)入合成代謝； ，由于NO3被吸收，會(huì)導(dǎo)致培養(yǎng)基pH升高，因而將其稱(chēng)為生理堿性鹽.。 廣義的生長(zhǎng)因子： 維生素、堿基、卟啉及其衍生物、甾醇、胺類(lèi)、 C4～C6的分枝或直鏈脂肪酸，以及需要量較大的氨基酸； 狹義的生長(zhǎng)因子：一般僅指維生素。（化能異養(yǎng)型）能量均來(lái)自有機(jī)物氧化過(guò)程中放出的化學(xué)能； （auxotroph）和原養(yǎng)型（prototroph）腐生型(metatrophy)：可利用無(wú)生命的有機(jī)物(如動(dòng)植物尸體和殘?bào)w)作為碳源； 寄生型(paratrophy)：寄生在活的寄主機(jī)體內(nèi)吸取營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),離開(kāi)寄主就不能生存； 兼性腐生型(facultive metatrophy),兼性寄生型(facultive paratrophy)。需特異性載體蛋白，耗能，溶質(zhì)在運(yùn)送前后還會(huì)發(fā)生分子結(jié)構(gòu)的變化基團(tuán)移位主要用于運(yùn)送各種糖類(lèi)、核苷酸、丁酸和腺嘌呤等物質(zhì)。 (～106) ,實(shí)驗(yàn)室的常用培養(yǎng)基： 細(xì)菌：牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基（或簡(jiǎn)稱(chēng)普通肉湯培養(yǎng)基）； 放線(xiàn)菌：高氏1號(hào)合成培養(yǎng)基； 酵母菌：麥芽汁培養(yǎng)基； 霉菌：查氏合成培養(yǎng)基； 實(shí)驗(yàn)室一般培養(yǎng)：普通常用培養(yǎng)基； 遺傳研究：成分清楚的合成培養(yǎng)基； 生理、代謝研究：選用相應(yīng)的培養(yǎng)基配方； 真菌需C／N比較高的培養(yǎng)基；（素食） 細(xì)菌（動(dòng)物病原菌）需C／N比較低的培養(yǎng)基（葷食） 發(fā)酵生產(chǎn)谷氨酸時(shí)： 碳氮比為4/1時(shí)，菌體大量繁殖，谷氨酸積累少； 第一種是采用磷酸緩沖液進(jìn)行調(diào)節(jié)。 （2）組合培養(yǎng)基(3)天然固態(tài)培養(yǎng)基 指含有除水以外的一切成分的商品培養(yǎng)基，使用時(shí)只要加入適量水分并加以滅菌即可，是一類(lèi)既有成分精確又有使用方便等優(yōu)點(diǎn)的現(xiàn)代化培養(yǎng)基。用來(lái)培養(yǎng)營(yíng)養(yǎng)要求比較苛刻的異養(yǎng)型微生物。（6）生理特性測(cè)定培養(yǎng)基是在鑒定微生物時(shí)，用于觀(guān)察微生物的培養(yǎng)基特征，或觀(guān)測(cè)其生理生化反應(yīng)所采用的培養(yǎng)基。 ATP濃度的測(cè)定： 在這個(gè)反應(yīng)系統(tǒng)中，酶、熒光素和O2都過(guò)量時(shí)，光的強(qiáng)度與ATP的量成正比。菌體與液體導(dǎo)電性不同, 一個(gè)細(xì)胞通過(guò)小孔,電阻增加,形成一個(gè)脈沖。 絲狀真菌的生長(zhǎng)時(shí)從孢子萌發(fā)開(kāi)始的，以其菌絲頂端延長(zhǎng)的方式進(jìn)行的。C、生產(chǎn)實(shí)踐中縮短延滯期的常用手段 , 使延滯期縮短； ； ； ； （2）對(duì)數(shù)期 A、對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的特點(diǎn) ① 營(yíng)養(yǎng)物尤其是生長(zhǎng)限制因子的耗盡；⑵機(jī)械篩選法根據(jù)微生物細(xì)胞在不同生長(zhǎng)階段的細(xì)胞體積與質(zhì)量或根據(jù)它們同某種材料結(jié)合能力不同的原理設(shè)計(jì)出來(lái)的方法。連續(xù)培養(yǎng)（Continous culture ）：又稱(chēng)開(kāi)放培養(yǎng)（open culture），在微生物的整個(gè)培養(yǎng)期間，通過(guò)一定的方式使微生物能以恒定的比生長(zhǎng)速率生長(zhǎng)并能持續(xù)生長(zhǎng)下去的一種培養(yǎng)方法。在典型的呼吸鏈中，即電子通過(guò)典型的NAD+呼吸鏈傳遞時(shí)，只有三處能提供合成ATP所需要的足夠能量。該學(xué)說(shuō)的中心思想是電子傳遞過(guò)程中導(dǎo)致膜內(nèi)外出現(xiàn)質(zhì)子濃度差，從而將能量蘊(yùn)藏在質(zhì)子勢(shì)中，質(zhì)子勢(shì)推動(dòng)質(zhì)子由膜外進(jìn)入胞內(nèi)，在這個(gè)過(guò)程中通過(guò)存在于膜上的F1F0ATP酶偶聯(lián)ATP的形成。在光合作用中，位于光合膜中的葉綠素或菌綠素吸收光量子,釋放出一個(gè)激發(fā)電子。（2）非循環(huán)式光合磷酸化 這是各種綠色植物、藻類(lèi)和藍(lán)細(xì)菌所共有的利用光能產(chǎn)生ATP的磷酸化反應(yīng)。EMP途徑的特征性酶：1，6二磷酸果糖醛縮酶，它不僅在葡萄糖降解中十分重要，而且對(duì)葡萄糖異生作用也很重要。 ,故名。葡萄糖首先在特有的葡萄糖氧化酶的催化下，被分子氧氧化成葡萄糖酸內(nèi)酯和葡萄糖酸，再進(jìn)入HMP和ED途徑降解成丙酮酸。進(jìn)行乳酸發(fā)酵的都是細(xì)菌：如短乳桿菌，乳鏈球菌等 同型乳酸發(fā)酵：在糖的發(fā)酵中，產(chǎn)物只有乳酸的發(fā)酵稱(chēng)為同型乳酸發(fā)酵，青貯飼料中的乳鏈球菌發(fā)酵即為此類(lèi)型。n 大多數(shù)腸桿菌如大腸桿菌等均能進(jìn)行混合酸發(fā)酵。 E系完全，分脫氫E和氧化E兩種E系。 原核生物因其細(xì)胞微小、結(jié)構(gòu)的間隔程度低，故反應(yīng)的控制大多在簡(jiǎn)單的酶分子水平上進(jìn)行。由于細(xì)胞膜屬疏水性，首先把在細(xì)胞質(zhì)中合成的親水性分子－“Park”核苷酸穿入細(xì)胞膜并進(jìn)一步接上N乙酰葡糖胺和甘氨酸五肽“橋”；最后把肽聚糖單體（雙糖肽亞單位） 插入細(xì)胞膜外的細(xì)胞壁生長(zhǎng)點(diǎn)處，必須通過(guò)一種稱(chēng)作細(xì)菌萜醇的類(lèi)脂載體的運(yùn)送。青霉素的作用機(jī)制是 抑制肽聚糖分子中肽橋的生物合成，因此對(duì)處于生長(zhǎng)旺盛繁殖階段的細(xì)菌具有明顯的抑制作用，相反，對(duì)于處于生長(zhǎng)停滯狀態(tài)的休止細(xì)胞，卻無(wú)抑制作用。 微生物的生長(zhǎng)溫度類(lèi)型 按照最適生長(zhǎng)溫度范圍的不同分類(lèi)①嗜冷微生物(低溫型）能在5℃以下生長(zhǎng)的微生物稱(chēng)為嗜冷微生物。極端溫度對(duì)微生物的影響極端溫度 低于最低生長(zhǎng)溫度和高于最高生長(zhǎng)溫度范圍的溫度。 如：乳鏈球菌、乳酸乳桿菌、膜明串珠菌厭氧菌只能在無(wú)氧或低Eh(Eh+)值時(shí), 才能生長(zhǎng)。消毒 采用較溫和的理化因素，僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分對(duì)人體或動(dòng)、植物有害的病原菌，而對(duì)被消毒的對(duì)象基本無(wú)害的措施。 ② 細(xì)胞物質(zhì)在含水量高時(shí)容易變性凝固； ③ 蒸汽凝固時(shí)釋放的大量蒸汽潛熱可迅速提高滅菌物品的溫度。誘變育種 ② 碳酸鈣平板透明圈：產(chǎn)酸167。 菌落形態(tài)明顯不同于目的菌167。 測(cè)定：取107工具菌涂布于瓊脂培養(yǎng)基，將小瓊脂塊放于上面培養(yǎng)過(guò)夜，抑菌圈的出現(xiàn)，說(shuō)明瓊脂塊中有抗生素，大小說(shuō)明抗生素單位的高低厭氧性微生物的分離法（1）去除培養(yǎng)基中的溶解氧，降低Eh167。 工具菌：對(duì)目的抗生素敏感的微生物例：目的菌為產(chǎn)生抗G+細(xì)菌的抗生素的菌株工具菌可使用金黃色葡萄球菌167。 葡聚糖平板加剛果紅：葡聚糖酶216。 用接種環(huán)接種216。n 對(duì)象：耐高溫物品，一般培養(yǎng)基，生理鹽水，緩沖溶液，玻璃、陶瓷器皿等n 控制：嗜熱脂肪芽孢桿菌芽孢制劑②連續(xù)加壓蒸汽滅菌法 適用于大型發(fā)酵廠(chǎng)的大批培養(yǎng)基滅菌 135~140℃下維持5~15秒 2．過(guò)濾除菌法：n 原理：將微生物過(guò)濾去除n 對(duì)象：空氣，熱敏物質(zhì)，蛋白質(zhì)，酶，血清，纖維素，氨基酸等n 注意：3．輻射滅菌（放射線(xiàn)滅菌法）n 原理：微波、紫外線(xiàn)、g射線(xiàn)、X射線(xiàn)的殺菌作用。 兼性嗜酸菌：在低pH下生長(zhǎng)，在中性pH也長(zhǎng)。? 高滲溶液 細(xì)胞脫水，影響代謝活動(dòng)，引起質(zhì)壁分離，甚至死亡。③ 嗜熱微生物（高溫型）嗜熱微生物：最適生長(zhǎng)溫度50~60℃ 嗜高溫微生物：最適生長(zhǎng)溫度在80℃以上 嗜熱微生物在高溫下生長(zhǎng)的原因? 酶和其他蛋白質(zhì)中的更具有耐熱性；? 核酸中含有較多的GC對(duì)，對(duì)熱更加穩(wěn)定；? 細(xì)胞膜中飽和脂肪酸含量高，使膜具有熱穩(wěn)定性；? 細(xì)胞生長(zhǎng)速率快，能迅速合成生物大分子，以彌補(bǔ)由于高溫造成的破壞。也不等于發(fā)酵速度最高時(shí)的培養(yǎng)溫度或積累代謝產(chǎn)物量最高時(shí)的培養(yǎng)溫度，更不等于某一代謝產(chǎn)物量最高時(shí)的培養(yǎng)溫度。（橫向連接）雙糖肽先是插入細(xì)胞壁生長(zhǎng)點(diǎn)上作為引物的肽聚糖骨架中，通過(guò)轉(zhuǎn)糖基化作用使多糖鏈延伸一個(gè)雙糖單位。 它是TCA循環(huán)的一條回補(bǔ)途徑，可使TCA循環(huán)不僅具有高效產(chǎn)能功能，而且還兼有可為許多重要生物合成反應(yīng)提供有關(guān)中間代謝物的功能。 硝酸鹽呼吸 （反硝化作用） 碳酸鹽呼吸（反硫化作用） 硫酸鹽呼吸 （甲烷生成作用）兩用代謝途徑凡在分解代謝和合成代謝中均具有功能的代謝途徑，稱(chēng)為兩用代謝途徑。（以EMP途徑為基礎(chǔ)）發(fā)酵小結(jié)糖酵解作用是各種發(fā)酵的基礎(chǔ)，而發(fā)酵則是糖酵解過(guò)程的發(fā)展 。 北方漬酸菜，南方泡菜是常見(jiàn)的乳酸發(fā)酵 。細(xì)菌的乙醇發(fā)酵（通過(guò)ED途徑進(jìn)行的乙醇發(fā)酵）參與微生物 ：運(yùn)動(dòng)發(fā)酵單孢菌 發(fā)酵途徑：ED途徑 乙醇發(fā)酵特點(diǎn)：發(fā)酵基質(zhì)氧化不徹底，發(fā)酵結(jié)果仍結(jié)果有機(jī)物；酶體系不完全，只有脫氫E，沒(méi)有氧化酶； 產(chǎn)生能量少，酵母乙醇發(fā)酵凈產(chǎn)2ATP，細(xì)菌1ATP。這種經(jīng)ED途徑發(fā)酵與酵母菌通過(guò)EMP途徑生產(chǎn)乙醇的機(jī)制不同的生產(chǎn)乙醇的方法稱(chēng)為細(xì)菌酒精發(fā)酵。HMP途徑與EMP途徑有著密切的關(guān)系，因?yàn)镠MP途徑中的3磷酸甘油醛可以進(jìn)入EMP，因此該途徑又稱(chēng)磷酸戊糖支路。嗜鹽菌是一類(lèi)必須在高鹽（~)環(huán)境中才能正常生長(zhǎng)的古生菌，廣泛分布在鹽湖、曬鹽場(chǎng)或鹽腌海產(chǎn)品上，常見(jiàn)的咸魚(yú)上的紅紫斑塊就是嗜鹽菌的細(xì)胞堆。（1）循環(huán)式光合磷酸化 一種存在于厭氧光合細(xì)菌中的利用光能產(chǎn)生ATP的磷酸化反應(yīng)，由于它是一種在光驅(qū)動(dòng)下電子的循環(huán)式傳遞而完成的磷酸化，故稱(chēng)循環(huán)式光合磷酸化。該學(xué)說(shuō)的中心思想是質(zhì)子勢(shì)推動(dòng)的質(zhì)子跨膜運(yùn)輸啟動(dòng)并驅(qū)使F1F0ATP酶構(gòu)象發(fā)生變化，這種構(gòu)象變化導(dǎo)致該酶催化部位對(duì)ADP和Pi的親和力發(fā)生變化，并促進(jìn)ATP的生成和釋放。這種關(guān)系用數(shù)量來(lái)表示稱(chēng)為P/O比（即molATP/mol氧原子）。連續(xù)發(fā)酵的缺點(diǎn)：①菌種易退化—由于長(zhǎng)期讓微生物處于高速率的細(xì)胞分裂中，故即使其自發(fā)突變率極低，仍無(wú)法避免突變的發(fā)生，尤其當(dāng)發(fā)生比原生產(chǎn)菌株?duì)I養(yǎng)要求降低、生長(zhǎng)速率增高、代謝產(chǎn)物減少的負(fù)變菌株時(shí)；②易污染雜菌，在長(zhǎng)期的連續(xù)運(yùn)轉(zhuǎn)中，存在著因設(shè)備滲漏、通氣過(guò)濾失靈等造成的污染；③營(yíng)養(yǎng)物的利用率一般低于單批培養(yǎng)。然后將濾膜翻轉(zhuǎn)并置于濾器中，其上慢速留下新鮮培養(yǎng)液，最初流出的是未吸附的細(xì)胞，不久，吸附的細(xì)胞開(kāi)始分裂，在分裂后的兩個(gè)子細(xì)胞中一個(gè)仍吸附在濾膜上，另一個(gè)則被培養(yǎng)液洗脫。 同步生長(zhǎng)同步培養(yǎng)法：使培養(yǎng)物中所有微生物細(xì)胞都處于相同的生長(zhǎng)階段的培養(yǎng)法，稱(chēng)為同步培養(yǎng)法。 (3)有的微生物在穩(wěn)定期時(shí)開(kāi)始合成抗生素等次生代謝產(chǎn)物（secondary metabolites）——穩(wěn)定期產(chǎn)物（idiolites）。 分為延滯期、指數(shù)期、穩(wěn)定期和衰亡期等4個(gè)時(shí)期 （1）延滯期（Lag phase）又稱(chēng)停滯期、調(diào)整期和適應(yīng)期 A、延滯期的特點(diǎn):分裂遲緩、代謝活躍 此法適用于各種好氧菌或厭氧菌。平板 U行管 然后將濾膜干燥、染色，并經(jīng)處理使膜透明，再在顯微鏡下計(jì)算膜上（或一定面積中）的細(xì)菌數(shù)。（1）測(cè)體積法：粗放型，在刻度離心管中測(cè)沉降量 （2）稱(chēng)干重法：精確型，離心法和過(guò)濾法獲得菌體細(xì)胞，微生物的干重一般為其濕重的10％～20％。EMB培養(yǎng)基常用作區(qū)別大腸桿菌和產(chǎn)氣桿菌。 用于將某種微生物從混雜的微生物群體中分離出來(lái)的培養(yǎng)基。 ％左右的瓊脂制成。由天然固態(tài)基質(zhì)直接配制成的培養(yǎng)基。 缺點(diǎn)：價(jià)格較貴、配制較煩，且微生物生長(zhǎng)比較一般。第二種以CaCO3作“備用堿”進(jìn)行調(diào)節(jié)。 （2）水的活度： 實(shí)際上是控制好培養(yǎng)基中可溶物質(zhì)（特別是碳源）的濃度。有膜載體參加，膜載體（滲透酶）有特異性。有利于機(jī)體的生長(zhǎng)。 （二）氮源（nitrogen source） ：凡能提供微生物生長(zhǎng)繁殖所需氮元素的營(yíng)養(yǎng)源，稱(chēng)為氮源。細(xì)菌，酵母菌，放線(xiàn)菌 菌落第三章 微生物的營(yíng)養(yǎng)與生長(zhǎng)營(yíng)養(yǎng)：指生物體從外部環(huán)境中攝取對(duì)其生命活動(dòng)必需的能量和物質(zhì)，通過(guò)吸收利用以滿(mǎn)足正常生長(zhǎng)和繁殖需要的一種最基本的生理功能。免疫性是由原噬菌體產(chǎn)生的阻遏蛋白可抑制原噬菌體的合成。 裂解量：每個(gè)敏感細(xì)胞受噬菌體侵染后能裝配、釋放出噬菌體的平均數(shù)量，稱(chēng)為裂解量。Eg： 由噬菌體在菌苔上形成的“負(fù)菌落”即噬菌斑（plaque）；由動(dòng)物病毒在宿主單層細(xì)胞培養(yǎng)物上形成的空斑（plaque）；由植物病毒在植物葉片上形成的枯斑（lesion，病斑）。繁殖方式 ①斷片繁殖——菌絲的斷片可發(fā)育成新的菌絲體②無(wú)性繁殖：孢囊孢子，分生孢子，厚垣孢子，節(jié)孢子③有性繁殖：卵孢子，子囊孢子，接合孢子，擔(dān)孢子擔(dān)子菌的生活史上，菌絲體可分五個(gè)階段：① 初生菌絲（一級(jí)菌絲）擔(dān)孢子萌發(fā)，形成由許多單核