【正文】 有灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌。④等待平板冷卻凝固，大約需5～10min。純化大腸桿菌（1）微生物接種的方法最常用的是平板劃線法和稀釋涂布平板法。②在火焰旁冷卻接種環(huán)，并打開棉塞。注意不要將最 后一區(qū)的劃線與第一區(qū)相連。②取少量菌液，滴加到培養(yǎng)基表面。當菌落長成后，將試管放入4℃的冰箱中保藏。人及動物的營養(yǎng)物質：水、無機鹽、糖類、脂質、蛋白質、維生素六類。只有當土壤中的細菌將尿素分解成氨之后，才能被植物利用。通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)，就能推測出樣品中大約含有多少活細菌。從富含有機物、潮濕、pH≈7的土壤中取樣。當我們在含有纖維素的培養(yǎng)基中加入剛果紅時，剛果紅能與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復合物。（2）將濾紙埋在土壤中有什么作用？你認為濾紙應該埋進土壤多深？將濾紙埋在土壤中能使纖維素分解菌相對聚集，實際上是人工設置纖維素分解菌生存的適宜環(huán)境。酒精是一種常用有機溶劑，但DNA卻不能溶于酒精（特別是95％冷卻酒精），但細胞中蛋白質可溶于酒精。溫度值為60～80℃，因為該溫度值蛋白質變性沉淀，而DNA不會變性。在選取材料時，應本著DNA含量高、材料易得、便于提取的原則。因此，通過反復溶解與析出DNA，就能夠除去與DNA溶解度不同的多種雜質。怎樣鑒定析出的白色絲狀物就是DNA呢？具體做法。反應柱能連續(xù)使用半年，大大降低了生產成本，提高了果糖的產量和質量。 【注】活化：讓處于休眠狀態(tài)的微生物重新恢復正常的生活狀態(tài)2。海藻酸鈉溶液與酵母細胞混合 將溶化好的海藻酸鈉溶液冷卻至室溫，加人已活化的醉母細胞，進行充分攪拌，使其混合均勻，再轉移至注射器中。檢驗凝膠珠是否形成，可用下列方法：用鑷子夾起一個凝膠珠放在實驗桌上用手擠壓，如果不容易破裂，沒有液體流出就表明成功地制成了凝膠珠，還可以用手將凝膠珠在實驗桌上用力摔打，如果凝膠珠很容易彈起，也表明制備的凝膠珠是成功的。（2）緩沖液作用：抵制外界酸、堿對溶液pH的干擾而保持pH穩(wěn)定。2．粗分離①分離血紅蛋白溶液 將攪拌好的混合溶液離心后，試管中的溶液分為4層。調節(jié)緩沖液面：加入20mmol/L的磷酸緩沖液到適當高度↓洗脫：連接緩沖液洗脫瓶，打開下端出口，進行洗脫。如果色譜柱出現(xiàn)紋路或是氣泡，輕輕敲打柱體以消除氣泡，消除不了時要重新裝柱。10．如何檢測血紅蛋白的分離是否成功如果凝膠色譜柱裝填得很成功、分離操作也正確的話，能清楚地看到血紅蛋白的紅色區(qū)帶均勻、狹窄、平整，隨著洗脫液緩慢流出；如果紅色區(qū)帶歪曲、散亂、變寬，說明分離的效果不好，這與凝膠色譜柱的裝填有關。7．裝填完后，立即用洗脫液洗脫的目的：使凝膠裝填緊密8．加入檸檬酸鈉有何目的？為什么要低速、短時離心？為什么要緩慢攪拌？防止血液凝固；防止白細胞沉淀；防止紅細胞破裂釋放出血紅蛋白。此外，離心速度過高和時間過長，會使白細胞和淋巴細胞一同沉淀，也得不到純凈的紅細胞，影響后續(xù)血紅蛋白的提取純度。透析可以去除樣品中分子量較小的雜質，或用于更換樣品的緩沖液。二、實驗步驟1．樣品處理① 紅細胞的洗滌洗滌紅細胞的目的是去除雜蛋白，采集的血樣要及時采用低速短時間離心分離紅細胞，然后用膠頭吸管吸出上層透明的黃色血漿，將下層暗紅色的紅細胞液體倒入燒杯，再加入五倍體積的生理鹽水，緩慢攪拌10min，低速短時間離心，如此重復洗滌三次，直至上清液中沒有黃色，表明紅細胞已洗滌干凈。（2）凝膠材料：多孔性，多糖類化合物，如葡聚糖、瓊脂糖。 【注】CaCl2溶液的作用：使膠體聚沉6 使用固定化酵母細胞發(fā)酵 a) 將固定好的酵母細胞(凝膠珠)用蒸餾水沖洗23次。配制海藻酸鈉溶液 ，放入50mL小燒杯中。固定化酶優(yōu)點：使酶既能與反應物接觸，又能與產物分離，還可以被反復利用。DNA鑒定……………… 二苯胺，沸水浴，呈現(xiàn)藍色注意事項：在雞血中加入檸檬酸鈉防止凝固；雞血靜置或離心以提高細胞懸液濃度；使用塑料燒杯；使用尼龍布過濾；玻棒沿同一方向攪拌；玻棒攪拌要緩慢（細胞破裂快速攪拌）；玻棒不要碰到燒杯壁；二苯胺試劑要現(xiàn)用現(xiàn)配等。析出與鑒定在處理植物組織時需要進行研磨，其目的是什么？研磨不充分產生什么結果？破碎細胞壁，使核物質容易溶解在NaCl溶液中；研磨不充分會使DNA的提取量減少，影響實驗結果，導致看不到絲狀沉淀物、用二苯胺鑒定不顯示藍色等。破碎細胞，獲取含DNA的濾液采用DNA不溶于酒精的原理，可以達到什么目的？將DNA和蛋白質進一步分離。但這種只產生淀粉酶的微生物產生的透明圈較為模糊，因為培養(yǎng)基中纖維素占主要地位，因此可以與纖維素酶產生的透明圈相區(qū)分。（2）剛果紅染色法分離纖維素分解菌的步驟 倒平板操作、制備菌懸液、涂布平板（3）剛果紅染色法種類一種是先培養(yǎng)微生物，再加入剛果紅進行顏色反應，另一種是在倒平板時就加入剛果紅。纖維素最終被水解成葡萄糖，為微生物的生長提供營養(yǎng)。測定土壤中細菌的數(shù)量，一般選用104 105 106測定放線菌的數(shù)量，一般選用103 104 105 測定真菌的數(shù)量，一般選用102 103 104（3）微生物的培養(yǎng)與觀察不同種類的微生物，往往需要不同的培養(yǎng)溫度和培養(yǎng)時間。對照實驗是指除了被測試的條件以外，其他條件都相同的實驗，其作用是比照試驗組，排除任何其他可能原因的干擾，證明確實是所測試的條件引起相應的結果。（3）配制選擇培養(yǎng)基的依據(jù)根據(jù)選擇培養(yǎng)的菌種的生理代謝特點加入某種物質以達到選擇的目的。在3mL的甘油瓶中，裝入1mL甘油后滅菌。結合平板劃線與系列稀釋的無菌操作要求，想一想，第2步應如何進行無菌操作？提示：應從操作的各個細節(jié)保證“無菌”。劃線結束后灼燒接種環(huán)，能及時殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避免細菌污染環(huán)境和感染操作者。⑥左手將皿蓋打開一條縫隙，右手將沾有菌種的接種環(huán)迅速伸入平板內，劃三至五條平行線，蓋上皿蓋。（3）稀釋涂布平板法是將菌液進行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進行培養(yǎng)。你用什么辦法來估計培養(yǎng)基的溫度？提示：可以用手觸摸盛有培養(yǎng)基的錐形瓶，感覺錐形瓶的溫度下降到剛剛不燙手時，就可以進行倒平板了。比較項理化因素的作用強度消滅微生物的數(shù)量芽孢和孢子能否被消滅消毒較為溫和部分生活狀態(tài)的微生物不能滅菌強烈全部微生物能 制作牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基（1）方法步驟：計算、稱量、溶化、滅菌、倒平板。培養(yǎng)基還要滿足微生物生長對PH、特殊營養(yǎng)物質以及氧氣的要求。如CONaHCO3等無機碳源；糖類、石油、花生粉餅等有機碳源。在液體培養(yǎng)基中加入凝固劑瓊脂（是從紅藻中提取的一種多糖，在配制培養(yǎng)基中用作凝固劑）后，制成瓊脂固體培養(yǎng)基。常見的乳酸菌有乳酸鏈球菌和乳酸桿菌。（4）吃腐乳時，你會發(fā)現(xiàn)腐乳外部有一層致密的“皮”。②裝瓶時，操作要迅速小心。配制鹵湯：鹵湯直接關系到腐乳的色、香、味。毛霉的生長：條件：將豆腐塊平放在籠屜內，將籠屜中的控制在15～18℃，并保持一定的溫度。實驗流程：讓豆腐上長出毛霉→加鹽腌制→加鹵湯裝瓶→密封腌制釀造腐乳的主要生產工序是將豆腐進行