分子生物學(xué)48122849-文庫吧在線文庫
【正文】 畜牧業(yè)和醫(yī)學(xué)）；基因工程技術(shù)的意義是（改造生命）、（創(chuàng)造新生命）。前者也叫（啟動(dòng)子），后者叫（終止位點(diǎn)）。 ）真核細(xì)胞基因轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物為單順反子。 ）串聯(lián)重復(fù)序列是形成衛(wèi)星DNA 的基礎(chǔ)。 ）1短分散片段重復(fù)順序的平均長度約為35005000bp。 ）1中度重復(fù)順序一般具有種特異性。 ）以RNA為模版合成出的DNA鏈叫負(fù)股鏈。 ）2原核細(xì)胞和真核細(xì)胞中許多mRNA都是多順反子轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物。 ）2在雙向復(fù)制中一條鏈按5′→3′的方向合成，另一條鏈按3′→5′的方向合成。 ）3所有多肽鏈經(jīng)核糖體翻譯出來即有正常生理功能。（（（（（ A．有關(guān) A．510bp C．100bp B．DNA聚合酶 D．RNA→RNA8. hnRNA是( B )A．存在于細(xì)胞核內(nèi)的tRNA前體 9. 以RNA為模板合成DNA的酶是（ D ）A．DNA聚合酶ⅢA．氨基酸側(cè)鏈修飾 D．誘導(dǎo)物1參與線粒體DNA復(fù)制的酶是（ D ） D．tRNA B．cAMP C．3’磷酸 D．噬菌體載體30. M13噬菌體是（ A ）A．單鏈DNA噬菌體 D．都不是四、名詞解釋1．高度重復(fù)基因：高度重復(fù)序列在真核生物細(xì)胞基因組中重復(fù)出現(xiàn)可達(dá)106次以上的DNA序列，稱為高度重復(fù)序列基因或高度重復(fù)序列DNA。其特點(diǎn)是具有固定的重復(fù)單位，該重復(fù)單位首尾相連形成重復(fù)序列片段，通常存在于間隔DNA和內(nèi)含子中。15．cDNA文庫：以細(xì)胞的全部mRNA逆轉(zhuǎn)錄合成的cDNA組成的重組克隆群體稱為cDNA文庫。：指能與特定mRNA互補(bǔ)結(jié)合的RNA片段，反義RNA由反義基因轉(zhuǎn)錄而來。5. 原核生物轉(zhuǎn)錄水平調(diào)控的方式有（反轉(zhuǎn)錄調(diào)控）和（正轉(zhuǎn)錄調(diào)控）兩種方式；前者又可分為（負(fù)控誘導(dǎo)）和（負(fù)控阻遏）；后者可分為（正控誘導(dǎo)）和（正控阻遏）。13. 原位雜交的特點(diǎn)是（能在成分復(fù)雜的組織中進(jìn)行單一細(xì)胞的研究）、（不需從組織或細(xì)胞中提取核酸，對(duì)含量極低的靶序列靈敏度高）和（能準(zhǔn)確反映組織細(xì)胞的相互關(guān)系及功能狀態(tài)）。21．原核生物基因表達(dá)調(diào)控的方式有（轉(zhuǎn)錄水平調(diào)控）和（翻譯水平的調(diào)控）中（轉(zhuǎn)錄水平調(diào)控）是主要的方式。27．分子克隆中常用的工具酶有（限制性核酸內(nèi)切酶）、（DNA聚合酶）、（DNA連接酶）、（DNA修飾酶）。34．常用的核酸探針包括（寡核苷酸探針）、（雙鏈探針）和（單鏈探針）。二、選擇題（ AD．5’羥基2. pBR322是（ C．穿梭載體 C．RNA噬菌體 ：制備DNA探針2．何謂載體？分子克隆中常用的載體有哪些？理想的載體應(yīng)具備哪些條件？變性：待擴(kuò)增的DNA模板加熱變形成單鏈；退火：降低溫度，是單鏈靶序列與寡核苷酸引物退火；延伸：在適當(dāng)條件下，利用DNA聚合酶使引物延伸，產(chǎn)生新的雙鏈。 平齊末端連接法：以同一種限制性內(nèi)切酶切制目的基因和載體DNA，產(chǎn)生平齊末端，在高濃度DNA，大量T4DNA連接酶存在時(shí)，可以直接利用平端將目的基因與載體連接起來E 不出現(xiàn)基因重疊現(xiàn)象F 具有相同基因，即編碼同工酶的基因。基因組愈大，間隔區(qū)DNA所占的比列也愈高。(2) 轉(zhuǎn)錄起始的正調(diào)控A 阿拉伯糖操縱子：是利用同一蛋白的不同結(jié)構(gòu)形式活化和抑制操縱子的調(diào)控方式。 缺點(diǎn)：易產(chǎn)生載體的自身環(huán)化B平齊端連接法：優(yōu)點(diǎn):可用T4連接酶連接任何DNA平端，這對(duì)不同DNA分子的連接十分有利，可防止自身環(huán)化。4．重組體的篩選常用的方法有哪些？簡述各種方法的原理。6. 何謂反義RNA？反義RNA對(duì)翻譯有何調(diào)控作用？反義RNA又稱mRNA互補(bǔ)RNA，指能與特定mRNA合的RNA片段，反義RNA由反義基因轉(zhuǎn)錄而來作用。真核細(xì)胞：酵母、昆蟲細(xì)胞，動(dòng)物細(xì)胞、植物細(xì)胞條件：必須是限制性內(nèi)切酶的缺陷型，既R菌株 必須是感受態(tài)細(xì)胞或能成為感受態(tài)細(xì)胞A RNA指導(dǎo)的DNA聚合酶活性 操縱基因：控制結(jié)構(gòu)基因轉(zhuǎn)錄、是調(diào)節(jié)基因1何謂SD序列？SD序列對(duì)翻譯有何影響？SD序列：與細(xì)菌16S rRNA 3，端互補(bǔ)的序列。5‘AUG缺失是某些原癌基因翻譯激活的原因。E重排。B DNA的修復(fù)合成 沒有3‘到5’外切酶活性1何謂順式作用元件？順式作用元件有哪些？在基因表達(dá)中各起何作用？順式作用元件：指某些能影響基因表達(dá)但不編碼新的蛋白質(zhì)和RNA的DNA序列，按照功能分為啟動(dòng)子、增強(qiáng)子、終止子、沉默子、衰減子、啟動(dòng)子：是決定RNA聚合酶‖轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn)的轉(zhuǎn)錄頻率的關(guān)鍵元件增強(qiáng)子：增強(qiáng)效應(yīng)明顯，對(duì)同源和異源基因同樣有效，對(duì)各種基因啟動(dòng)子均有作用沉默子或衰減子：不受距離和方向的限制，并可對(duì)異源基因的表達(dá)起作用終止子：指在模板DNA分子的5‘端轉(zhuǎn)錄終止信號(hào)1何謂反式作用因子？反式作用因子有哪些結(jié)構(gòu)域？在基因表達(dá)中各起何作用？概念：指能直接或間接地識(shí)別或結(jié)合在各順式作用元件8—12BP核心序列上，參與調(diào)控靶基因轉(zhuǎn)錄效率的一組蛋白質(zhì)，也稱序列特異性DNA結(jié)合蛋白，這是一類細(xì)胞核內(nèi)蛋白質(zhì)因子。一般DNA的兩條鏈只有一條受損傷，可將損傷部分切除，根據(jù)互補(bǔ)鏈的序列對(duì)其進(jìn)行修復(fù)。 必須是DNA重組缺陷型株，既REC菌株 5‘加帽意義：保護(hù)轉(zhuǎn)錄體MRNA不受5‘外切酶降解，增強(qiáng)MRNA的穩(wěn)定性，同時(shí)有利于MRNA從細(xì)胞核向胞質(zhì)轉(zhuǎn)動(dòng)，促進(jìn)MRNA與核糖體的結(jié)合5‘加帽意義：保證MRNA在轉(zhuǎn)錄過程中不被降解8. 試述PCR基本技術(shù)過程中引物設(shè)計(jì)的原則。B抗藥性標(biāo)志的篩選：如果克隆載體帶有某種抗藥性標(biāo)志基因，轉(zhuǎn)化后只有含這種抗藥基因的轉(zhuǎn)化子細(xì)菌才能在含該抗藥菌素的平板上幸存并形成菌落，[ 這樣就可將轉(zhuǎn)化菌與非轉(zhuǎn)化菌區(qū)別開來。C人工接頭連接法。A粘性末端連接法在負(fù)控誘導(dǎo)系統(tǒng)中，阻止蛋白不與效應(yīng)物結(jié)合時(shí)，結(jié)構(gòu)基因不轉(zhuǎn)錄；在負(fù)阻止系統(tǒng)中《組織蛋白與效應(yīng)物結(jié)合時(shí)，結(jié)果基因不轉(zhuǎn)錄。B真核細(xì)胞是基因轉(zhuǎn)錄的產(chǎn)物為單順反子。 4,DNA鏈接酶：1粘端DNA或DNA切口間的連接 D．都不是三、問答題1．分子克隆中常用的工具酶有哪些？各有何用途？ D．噬菌體載體4. M13噬菌體是（ A ）A．單鏈DNA噬菌體 C．3’磷酸38．印跡雜交中常用的印跡方法有（Southern 印跡雜交）、（Northern 印跡法）、（斑點(diǎn)印跡雜交）（Western 印跡法）；39．PCR技術(shù)的基本過程是（高溫變性）、（低溫退火）、（中溫延伸）。31. 重組體導(dǎo)入原核生物細(xì)胞中的常用方法有（氯化鈣轉(zhuǎn)化法）和（轉(zhuǎn)染法）；重組體導(dǎo)入真核生物細(xì)胞中的常用方法有（物理方法）、（化學(xué)法）和（生物法）。17. 引起DNA損傷、突變的因素是（DNA復(fù)制的錯(cuò)誤）、（DNA的修復(fù)合成）、（堿基的自發(fā)突變）、（物理因素）和（化學(xué)因素）。（熱變性）、（酸堿變性）和（化學(xué)試劑變性）三類。習(xí)題二 一、填空題1. 真核生物基因組DNA序列可分為（高度重復(fù)序列）、（中度重復(fù)序列
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