【正文】 樣品和玻璃瓶間水蒸汽的積累，嚴重地減少傳向產(chǎn)品的熱轉(zhuǎn)換，導致冷凍核的形成，而它熔化后將在樣品中產(chǎn)生一潮濕區(qū)域。然而，如果能夠移去干燥層，那么也將是非常有益的，實際上清除了蒸汽的阻力，干燥速率就會大大增加。事實上，在產(chǎn)品表面存在的氣體分子以及因此產(chǎn)生與水分子的碰撞，而增加了離開一個水分子而又回來一個水分子的可能性。盡管有一個很大的蒸汽壓力差，其干燥速率仍將很慢，因為在產(chǎn)品上面會立即形成一個水蒸汽界面層，水分子到達冷凝器要沿著隨 機的擴散通道且經(jīng)受隨機雜亂碰撞。而從 260 到1300μHg ，通量的增加不顯著。一般最后一步驟通常不會限制整個工藝的干燥速率，除非冷凝器不能滿足低溫條件，或者設(shè)計缺陷或者超過了冷凝器的工作能力。如果將未經(jīng)二次干燥的產(chǎn)品置于室溫下，那么產(chǎn)品中足量的水分會迅速使產(chǎn)品分解。如果沒有精確的方法來確定溫度是否滿足要求，同時完成停機，那么干燥仍將繼續(xù)下去。 人們都已充分認識到無菌灌裝作業(yè)過程中人員是最主要的污染源。裝量不足時，瓶中藥效也低。使人不易理解的是控制極限是根據(jù)平均值的偏差，然 而誤差是指大宗產(chǎn)品的極限值。通過改進凍干工藝將吸附速率降低到最小程度，可防止混濁的產(chǎn)生。通常，使用下述方法來確認膠塞對凍干工藝的適應性： 升華試驗 將 5 個膠塞放入真空升華器內(nèi)，膠塞底部面向冷面。實驗過程以頭孢羥唑鈉為例 ,將三個裝有 結(jié)晶頭孢羥唑鈉的藥瓶放入玻璃干燥器內(nèi)，同時將膠塞放在藥瓶口，膠塞與瓶口之間應有縫隙，使瓶內(nèi)達到真空。如膠塞放置不當會使縫口擴大或縮小，縫口的擴大減少了氣體流出容器的阻力。采用全底盤式托盤的主要優(yōu)點：產(chǎn)品容易放進和取出；造成破損或把膠塞的位置搞亂的機會極少；只有這種型式的托盤才能在現(xiàn)在的真空冷凍干燥器的設(shè)計中用來對半成品進行干燥。 通常，凍干制劑藥品都是非最終滅菌的無菌藥品。因 此，不僅需要證明凍干機內(nèi)的塵埃顆粒數(shù)量是很少的，而且要 15 有清除它們的有效措施。通常，泄漏分為 “ 真泄漏 ” 和 “ 虛泄漏 ” ， “ 真泄漏 ” 和“ 虛泄漏 ” 是有區(qū)別的，因為前者起因于穿透，它使大氣和其它一些物質(zhì)進入干燥器內(nèi)，汽體進入干燥器后，會嚴重地影響干燥過程中腔內(nèi)壓力。在這種情況下，利用氦探測法的幫助，用氣體分析系統(tǒng)確定泄漏的發(fā)生點。通常，用于冷凍干燥的壓力計有三種類型：麥克勞爾真空規(guī)、 熱電偶壓力計以及電容測壓計。因此，盡管組成成分的改變使真空總壓力有些輕微的變化，但因為熱傳導率在的改變，壓力計仍能指示出總壓力的巨大改變。 影響藥液配制的主要因素 (1)藥液的配制不僅 對藥物制劑是重要的而且和凍干工藝有關(guān)。 配制裝置的清洗和滅菌 配制結(jié)束后，應及時對配制裝置進行清洗和滅菌。 (3)由于凍干藥品生產(chǎn)是非最終滅菌的無菌藥品生產(chǎn)過程，凍干產(chǎn)品不能夠進行滅菌或除菌過濾（例如無菌粉末注射劑），其配料過程應在背景環(huán)境為 100， 000 級，環(huán)境為 100 級的條件下進行。 (3)藥液轉(zhuǎn)移分裝。此種灌裝方式的配料系統(tǒng)主要使用在中、小規(guī)模的凍干生產(chǎn)線上，該配料系統(tǒng)中藥液配置過程與藥液輸送管道平時處于分離的狀態(tài)。 配料交叉污染的控制 配料時應仔細充分的考慮物料的交叉污染趨勢。原輔料稱量室是應防止人為差錯的首要地方，位置在配料室附近，設(shè)置固定的稱量室是防止差錯。許多抗生素：如某些半合成 的青霉素、頭孢菌素和紅霉素、強力霉素、氯霉素的鹽類都是由凍干工藝制造的。在實際生產(chǎn)過程中，通常采用不同孔徑的濾器對藥液分級過濾，有時還需要脫炭處理，去除熱原物質(zhì)，最后通過一個孔徑為 的微孔過濾器對藥液過濾除菌。濾器和濾膜在使用前應進行潔凈處理，并用高壓蒸汽進行滅菌或作在線滅菌。 LRV 用于表示過濾器的過濾除菌效率，對孔徑為 的過濾器而言，要求每1cm2有效過濾面積的過濾除菌效率 LRV 值應不小于 7。 過濾工藝的控制要點 過濾前藥液帶菌量測定 應在除菌過濾前 (灌裝前 )對待過濾藥液的帶菌量進行測定。 在過濾工藝中，過濾設(shè)備的清潔、 干燥和貯存應能有效地控制生物負荷（微生物污染水平）及細菌內(nèi)毒素的污染水平。應設(shè)定時限控制的步驟包括：藥液的配制至滅菌，除菌過濾，產(chǎn)品在生產(chǎn)線上的暴露時間，已滅菌設(shè)備、容器和密封件存放的時間。 當無菌生產(chǎn)過程中的液體產(chǎn)品經(jīng)過證明可以過濾除菌時，應需要針對產(chǎn)品特有的除菌過濾。而較小規(guī)模操作時，藥液容器和過濾組件都可以進行適當?shù)娜斯で鍧嵑颓?洗，然后對其進行高壓滅菌和消毒，并在 100 級單向流潔凈空氣的保護下進行無菌組裝。 (1)藥液邊過濾，邊灌裝。 藥液配制后輸送方式的選擇 配料后藥液一般 采取用二種方式進行輸送：一種采用泵（衛(wèi)生級）輸送；另一種是采用潔凈壓縮空氣或潔凈惰性氣體壓料輸送。一般情況下，水溶性物料可采用壓縮空氣。 配料后的藥液應以潔凈流體輸送條件來處理，整個系統(tǒng)也要依據(jù) GMP 要求進行清洗和滅菌，配料輸送系統(tǒng)應具有在 線清洗 CIP 和在線滅菌 SIP 的處理功能。 膠塞清洗機的選擇要點 本要點以氣流與水流交換沖擊的清洗法為例，其它機型可參照相應變動。 (4)能適應國標的天然膠塞和丁基膠塞的清洗滅菌干燥。 (5)考慮到需要經(jīng)常滅菌的零部件應適應高溫不變形和不腐蝕。 (3)管路應無死角，確保停車時能放盡余水。內(nèi)部焊后表面均需拋光，周角應園弧過渡。 (3)出膠塞輸送機構(gòu)一般推薦用螺旋出料。 (3)安全裝置：要有機械過載保護裝置；容器上的安全閥按 “ 容 規(guī) ” 要求配制。 (2)設(shè)有在線顯示和打印筒體內(nèi)蒸汽 加熱溫度與時間參數(shù)和變化曲線。 聯(lián)機性： (1)與相關(guān)輔助設(shè)備（如壓縮機等）正常運行時，才能啟動本機 。10 ％； (5)滅菌腔室內(nèi)空載熱分布試驗，各點（包括冷點）的溫度在每次滅菌程序運行中的差值 ≤177。 (3)為使凍干機的正常運轉(zhuǎn)，需考慮機械使用的物品，如油、潤滑油和熱交換油等，均以不得改變制品活性成份及其組分理化特性、量、效價和純度為原則。國產(chǎn)冷凍干燥機大致是消化吸收國外愛德華、泰事達和蘭寶等技術(shù)發(fā)展而來的。 主要控制指標 (1)容器密封性試驗，真空狀態(tài)下滅菌腔室泄漏率：在 5min 內(nèi)，腔室內(nèi)壓力變化應＜ ； (2)滅菌腔室內(nèi)塵埃粒子監(jiān)測，符合 100 級潔凈度的標準。 (2)循環(huán)泵未開啟時，機器不運行。圖形操作終端界面友好，幫助菜單提供多項可先擇工藝的工藝步驟，同時也能自行在觸摸屏上設(shè)定。 (2)與密封接觸主軸面需經(jīng)特殊表面硬化和表面精磨處理，做到無泄漏。 (5)腔體筒體內(nèi)表面制后需拋光，外表面包保溫材料。 (7)所有管路應標明管內(nèi)物料流向。 (3)水壓 ≥ ，氣壓 ≥0. 2MPa；注射用水溫度 ~60℃ 。 結(jié)構(gòu)和制造 34 材質(zhì) (1)凡注射用水、氣系統(tǒng)的管道、管件、清洗轉(zhuǎn)鼓、清洗腔體、泵等直接接觸潔凈水氣的零部件均至少應用低碳奧氏體不銹鋼，其中注射水管路用 316L不銹鋼拋光管。 (4)洗滌介質(zhì)：注射用水；滅菌介質(zhì)：純蒸汽；熱風過濾精度： 100 級。 膠塞清洗 機的種類 膠塞清洗機一般可分為整個容器處理型和水平多室轉(zhuǎn)筒處理型，前者，整個容器處理型又可分單一轉(zhuǎn)筒式和搖擺式，單一轉(zhuǎn)筒式常有氣流與水流交換沖擊的清洗法和超聲波加水淋清洗法；搖擺式采用氣液固流化清洗法。通常，藥液在除炭過濾后在輸送系統(tǒng)中再經(jīng)過二級無菌過濾，前級選用 孔徑濾芯，后級選用 孔徑濾芯。合格后經(jīng) 微孔濾膜過濾至灌裝間，含量應在內(nèi)控范圍內(nèi) (~)。因此，可以極大地保證最終濾液的無菌性。 凍干藥液配制過濾系統(tǒng)設(shè)置的相關(guān)問題 配制量的大小 30 大多數(shù)凍干粉針制劑的情況是量小品種多， 在配制罐選型與配套時應盡量考濾將配制罐的容量和結(jié)構(gòu)型式的適用范圍加大一些，同時也應注意批號與配制系統(tǒng)的關(guān)系應按照 GMP 相匹配。 29 傳統(tǒng)上，除菌過濾工藝的實現(xiàn)是通過無菌壓縮空氣壓濾藥液，即將配料罐或藥液貯存容器中的原料液體利用壓縮空氣的壓力壓濾到藥液的接受容器中，在配料罐 和無菌藥液受器之間安裝除菌過濾器。采用時限控制還能夠防止過濾器上游微生物污染及細菌內(nèi)毒素污染的明顯增加。一般情況下，設(shè)備表面的細菌內(nèi)毒素可采用高溫法滅活，或通過清洗去除。通常，可取 已經(jīng)過濾的溶液樣品，使用鱟試劑法 (LAL)測定其內(nèi)毒素的數(shù)量，對預過濾前的溶液至少取 100ml 的樣品進行檢驗 (尤其是在有革蘭氏陰性菌存在時 )，從而對生產(chǎn)工藝進行評價。 27 藥液過濾器使用的基本要求 在過濾除菌中，一般無法對全過程中過濾器的關(guān)鍵參數(shù)（濾膜孔徑的大小及分布，濾膜的完整性及 LRV）進行監(jiān)控。濾膜大多是聚合物制成，種類較多，如醋酸纖維素、硝酸纖維素、丙烯酸多聚物、聚氯乙烯、尼龍等，除菌級的濾膜孔徑為 。 為了從工藝中有效地去除活的微生物并獲得無菌藥液，使用過濾器的名義孔徑通常為 或更小。 配制藥液的過濾除菌要求 在凍干制劑的生產(chǎn)中，利用細菌不能通過致密小孔濾材的原理，過濾除去工藝過程中使用的氣體或液體中微生物的方法。稱量用的計量器具每年應有具有法定資格的部門校驗一次，還應建立日常自己校驗的 規(guī)定。 21 恰當?shù)耐L系統(tǒng)可以有效地防止?jié)崈羰覂?nèi)空氣中藥物粉塵帶來的交叉污染風險。圖 3 為中、小型間隙過濾灌裝方式的配料系統(tǒng)示意圖。該配料系統(tǒng)能適應邊過濾，邊藥液灌裝的生產(chǎn)形式。先按照藥品處方要求，注入定量的注射 用水至濃配罐內(nèi)，然后將藥物的活性成分和輔料，按處方稱量后加入濃配罐內(nèi)，在規(guī)定的溫度條件下攪拌溶解均勻。對于水溶性藥物處方，應盡可能的采用注射用水作為藥物的溶劑。 (3)配制是處于凍干產(chǎn)品的關(guān)鍵性地位，因此確定配方中的關(guān)鍵參數(shù)是極其重要的， 參數(shù)的數(shù)量和配制工藝的實質(zhì)和置信度的期望值有關(guān)。 藥液配制的原理和步驟 藥液配制是將單組分或多組分的固體或液體藥物，按照藥物處 方的要求均勻地溶解混合在液體中。所以，壓力越高，熱絲溫度就越低。用氦氣對干燥器進行控測可以找出泄漏的實際位置。在冷凝器的溫度低于－６０ ℃ 的時候通過對壓力升高的速率的檢查能夠 確定干燥器的實際泄漏情況，真泄漏說明冷凍干燥器外界的氣體進入到干燥腔室中。 凍干機的第二污染源是干燥器中的非大氣性的汽化物，一般把這類汽化物看成是潛伏性泄漏，這些可能來自真空泵系統(tǒng)回流中的碳氫化合物、擱板或冷凝器中的流體方面的泄漏、或清洗及滅菌操作所留下的殘留物。它可能是在凍干機制造過程中所產(chǎn)生的，即為了達到光潔度要求對干燥腔室進行拋光，拋光中產(chǎn)生的微小顆粒積聚在難于清潔的地方形成污染源，塵埃顆粒還可能從生產(chǎn)結(jié)束后的清潔工作后留下的殘留物中產(chǎn)生。爾后把底板重新滑插進容器的底下，就能把容器從擱板上取走。 一旦把瓶口上的膠塞壓下，就沒有可能來確定哪一個膠塞的定位是不妥當?shù)牧?，防止發(fā)生這種情況的最好的方法是在送入干燥腔之前仔細地檢查膠塞。并用石油醚用方法抽提水溶液，抽提物用來測定石蠟和硫。用干燥空氣排放到升華器中，移去液氮。同時， 排氣膠塞與溫度有關(guān)。雖然藥物化學降解也可能引起混濁的原因，但是，膠塞中揮發(fā)性成分是引起混濁的常見來源。 因為對灌裝量可以進行多次的單獨測量，整個生產(chǎn)過程的灌裝情況在控制圖表上的灌裝量是平均值，出現(xiàn)平均值達到或甚至超過與誤差極限相等的控制極限幾乎是不可能的。目前，采用的自動裝卸料系統(tǒng)分全自動裝卸料系統(tǒng)和半自動裝卸料系統(tǒng) 兩種。 灌裝過程的無菌保證 凍干產(chǎn)品的玻瓶灌裝從某種程度上講頗為特殊，將膠塞加到玻瓶頂部，并最終在凍干機內(nèi)壓塞封口，玻瓶的藥液或凍干品在最終密封以前始終存在被污染的風險。雖然二次干燥在初級干燥之后，一些吸收的水分仍能同冰的升華一起排除。它出現(xiàn)在無任何溫度改變下，且通過液態(tài)的脫水得到干燥，母體被破壞還在升華冰界面上進行。 水蒸汽在 冷凝器中的冷凝 10 如果忽略冷凝蒸汽的熱流，在水分子從產(chǎn)品中轉(zhuǎn)移出來的過程中，這是最后一步。另外，過低的干燥腔室壓力有可能使密封橡膠塞中的揮發(fā)性成分逸出，從而污染產(chǎn)品。然而此方法可看出，在凍干中并不要求真空。整個干燥期間都要進行密封，如果安置正確，它不會阻礙整個干燥速率。這是冷凍溶液將在不引起中間體的熔化狀態(tài)下盡可能地接近始熔溫度條件下完成干燥的原因。實際上，為了使輸入熱能與升華所需熱能精確地平衡，要不停地減小擱板溫度是困難的。在冷凍干燥過程中，因為升華本身要求有潛在的熱能，如果沒有熱能傳向產(chǎn)品，那么升華冰面的溫度就會下降。熱能來自制品容器的下端，通過傳導方式，使冷凍塊傳導至升華表面。 在確定藥品的干燥程序時，必須證明與時間有關(guān)的擱板溫度，品溫和干燥腔內(nèi)的總壓力表現(xiàn)出恒定性。干燥速率不僅和產(chǎn)品的溫度有關(guān)，且和腔內(nèi)壓力有關(guān)。這個問題可以通過加進一種具有真正低熔物質(zhì)得到解決，如山梨醇溶液的始熔溫度通過降低它的濃度（同時加進足夠的甘露醇以保持它的總?cè)苜|(zhì)濃度相同）而明顯增加。快速冰凍則幫助阻止蛋白質(zhì) (如果存在的話 )的變異，從而延長其在高濃度下鹽的暴露，因為冰的慢速生長，可招致逆種變異。由于各種液體過冷的冷凍趨勢