補充2酶催化活性的測定方法-文庫吧在線文庫
【正文】 產(chǎn)物之間沒有特征性的理化性質(zhì)，需通過另一個化學(xué)反應(yīng)或生化反應(yīng)，將底物或產(chǎn)物轉(zhuǎn)化為有明顯特征理化性質(zhì)的另一個化合物。一般來說，輔助酶越多，延滯期越長 是指酶促反應(yīng)速度保持恒定的時期，不受底物濃度的影響。利用該原理可以 測定以 NAD（ P） +或 NAD（ P） H為輔酶的氧化還原酶 例如 LD、 G6PD、 α HBD、 AD、 SD、 GLDH等 一些水解酶類或轉(zhuǎn)移酶類經(jīng)過酶促反應(yīng)將化合物中的某一基團(tuán)水解或移去，使無顏色的底物轉(zhuǎn)變?yōu)橛蓄伾漠a(chǎn)物。下表列舉了需要指示酶的酶偶聯(lián)方法來測定酶活性 待測酶 測定方法 輔助酶 指示酶 丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶 IFCC推薦法 LD 脂肪酶 GKGPOPOD法 GK、 GPO、 POD 5’核苷酸酶 5’IMP作底物的NPXOPPOD法 核苷磷酸化酶 NP 黃嘌呤氧化酶 XOD POD 舉 例 。根據(jù)這一原理，人們有意識地合成一系列底物用來測定酶活性，即人工合成色素原底物，利用這類底物測定的酶 2．基于人工合成色素原底物反應(yīng)原理 色素原底物 待測酶 產(chǎn)物的毫摩爾吸光系數(shù) 4硝基磷酸酚鈉鹽 ALP PNP（ 4硝基酚 405nm） , 3
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