20xx年醫(yī)學專題—mtt法檢測細胞活力講解(存儲版)
【正文】 效濃度和時間。)，因為細菌也可以導致MTT比色OD值的升高。用含15％胎牛血清培養(yǎng)液培養(yǎng)細胞時，高的血清物質會影響試驗孔的光吸收值。 接種時最好按照預實驗摸索出的密度(m236。 su224。,如何(r)DMSO,在同一批實驗(sh237。ng)的選擇是因顯色溶液而異的。,內容(n232。由于試驗本底增加，會試驗敏感性。)，應用SPSS軟件進行方差分析，p0.05時為相差顯著，p0.01時為相差非常顯著。,謝謝(xi232。d236。,第二十頁，共二十四頁。所以要熟練鞋、快些上板。,第十八頁，共二十四頁。)細胞的接種(鋪板),細胞過了30代以后就不要用了。對照孔和加藥孔都要加細胞、培養(yǎng)液、MTT、二甲基亞砜，不同的是對照孔加溶解藥物的介質，而加藥組加入不同濃度的藥物。 5.MTT法只能測定細胞相對數(shù)和相對活力，不能測定細胞絕對數(shù)。一定要多看文獻，參考別人的結果再定個比較大的范圍先初篩。這樣，才能(c225。 2． 設空白對照，與試驗平行設不加細胞只加培養(yǎng)液的空白對照孔。,舉例(jǔ l236。ngy242。)黑紙、錫箔紙包住避光以免分解。,藥物(y224。每板設對照。 5. 終止培養(yǎng)，小心吸去孔內培養(yǎng)液。)單層培養(yǎng)細胞，用含血清的培養(yǎng)液配成單個細胞懸液，以每孔20003000個細胞接種于96孔培養(yǎng)板中，每孔體積90 ul。n)為難溶性的藍紫色結晶物并沉積在細胞中，而死細胞無此功能。,MTT法目的(m249。ngku224。,第三頁，共二十四頁。原則上，細胞貼壁后即可加藥，每孔加藥10 ul，一般設5個復孔。在酶聯(lián)免疫檢測儀OD490nm處測量各孔的吸光值。 3）每孔加入10 ul MTT溶液（5 mg/ml，即0.5%MTT），繼續(xù)(j236。,MTT的配制(p232。,第九頁，共二十四頁?；蛴嬎阋种坡?。)0.0.00.000.0000.00000.000001umol/l，稀釋倍數(shù)為10，最大濃度為0.1，抑制率為0.9 0.80、0.60.40.21，0.06。,實驗前應明確(m237。否則細胞數(shù)太多敏感性降低，太少觀察不到差異。 3. 時間點的設定。,第十六頁，共二十四頁。由于試驗本底增加，會試驗敏感性。d249。n)奇
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