臨床醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)考試輔導(dǎo)醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)(存儲(chǔ)版)
【正文】 原的分子數(shù)量和；③免疫反應(yīng)后，結(jié)合于固相載體上復(fù)合物中被測(cè)定的酶標(biāo)抗原的量（酶活性）與樣品或標(biāo)準(zhǔn)品中非標(biāo)記抗原的濃度成反比。一般抗體檢測(cè)是較少采用，當(dāng)相應(yīng)抗原材料中含有與抗人IgG反應(yīng)的物質(zhì)，而且不易得到足夠的純化抗原或抗原的結(jié)合特異性不穩(wěn)定時(shí)，可采用這種方法測(cè)定抗體，目前臨床運(yùn)用較多的是乙型肝炎病毒核心抗體（HBcAb）和乙型肝炎病毒e抗體（HBeAb）的檢測(cè)。酶放大免疫測(cè)定技術(shù)（EMIT）主要用來檢測(cè)『正確答案』C『答案解析』酶放大免疫測(cè)定技術(shù)（EMIT）主要用來檢測(cè)半抗原。將抗原或抗體固相化的過程稱為『正確答案』B『答案解析』將抗原或抗體固相化的過程稱為包被。ELISA技術(shù)中待測(cè)孔（管）顯色顏色的深淺與待測(cè)抗原或抗體呈負(fù)相關(guān)的是『正確答案』D『答案解析』ELISA技術(shù)中待測(cè)孔（管）顯色顏色的深淺與待測(cè)抗原或抗體呈負(fù)相關(guān)的是競(jìng)爭(zhēng)法。ELISA一般不用于檢測(cè)、補(bǔ)體、腫瘤標(biāo)志物等蛋白質(zhì)『正確答案』E『答案解析』ELISA一般不用于檢測(cè)半抗原。主要用于血清中某種抗體亞型成分（如IgM）的測(cè)定，目前最常用的是病原體急性感染診斷中的IgM型抗體。必要時(shí)可將標(biāo)本經(jīng)過適當(dāng)稀釋后重復(fù)測(cè)定。酶免疫技術(shù)中最常用的固相載體是『正確答案』B『答案解析』酶免疫技術(shù)中最常用的固相載體是聚苯乙烯。非均相免疫測(cè)定中的ELISA在多種物質(zhì)的檢測(cè)中被廣泛的使用。由于機(jī)體產(chǎn)生抗體IgG的效價(jià)有限，一般不會(huì)出現(xiàn)鉤狀效應(yīng)。用于測(cè)定小分子抗原，如藥物、激素等。二、方法類型及反應(yīng)原理（一）檢測(cè)抗原的方法：屬于非競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合，檢測(cè)抗原最常用的方法，檢測(cè)含有至少兩個(gè)抗原決定簇的多價(jià)抗原。二、異相酶免疫測(cè)定是目前應(yīng)用最廣泛的一類標(biāo)記免疫測(cè)定技術(shù)。該法主要用于小分子激素和半抗原（如藥物）的測(cè)定，均相法的優(yōu)點(diǎn)是適合于自動(dòng)化測(cè)定，但反應(yīng)中被抑制的酶活力較小，需用靈敏的光度計(jì)測(cè)定，反應(yīng)的溫度也需嚴(yán)格控制。（三）包被與封閉：將抗原或抗體結(jié)合在固相載體上的過程。（二）固相載體的種類和選擇：聚苯乙烯塑料最常采用。HRP標(biāo)記抗體或抗原的最常用方法。二、酶標(biāo)記抗體或抗原（一）酶標(biāo)記抗體或抗原的制備標(biāo)記方法應(yīng)符合：技術(shù)方法簡(jiǎn)單、產(chǎn)率高，且重復(fù)性好；標(biāo)記反應(yīng)不影響酶和抗原或抗體的活性；酶標(biāo)志物穩(wěn)定，應(yīng)避免酶、抗體（抗原）以及酶標(biāo)志物各自形成聚合物等。OPD在HRP的作用下顯橙黃色，加強(qiáng)酸如硫酸或鹽酸終止反應(yīng)后呈棕黃色，最大吸收峰在492nm波長(zhǎng)。輔基是酶活性基團(tuán)，而主酶則與酶活性無(wú)關(guān)，HRP的純度用RZ（HRP分別在403nm和275nm處的吸光度比值）表示。用于標(biāo)記的酶應(yīng)符合：，催化反應(yīng)的轉(zhuǎn)化率高，純度高。用于均相酶免疫測(cè)定的酶還要求當(dāng)抗體與酶標(biāo)抗原結(jié)合后，酶活性可出現(xiàn)抑制或激活。酶變性后，RZ值不變但活性降低，因此使用酶制劑時(shí)，酶活性單位比RZ值更為重要。TMB穩(wěn)定性好，成色無(wú)需避光，無(wú)致突變作用，是目前ELISA中應(yīng)用最廣泛的底物。①優(yōu)點(diǎn)：操
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