【正文】 免疫應(yīng)答最早出現(xiàn)的是對 HBcAg的細(xì)胞免疫應(yīng)答 ， 隨后是體液免疫應(yīng)答產(chǎn)生抗 HBc， 總抗 HBc包括抗HBcIgM和 HBcIgG等 。 HBcAg陽性表示病毒在復(fù)制，傳染性強(qiáng)。 HBeAg在乙型肝炎潛伏期后期出現(xiàn) ， 晚于HBsAg， 它隨著 HBsAg的消失而消失 ， 假設(shè)急性肝炎發(fā)病 34個月后 HBeAg轉(zhuǎn)陰 ， 那么預(yù)后良好 。 第四十一頁，共九十三頁。 43 HBV 變異的檢測 HBV 突變的原因 乙肝病毒的復(fù)制是通過用逆轉(zhuǎn)錄酶〔 RT〕由RNA到 DNA，由于逆轉(zhuǎn)錄酶缺乏必要的校正能力。 ? 在有 HBsAg變異株檢測能力的測試中發(fā)現(xiàn) HBsAg和 antiHBs共存。 ? 臨床實(shí)驗(yàn)室與臨床醫(yī)生的對話對適當(dāng)利用實(shí)驗(yàn)室數(shù)據(jù)非常重要。慢性HBV感染中單獨(dú) HBcAb陽性可能是： （ 1）隱匿性感染：血清中HBsAg陰性、血清或組織中HBV DNA陽性， HBV其它血清學(xué)標(biāo)志物可以是陽性也可以是陰性。 第五十四頁，共九十三頁。 ? 作為一個特定的 HBV感染者，某一次檢測乙肝“兩對半〞，什么樣的模式組合都有可能出現(xiàn)。 62 ? 室間質(zhì)量評價〔實(shí)驗(yàn)室間比對〕： ? 使檢驗(yàn)結(jié)果具有可比性，保證檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。 定量試驗(yàn)：報告定量檢測工程的試驗(yàn)。 ? 定量檢測 第六十五頁，共九十三頁。 ? 用“符合度〞判斷質(zhì)控情況。 68 定性工程質(zhì)控還因注意的幾個問題 ? 質(zhì)控判斷和精密度控制分開。 第六十八頁，共九十三頁。 ? 如何培訓(xùn)： 講座、討論、自學(xué)和參加培訓(xùn)班等。 77 室內(nèi)質(zhì)控物的質(zhì)檢 (確認(rèn) ) ? 使用前的質(zhì)檢：檢測的 S/CO比值是否適宜、與前一批質(zhì)控物的 S/CO比值的比較 ? 使用中確實(shí)認(rèn)：質(zhì)控物的穩(wěn)定性、批與批質(zhì)控物的一致性 第七十七頁，共九十三頁。 3s范圍，即可將該批測定判為失控。 ? 22S 兩個連續(xù)的質(zhì)控測定值同時超出 +2s或－ 2s控制限 。本次結(jié)果陰性結(jié)果根據(jù)陽性質(zhì)控樣本的情況，決定是否可以發(fā)出，所有陽性樣本結(jié)果不能發(fā)出，需查找出現(xiàn)陽性率增高的原因，并在增加一倍陰性質(zhì)控樣本的情況下重新檢測。如失控信號被判斷為假失控時，常規(guī)測定報告可以按原先測定結(jié)果發(fā)出，不必重做。 92 第九十二頁，共九十三頁。如參加衛(wèi)生部臨檢中心及省臨檢中心的室間質(zhì)評。 (3)由于機(jī)體對 HBcAg免疫耐受、感染有缺陷的 HBV病毒株導(dǎo)致機(jī)體不產(chǎn)生。 90 第九十頁，共九十三頁。此時，首先要盡量查明導(dǎo)致產(chǎn)生失控信號的原因，然后再隨機(jī)挑選出一定比例〔例如 5％或 10％〕的患者標(biāo)本進(jìn)行重新測定，最后根據(jù)既定標(biāo)準(zhǔn)判斷先前測定結(jié)果是否可接受，對失控做出恰當(dāng)?shù)呐袛唷? 83 質(zhì)控規(guī)那么 ? 當(dāng)陰性質(zhì)控樣本為陽性時 ,不管陽性率測定比值為何，均為失控，所有陽性標(biāo)本須重新測定，并增加一倍陰性質(zhì)控樣本。 ? 13S 一個質(zhì)控測定值超出 177。 ? 常用的 13S質(zhì)控規(guī)那么，其中 1為原式中的 A， 3s為原式中的 L，表示均值177。 ? 同時選擇 S/CO處于 ～ 盒測定下限的有效性。 73 理想的操作方法 ? 按照試劑盒說明書操作即可嗎 ? ? 操作中影響測定結(jié)果的關(guān)鍵環(huán)節(jié) ? 寫出具有可操作性的 SOP 第七十三頁，共九十三頁。避開極低的 S/CO。 ? 無法統(tǒng)計(jì)質(zhì)量控制，但須回憶性統(tǒng)計(jì)各結(jié)果比率。 ? 用陰性質(zhì)控、弱陽性質(zhì)控〔如不可取得，只用陽性質(zhì)控〕來控制。 ? 半定量檢測 ? 肉眼或者儀器判讀，判別顏色強(qiáng)弱并報告“ x+〞或報告稀釋度的。 64 定性、半定量與定量工程的質(zhì)量控制 定性試驗(yàn)：報告“陰性 〞或者“陽性 +〞的試驗(yàn)。 60 質(zhì)控目的的新理解 ? 標(biāo)準(zhǔn)所有人： ? 主任 ? 操作者 ? 病人 ? 臨床 ? 廠家 ? 很大程度上，質(zhì)控的目的是為了失控 第六十頁，共九十三頁。 57 如何正確地理解和應(yīng)用乙肝血清學(xué)標(biāo)志物 檢測結(jié)果：臨床醫(yī)生方面 ? 根據(jù)檢驗(yàn)?zāi)康?，正確地開出檢驗(yàn)申請單。 54 單獨(dú) HBeAg陽性 出現(xiàn)特點(diǎn) 可能的解釋 實(shí)驗(yàn)室檢測原因 單獨(dú) HBeAg陽性 HBeAg陽性的孕婦，可通過 胎盤將 HBeAg傳給胎兒，造 成新生兒 HBeAg單獨(dú)陽性。 第五十一頁，共九十三頁。 48 結(jié)果的報告與解釋 ? 結(jié)果解釋的責(zé)任屬于臨床實(shí)驗(yàn)室，應(yīng)根據(jù)所檢測的人群解釋結(jié)果。 第四十四頁，共九十三頁。如果在 24周時患者 HBeAg依然 100PEI U/mL，那么建議調(diào)整治療方案。 (4〕 抗 HBe陽性說明病毒復(fù)制減少 ， 傳染性弱 ， 但并非沒有傳染性 。 HBeAg刺激機(jī)體產(chǎn)生抗 HBe抗體 。 第三十七頁，共九十三頁。 自然發(fā)生的逃逸變異株可使某些慢性攜帶者同時存在 HBsAg和抗 HBs，產(chǎn)生的抗體直接針對血循環(huán)中 HBsAg抗原不含的表位，因而不具保護(hù)作用。 抗 HBs陽性見于 HBV既往感染者 ， 乙肝恢復(fù)期及乙肝疫苗免疫后 。 32 HBsAg測定中可能存在的挑戰(zhàn)：假陰性 ? HBsAg含量低于所用方法的測定下限之下。 第二十七頁，共九十三頁。 ? 治療 12周時 HBsAg明顯下降〔 20240IU/ML〕可預(yù)測高應(yīng)答，治療效果較好，繼續(xù)用藥，完成療程。 ?HBsAg降低至 1IU/ml以下時， HBsAg和 HBIG的呈高度相關(guān)〔 r=,r=〕； AntiHBs升高至大于 1000IU/L時， HBsAg和HBIG的呈高度相關(guān)〔 r=,r=〕。 21 HBsAg定量檢測的臨床應(yīng)用 評價拉美呋定的治療效果 ?當(dāng)出現(xiàn) YMDD 突變出現(xiàn)的時候 , 通常在生化指標(biāo)出現(xiàn)異常之前血清 HBsAg 濃度和 HBV DNA滴度增加。 19 〔 2〕 HBsAg定量檢測 老指標(biāo)新意義 參考值： 臨床意義： 可作為 HBV攜帶者乙肝病毒復(fù)制的參考指標(biāo) 評價拉美呋定的治療效果 監(jiān)測應(yīng)用 α干擾素治療病人的乙肝病毒復(fù)制 確定肝移植病人免疫球蛋白的使用劑量 對患者的應(yīng)答情況進(jìn)行預(yù)測 對接受治療患者的免疫控制〔 HBsAg 轉(zhuǎn)陰〕結(jié)局進(jìn)行預(yù)測。 13 鑒別乙型肝炎與其他病毒性肝炎 病毒性肝炎 HBsAg陰性 HBsAg陽性 其他病毒性肝炎 乙型肝炎 乙肝病毒外表抗原的應(yīng)用 第十三頁，共九十三頁。66: 924931〕 第十頁，共九十三頁。 第五頁，共九十三頁。 2 主要內(nèi)容 ? 乙型肝炎病毒標(biāo)志物檢測 ? 質(zhì)量控制 室間質(zhì)量評價〔 EQA〕 室內(nèi)質(zhì)量控制〔 IQC〕 第二頁，共九十三頁。 7 人群 HBsAg攜帶率下降 第七頁，共九十三頁。最低含量為 ng/ml以下， 高者可達(dá) 2024μg/ml以上。 16 HBsAg 檢測方法進(jìn)展 定性 定性 定性 定量 70年代 80年代 90年代 2024年以后 瓊脂擴(kuò)散 反向血凝 時間分辨 對流免疫電泳 放射免疫 酶聯(lián)免疫 或化學(xué)發(fā)光 第十六頁，共九十三頁。 ?然而，一局部 HBeAg陰性但是 HBV DNA仍然保持較高的滴度 (106copies/ml)。 (B). ?除了監(jiān)測 HBV DNA 水平之外，同時監(jiān)測血清 HBsAg濃度或許能夠有