【正文】 er used airdry Camptotheca acuminata leaves as raw material, ethanol as extraction agent. In this extraction process, the single factor experiment and response surface experimental design analysis method were applied to reflux extraction, to research reflux extraction conditions and their impact on the yield of flavonoids extraction results, and seek the optimal conditions. The single factor experiments first had five factors that may affect the yield of flavonoids extraction: solidliquid ratio, extraction times, ethanol concentration, extraction temperature and extraction time and the results had shown that the approximate relationship of the various factors and extraction rate, and three significant factors: solidliquid ratio, ethanol volume fraction, extraction temperature. Then the classic three factors and three levels BoxBenhnken experimental design was carried out to establish a quadratic regression model for the extraction efficiency of total flavonoids, and analysis of the experimental data was processed by the DesignExpert software. The optimal conditions of ethanol extract for flavonoids in Camptotheca acuminata leaves were obtained as follows: solidliquid ratio1:40, ethanol volume fraction 60%, extraction temperature 80 176。廖陽(yáng)老師補(bǔ)充：作為現(xiàn)階段的論文也可以不去驗(yàn)證，這個(gè)可以留給下一個(gè)研究者去進(jìn)一步深化細(xì)致研究，以得到更優(yōu)化更精確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。 5 實(shí)評(píng)總分 成績(jī)等級(jí) 22 評(píng)閱教師評(píng)審意見(jiàn)： 評(píng)閱教師簽名： 說(shuō)明：評(píng)定成績(jī)分為優(yōu)秀、良好、中等、及格、不及格五個(gè)等級(jí)，實(shí)評(píng)總分 90— 100 分記為優(yōu)秀， 80— 89 分記為良好， 70— 79 分記為中等， 60— 69 分記為及格， 60 分以下記為不及格。 10 研究方案的 設(shè)計(jì)能力 整體思路清晰；研究方案合理可行。 15 寫(xiě)作規(guī)范 符合學(xué)術(shù)論文的基本要求。 10 選題恰當(dāng) 題目規(guī)模適當(dāng)，難易度適中；有一定的科學(xué)性。然后以提取率為響應(yīng)值，進(jìn)行了經(jīng)典的三因素三水平BoxBenhnken 試驗(yàn)設(shè)計(jì)，并通過(guò) DesignExpert 軟件對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，得到相關(guān)響應(yīng)面數(shù)據(jù)和分析結(jié)果。 本實(shí)驗(yàn)首先對(duì)可能影響喜樹(shù)葉黃酮提取的五個(gè)因素：料液比，提取次數(shù)，乙醇體積分?jǐn)?shù)，提取溫度，每次提取時(shí)間進(jìn)行單因素試驗(yàn)，結(jié)果可以看出各因 素與提取率的大致關(guān)系，并找出了三個(gè)顯著影響因素即料液比，乙醇體積分?jǐn)?shù)，提取溫度。 學(xué) 生 簽 名： 20xx 年 3 月 5 日 指導(dǎo)教師簽名： 指導(dǎo)內(nèi)容 記錄 (六 ) 。 學(xué) 生 簽 名： 20xx 年 9 月 25 日 指導(dǎo)教師簽名： 指導(dǎo)內(nèi)容 記錄（三 ) 。影響黃酮提取的單因素主要有：乙醇體積分?jǐn)?shù)，提取溫度，提取時(shí)間，提取次數(shù)，料液比，不同粒度。 20xx 年 12 月至 20xx年 4 月，準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)器材和原料按照實(shí)驗(yàn)方案進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果。 不同粒度的影響 取樣品 1g，乙醇體積分?jǐn)?shù) 70%， 70℃ 分別于 20 目、 40 目、 60 目、 80 目萃取 ,回流提取120min，測(cè)定提取液黃酮含量，并計(jì)算得率。 測(cè)定方法 按照標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制方法操作，測(cè)定吸光 度，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出測(cè)定樣品溶液總黃酮濃度 C。 黃酮含量測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 分別取 0. 0、 1. 0、 2. 0、 3. 0、 4. 0、 5. 0 mL的 0. 1mg/mL 蘆 丁標(biāo)準(zhǔn)溶液于 6 支比色管中，分別加入 0. 3 mL 5%亞硝酸鈉，放置 6 min，加 0. 3 mL 10%硝酸鋁后放置 6 min,，再加1. 0mol/L NaOH ，加 70%乙醇定容至 10 mL，搖勻，放置 12min 得測(cè)定液。 因此 ，本論文首創(chuàng)性地 對(duì)喜樹(shù)葉進(jìn)行響應(yīng)面設(shè)計(jì)優(yōu)化黃酮提取工藝對(duì)開(kāi)發(fā)喜樹(shù)葉資源具有一定的研究?jī)r(jià)值和現(xiàn)實(shí)意義。絕大多數(shù)植物體內(nèi)都含有黃酮類化合物，它在植物的生長(zhǎng)、發(fā)育、開(kāi)花、結(jié)果以及 抗菌 防病等方起著重要的作用。 20xx 年 12 月至 20xx年 4 月，準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)器材和原料按照實(shí)驗(yàn)方案進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果。 能力要求 （ 1）通過(guò)完成畢業(yè)論文，掌握科研工作中查找文獻(xiàn)數(shù)據(jù)并學(xué)會(huì)閱讀文獻(xiàn)。 本科學(xué)生畢業(yè)論文 題 目 （ 中文） ： 響應(yīng)面設(shè)計(jì)優(yōu)化喜樹(shù)葉黃酮提取工藝 （英文） ： Optimization of Extraction Process of Flavonoids from Camptotheca acuminata leaves Using Response Surface Methodology 院 （系） 生命科學(xué)與化學(xué)工程系 專業(yè)、年級(jí) 生物工程專業(yè) 20xx級(jí) 20xx 年 5 月 10 日 湖南科技學(xué)院本科畢業(yè)論文誠(chéng)信聲明 本人鄭重聲明：所呈交的本科畢業(yè)論文（設(shè)計(jì)），是本人在指導(dǎo)老師的指導(dǎo)下，獨(dú)立進(jìn)行研究工作所取得的成果，成果不存在知識(shí)產(chǎn)權(quán)爭(zhēng)議，除文中已經(jīng)注明引用的內(nèi)容外，本論文不含任何其他個(gè)人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫(xiě)過(guò)的作品成果。 （ 3）行文結(jié)構(gòu)合理，層次分明，格式規(guī)范。 20xx 年 11 月中旬，進(jìn)一步查閱有關(guān)文獻(xiàn)資料，完善實(shí)驗(yàn)方案。黃酮類化合物在植物體中通常與糖結(jié)合成苷類，小部分以游離態(tài)（苷元）的形式存在。國(guó)內(nèi)有研究涉及喜樹(shù)葉提取的索氏提取法，水提取法，微波提取法等，還有正交實(shí)驗(yàn)研究黃酮的提取，但對(duì)于響應(yīng)面的應(yīng)用在這個(gè)方面還沒(méi)有涉及 [59]。 2 試驗(yàn)方法 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制 稱取約 20mg 蘆 丁標(biāo)準(zhǔn)品于稱量瓶中置 105℃ 烘箱下烘干至恒重 ,干燥器中冷卻，精確稱取 10 mg 蘆丁 標(biāo)準(zhǔn)品，用 70%乙醇定容至 100 ml 為標(biāo)準(zhǔn)液。再取該溶液 mL，置于10 mL 容量瓶中 。 料液比的影響 取樣品 1g，乙醇體積分?jǐn)?shù) 70%， 70℃ 分別于 1: 1: 1: 1: 1:50 萃取， 回流提取 120min，測(cè)定提取液黃酮含量，并計(jì)算得率。 20xx 年 11 月中旬，進(jìn)一步查閱有關(guān)文獻(xiàn)資料，完善實(shí)驗(yàn)方案。 三、張祖姣老師提問(wèn)：黃酮的最佳可見(jiàn)光吸收波長(zhǎng)是多少？影響黃酮提取的單因素有哪些？那個(gè)響應(yīng)面的分析軟件你會(huì)用嗎？ 我的回答： 510nm。 。 。本論文以風(fēng)干喜樹(shù)葉為原料，在喜樹(shù)葉的黃酮提取研究中，將單因素和響應(yīng)面分析法應(yīng)用于乙醇回流提取喜樹(shù)葉黃酮工藝，研究回流提取的條件及其對(duì)提取結(jié)果即黃酮的得率的影響，尋求各因素的綜合優(yōu)化條件，為提高喜樹(shù)葉黃酮利用率以及為工業(yè)化生產(chǎn)提供一定的理論參考。本實(shí)驗(yàn)首先對(duì)可能影響喜樹(shù)葉黃酮提取的五個(gè)因素：料液比，提取次數(shù)，乙醇體積分?jǐn)?shù)，提取溫度，每次提取時(shí)間進(jìn)行單因素試驗(yàn)，結(jié)果可以看出各因素與提取率的大致關(guān)系，并找出了三個(gè)顯著影響因素即料液比，乙醇 體積分?jǐn)?shù)，提取溫度。 10 理論意義或 實(shí)際價(jià)值 符合本學(xué)科的理論發(fā)展，有一定的學(xué)術(shù)意義；對(duì)經(jīng)濟(jì)建設(shè)和社會(huì)發(fā)展的應(yīng)用性研究中的某個(gè)理論或方法問(wèn)題進(jìn)行研究，具有一定的實(shí)際價(jià)值。 5 寫(xiě)作水平 論點(diǎn)鮮明；論據(jù)充分；條理清晰；語(yǔ)言流暢。 10 綜合運(yùn)用 知識(shí)能力 能運(yùn)用所學(xué)專業(yè)知識(shí)闡述問(wèn)題；能對(duì)查閱的資料進(jìn)行整理和運(yùn)用；能對(duì)其科學(xué)論點(diǎn)進(jìn)行論證。 10 論文篇幅 10000 字左右。 ：你通過(guò)響應(yīng)面設(shè)計(jì)得出的實(shí)驗(yàn)結(jié)論工藝條件是否需要進(jìn)一步用實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證？ 答：雖然我的實(shí)驗(yàn)結(jié)果比較理想，但是從科學(xué)嚴(yán)謹(jǐn)?shù)慕嵌冗€是需要驗(yàn)證的，可能這就是我的不足之處。這些結(jié)論為提高喜樹(shù)葉黃酮利用率及其工業(yè)化生產(chǎn)提供了一定的理論參考。其中，湖南科技學(xué)院校園里有幾顆高大喜樹(shù)，生長(zhǎng)旺盛。 2 國(guó)內(nèi)外研究現(xiàn)狀 近些年來(lái)國(guó)內(nèi)，從中草藥中提取分 離黃酮類化 合 物的工作開(kāi)得較為廣泛。喜樹(shù)的果實(shí)和葉中總黃酮的提取效率較高， 且 容易大規(guī)模 采集果實(shí)和葉片 (不會(huì)危及樹(shù)木的生命 )，再加上喜樹(shù)近年的大力推廣及蘊(yùn)涵的較大 經(jīng)濟(jì)效益，因此，提取喜樹(shù)葉總黃酮具有一定的研究?jī)r(jià)值 [6]。響應(yīng)面分析也是一種最優(yōu)化方法，它是將體系的響應(yīng)（如萃取化學(xué)中的萃取率）作為一個(gè)或多個(gè)因素（如萃取劑濃度、酸度等）的函數(shù)，運(yùn)用圖形技術(shù)將這種函數(shù)關(guān)系顯示出來(lái)，以 3 供我們憑借直覺(jué)的觀察來(lái)選擇試驗(yàn)設(shè)計(jì)中的最優(yōu)化條件。 4 第 2 章 材料與方法 黃酮類化合物含量測(cè)定的原理 黃酮類化合物易溶于熱水和熱的乙醇，用石油醚處理過(guò)的樣品，用乙醇溶液回流提取，得到黃酮提取液 [5]。 5 實(shí)驗(yàn)方法 與步驟 樣品處理 將葉片剪成適當(dāng)長(zhǎng)度，再在 105℃ 烘至恒重。 材料、藥品試劑及儀器 實(shí)驗(yàn)材料 實(shí)驗(yàn)原材料為喜樹(shù)葉， 20xx 年 9 月下旬采摘于湖南科技學(xué)院校園，挑選新鮮干凈喜樹(shù)葉采摘后，經(jīng)清洗，烘干，室溫保存于實(shí)驗(yàn)室備用。 中心復(fù)合設(shè)計(jì)仍然是當(dāng)前應(yīng)用得最多的 RSM 經(jīng)典設(shè)計(jì)方法 [12]。 一般的試驗(yàn)設(shè)計(jì)與優(yōu)化方法，都未能給出直觀的圖形，因而也不能憑直覺(jué)觀察其最優(yōu)化點(diǎn)，雖然能找出最優(yōu)值，但難以直觀地判別優(yōu)化區(qū)域。王學(xué)利得到水提取喜樹(shù)葉總黃酮的最優(yōu)提取方案：以 pH 值 10 的水為溶劑，提取溫度 91100℃ ，溶劑體積 5060 mL，提取時(shí)間 2537 min，可最大限度地提取喜樹(shù)葉中的黃酮 [4]。絕大多數(shù)植物體內(nèi)都含有黃酮類化合物，它在植物的生長(zhǎng)、發(fā)育、開(kāi)花、結(jié)果以及抗菌防病等方起著重要的作用。 extraction of flavonoids 1 第 1 章 緒論 喜樹(shù) 喜樹(shù) (Camptotheca acuminata Dee)屬紫樹(shù)科 (Nyssaeeae)，別名旱蓮木，是我國(guó)特有樹(shù)種之一，主要分布于我國(guó)長(zhǎng)江流域及以南地區(qū)，為我國(guó)闊葉樹(shù)中的珍品之一，具有很高的觀賞價(jià)值，是綠化、美化環(huán)境的優(yōu)良綠蔭樹(shù)和風(fēng)景樹(shù)，同樣也是非常重要藥用樹(shù)種之一 [1]。 評(píng)定等級(jí)： 負(fù)責(zé)人（簽名）： 年 月 日 系 學(xué) 位 委 員 會(huì) 意 見(jiàn) 評(píng)語(yǔ)： 論文（設(shè)計(jì)）最終評(píng)定等級(jí)： 負(fù)責(zé)人（簽名）： 系部（公章） 年 月 日 校 學(xué) 位 委 員 會(huì) 意 見(jiàn) 評(píng)語(yǔ)： 評(píng)定等級(jí)：