3第3章免疫原和抗血清的制備多媒體(存儲(chǔ)版)
【正文】 harose 4B柱 吸附劑方法： 借助雙功能試劑用不含特異抗原的抗 原混合液制成固相吸附劑 二、單價(jià)特異性抗血清 1．什么是免疫原？ 2．如何制備可溶性抗原？ 3．常用的細(xì)胞破碎方法有哪些？ 4．連接半抗原的載體有哪些？制備半抗原性免疫原的方法有哪些 5．什么是免疫佐劑？免疫佐劑有哪些種類？免疫佐劑的作用機(jī)制有哪些 6．抗血清的鑒定包括哪些內(nèi)容？ 思考題 ? 弗氏完全佐劑的組成包括 ? A 液體石蠟、羊毛脂、卡介苗 ? B 液體石蠟、羊毛脂 ? C 液體石蠟、卡介苗 ? D 羊毛脂、卡介苗 ? E羊毛脂、卡介苗、氫氧化鈉 ? A 反復(fù)凍融法 B 研磨法 ? C 酶處理法 D 超聲破碎法 ? E 表面活性劑處理 ? 哪項(xiàng)不屬于可溶性抗原的制備方法 制備蛋白質(zhì)抗原時(shí)，破碎組織細(xì)胞最常用的方法是 ? 制備免疫球蛋白重鏈片段時(shí)，用于裂解免疫球蛋白的酶最好選用 ? A 木瓜蛋白酶 B 胃蛋白酶 ? C 限制性核酸內(nèi)切酶 D 胰蛋白酶 ? E 胰肽酶 ? 制備人工抗原時(shí)，最常用于偶聯(lián)半抗原的載體是 ? A 牛血清白蛋白 B牛甲狀腺球球蛋白 ? C 人血清白蛋白 D 人甲狀腺球蛋白 ? E 兔血清白蛋白 ? 免疫小鼠采血通常采用的方法是 ? A 頸靜脈采血法 B 耳頸靜脈采血法 ? C 摘除眼球或斷尾法 D 心臟采血法 ? E頸動(dòng)脈采血法 小 結(jié) 免疫原是誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生抗體并能與抗體發(fā)生反應(yīng)的物質(zhì)。 ? 指數(shù)期（ 4天）動(dòng)物體內(nèi)抗體水平上升，抗體含量 6～ 7天達(dá)高峰 ? 穩(wěn)定期（ 2～ 4周）相對(duì)穩(wěn)定水平 ? 下降期（幾個(gè)月至一到兩年） 二、免疫方法和途徑 頸動(dòng)脈采血法： 家兔、綿羊、山羊 心臟采血法： 家兔、豚鼠、大鼠、雞 靜脈采血法： 家兔、山羊、綿羊 三、動(dòng)物采血法 第四節(jié) 抗血清的鑒定和保存 抗體特異性的鑒定： 雙向免疫擴(kuò)散法 抗體效價(jià)的鑒定： 凝集試驗(yàn) 、雙向免疫擴(kuò)散試驗(yàn)、 ELISA 抗體純度的鑒定： SDSPAGE 、雙向免疫擴(kuò)散試驗(yàn)、免疫電泳 抗體親合力的鑒定： 平衡透析法、 ELISA、 RIA競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合試驗(yàn) 一、抗血清的鑒定 ? 在瓊脂平皿上打兩排孔，一排放抗原粗提物和純化抗原，另一排加抗血清， 37℃ 溫箱，進(jìn)行雙向擴(kuò)散 18～ 24h后，觀察兩排孔的沉淀線。 ? 抗寄生蟲(chóng)或腫瘤疫苗研究應(yīng)用中，在細(xì)胞因子佐劑輔助下，刺激機(jī)體產(chǎn)生具保護(hù)作用的細(xì)胞免疫。 (4)親和層析條件的選擇： ①封閉活性基團(tuán)：用無(wú)關(guān)蛋白質(zhì)或三乙醇胺過(guò)柱； ②除去未結(jié)合和結(jié)合不牢的蛋白：先用NaHCO3洗脫，再用解脫劑處理； 解脫劑： 3mol/L 硫氰酸鉀（或鈉）、 ? 制備菌體抗原的方法是 ? A 100℃ 加溫 2小時(shí) B %甲醛 ? C 75%乙醇 D 1%氯化鈣 ? E 2％氯仿 ? 分離亞細(xì)胞成分最常用的方法是 ? A 凝膠過(guò)濾法 B 低速離心法 ? C 超速離心法 D 選擇性沉淀法 ? E 高速離心法 ? 配制綿羊紅細(xì)胞免疫原一般細(xì)胞濃度為 ? A 103∕ml B 104∕ml ? C 105∕ml D 106∕ml ? E 107∕ml ? 顆粒性抗原免疫接種的方法通常采用 ? A 皮下注射 B 淋巴結(jié)注射 ? C 肌肉注射 D 皮內(nèi)注射 ? E 靜脈注射 免疫球蛋白片段的制備 ? 免疫球蛋白具有抗體活性，五類免疫球蛋白都能用純化的方法提取出
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