1-2dna重組技術(shù)的基本操作程序(存儲版)
【正文】 中，使目 的基因與其整合并表達(dá)的方法。在基因操作的基本步驟中，不進(jìn)行堿基互的。2目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法（ 1）農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法 ① 農(nóng)桿菌特點： 易感染雙子葉植物和裸子植物，對大多數(shù)單子葉植物沒有感染能力。2 基因表達(dá)載體 的組成：復(fù)制原點 +啟動子 +目的基因 +終止子 +標(biāo)記基因表達(dá)載體啟動子： 位于基因的首端的一段特殊的 DNA片斷，它是 RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位 ，有了它才能驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄出 mRNA， 最終獲得蛋白質(zhì)。1. 2基因工程的基本操作程序原核細(xì)胞的基因結(jié)構(gòu)非編碼區(qū) 非編碼區(qū)編碼區(qū)與 RNA聚合酶結(jié)合位點啟動子 終止子啟動子： 位于基因的首端，是 RNA聚合酶 識別和結(jié)合的部位 ，有了它才能驅(qū)動 基因轉(zhuǎn)錄出 mRNA，最終獲得蛋白質(zhì)。 氫鍵 單鏈 DNA雙鏈 DNADNA單鏈 ：每重復(fù)一次，目的基因增加 ___倍1PCR反應(yīng)原理示意圖：PCR反應(yīng)原理示意圖：PCR技術(shù)的操作過程PCR反應(yīng)體系中目的基因成反應(yīng)體系中目的基因成 指數(shù)指數(shù) (2n)形式擴(kuò)增形式擴(kuò)增思考？1個 DNA分子進(jìn)行 PCR擴(kuò)增 ,循環(huán) 4次，理論上至少需要幾個引物？2（ 2n1） (n為 循 環(huán) 次數(shù) )（ 241） 2=30PCR技術(shù)擴(kuò)增與 DNA復(fù)制的比較DNA復(fù)制 PCR技術(shù)場所原理條件解旋方式酶特點結(jié)果堿基互補(bǔ)配對原則 堿基互補(bǔ)配對原則四種脫氧核苷酸、模板、酶、 ATP四種脫氧核苷酸、模板、酶、 引物DNA在高溫下解旋解旋酶催化解旋半保留復(fù)制、邊解旋變復(fù)制半保留復(fù)制、全解旋再復(fù)制體外復(fù)制主要在細(xì)胞核內(nèi)大量的 DNA片段形成整個 DNA分子熱穩(wěn)定的 DNA聚合酶細(xì)胞內(nèi)的解旋酶、 DNA聚合酶等3. 人工合成法在基因較小，核苷酸序列已知的情況下，可以利用 DNA合成儀用化學(xué)方法人工合成蛋白質(zhì)的氨基酸序列mRNA的核苷酸序列基因的核苷酸序列目的基因化學(xué)合成推測推測思考： 化學(xué)法合成的目的基因含 內(nèi)含子、啟動子和終止子嗎？不含課堂小結(jié)目的基因的獲取從基因文庫中獲取利用 PCR技術(shù)擴(kuò)增人工合成種類基因組文庫部分基因文庫二、基因表達(dá)載體的構(gòu)建 ——基因工程的核心1 目的：使目的基因在受體細(xì)胞中 穩(wěn)定存在 ，并且可以 遺傳 給下一代，同時使目的基因能夠 表達(dá)和發(fā)揮作用 。常用的受體細(xì)胞： 大腸桿菌、枯草桿菌、土壤農(nóng)桿菌、 酵母菌和動植物細(xì)胞等。課堂練習(xí)基因工程是在、基因工程是在 DNA分子水平上進(jìn)行設(shè)計施工分子水平上進(jìn)行設(shè)計施工的。② 金屬粒子：鎢粉粒子
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