【正文】 逐滴加入 6mol/L鹽酸 5— 6滴，如有能水解成硫醚（硫醇）的有機(jī)磷酸酯 類(lèi)農(nóng)藥存在時(shí)，在二液接觸面出現(xiàn) 紅色環(huán) ，輕輕振搖溶液即全部變紅。 ? [試劑 ] ? （ 1） 10%氫氧化鈉溶液。 ? 準(zhǔn)備工作 ? 實(shí)驗(yàn)前用一匹馬采血，分離血清，然后給馬投吸敵百蟲(chóng) 15— 20g，觀察中毒癥狀后，采血，分離血清。 ?一、磷化鋅的檢驗(yàn) ? （一）檢材的采取及處理 ? 磷化鋅中毒時(shí)，可采取嘔吐物，胃內(nèi)容物和可疑的飼料作為檢樣。將脫脂棉浸入 10%醋酸鉛溶液中，取出擠去溶液，晾干，貯于干燥處保存。 ? 取固體檢樣或半固體 （預(yù)先在水浴上將水分揮干）檢樣適量，置于具塞三角瓶中，加無(wú)水乙醇適量，在水浴上溫浸 15min，過(guò)濾，濾液在水浴上揮干，殘?jiān)訜o(wú)水乙醇 溶解，濾去不溶物，濾液濃縮至少量供定性檢驗(yàn)用。 ? （三）鹽酸羥胺反應(yīng) ? [原理 ] 敵鼠或敵鼠鈉都能與鹽酸羥胺反應(yīng)，縮合成肟酸，呈現(xiàn)白色渾濁。 ? （ 二 ）奈氏試劑反應(yīng) ? [原理 ] ? 氟乙酰胺在強(qiáng)堿性條件下，可水解生成氨，氨與奈氏試劑作用，生成桔紅色沉淀。 ? 黃曲毒素與肝癌有密切關(guān)系，還會(huì)引起組織失血、厭食等癥狀。其主要變化特征為肝臟出現(xiàn)慢性損傷，如肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞變性、肝硬化等。 ? 樣品檢測(cè)： 從檢測(cè)卡袋中取出檢測(cè)卡，在卡上做好樣品編號(hào)標(biāo)記；用吸管吸取 平皿 上全部待檢樣液，滴入加樣孔中，加樣后開(kāi)始計(jì)時(shí)， 510分鐘內(nèi)觀察結(jié)果； ? 結(jié)果判斷： ? 陰性 :測(cè)試線 (T)與對(duì)照線 (C)都出現(xiàn)，表明樣品中黃曲霉毒素的濃度小于 ? 陽(yáng)性 :只有對(duì)照線 (C),無(wú)測(cè)試線 (T)，表明樣品中黃曲霉毒素的濃度大于或等于 。 ? 黃曲霉毒素 B1及總量試劑盒 ? [檢測(cè)原理 ]該試劑盒采用免疫競(jìng)爭(zhēng)法分析原理結(jié)合膠體金標(biāo)記技術(shù)進(jìn)行檢測(cè)。脾臟和胰臟也有輕度的病變。黃曲毒素主要有 B B G1與 G2等 4種，又以 B1的毒性最強(qiáng)。 ? 半固體檢樣： 先在不超過(guò) 60℃ 的水浴上將水分蒸干，然后按固體樣品處理。 ? [操作 ] 取提取濃縮液少許，加無(wú)水乙醇 ，緩慢加 9%三氯化鐵溶液 1—— 2滴，若含有敵鼠或敵鼠鈉鹽，有 紅色 懸浮物生成。慢中毒或死亡者，可采取血液、肝臟、腎臟作為檢樣。 ? （ 3）碘化鎘汞溶液。 ? 抗凝血類(lèi) 敵鼠 中毒 ： 既往體健．突然發(fā)生不明原因的多處出血，尤其是牙齦、皮膚出血和尿血并存時(shí)應(yīng)懷疑。 ? 以上僅介紹了 3種有機(jī)磷農(nóng)藥的定性檢驗(yàn)方法，如需進(jìn)一步確定為何種農(nóng)藥，可查閱有關(guān)毒物檢驗(yàn)資料。 ? 含多鹵代烴磷酸酯類(lèi)農(nóng)藥 （敵百蟲(chóng)、敵敵畏、二溴磷）的檢驗(yàn) — 間苯二酚反應(yīng)。 ? （ 2） 6mol/L（或濃 HCl）鹽酸。 ? 含硝基苯的有機(jī)磷酸酯類(lèi)農(nóng)藥 （對(duì)硫磷）的檢驗(yàn) — 靛酚反應(yīng) ? [原理 ] 對(duì)硫磷經(jīng)水解產(chǎn)生對(duì)硝基酚，可還原成對(duì)氨基酚，對(duì)氨基酚又與鄰甲酚作用，生成靛酚，在堿性條件下呈藍(lán)色。 ? %磷聯(lián)甲苯胺（甲土力?。┮掖既芤?。觀察血斑時(shí)，要看試紙反面，以血斑中心顏色為準(zhǔn)，最好成一斜角觀察，不要直接對(duì)光。 ? [試劑 ] ? 乙酰膽堿試紙制備。根據(jù)檢樣的種類(lèi)不同，農(nóng)藥的性質(zhì)不同，常采用下述方法進(jìn)行提取。 二、有機(jī)磷農(nóng)藥的檢驗(yàn) ? 提取與分離 有機(jī)磷農(nóng)藥絕大多數(shù)是脂溶性毒物，易溶解在有機(jī)溶劑中。 ? 蒸氣顯色 把易揮發(fā)的某種試劑置于密閉的容器內(nèi)（如標(biāo)本缸、干燥器等），使其蒸汽充滿(mǎn)整個(gè)容器，然后將已揮干展開(kāi)劑的薄層板放入，使蒸汽與檢樣斑點(diǎn)作用面顯色。將展開(kāi)槽平放在臺(tái)面上時(shí)，液層厚度以 5— 7mm為宜；斜放與臺(tái)成 15— 20度角時(shí)，以液面不浸及樣點(diǎn)為度。 （ 5）容易與檢樣中所需組分分開(kāi)。 （ 4）點(diǎn)樣速度要快，以免影響薄層板的活度，使分離效果受到影響。 直接點(diǎn)樣法 如果作定性檢驗(yàn)，可直接用毛細(xì)管點(diǎn)樣。但干板板面容易破壞，移動(dòng)時(shí)要特別小心，而且不易保存。 ? （ 3）硅膠（氧化鋁） CMC板 表示加有 1%羧甲基纖維素鈉（ CMC）為粘合劑的薄層板。裁好的玻璃邊緣用砂輪磨光。 ? （一）薄層板的制備 ? [試劑與儀器 ] ? 吸附劑 毒物檢驗(yàn)工作中最常用的吸附劑是 氧化鋁和硅膠， 此外也可用聚酰胺、活性炭和硅藻土等?？梢杂脧?qiáng)腐蝕性顯色劑，甚至可以高溫灼燒。 ? [操作 ] ? 取蒸餾水 23ml，放試管中，再用小吸管吸取眼結(jié)膜囊內(nèi)液少許，放入試管中，然后加入酸性硝酸銀溶液 12滴，如有氯化物存在就成白色渾濁，量多時(shí)渾濁程度加大。 ? [試劑 ] 10%鉻酸鉀或重鉻酸鉀溶液 ? [操作 ] ? 取檢液少許，加 10%鉻酸鉀或重鉻酸鉀溶液數(shù)滴，如有鉛離子存在，則出現(xiàn)黃色沉淀，該沉淀能溶于氫氧化鈉及硝酸中。 ? 鉛中毒是動(dòng)物直接或間接食入含鉛物， 引起流涎、腹痛、興奮不安和貧血 為主要臨床特征的疾病。 ? （ 3） 已腐敗的樣品做此試驗(yàn)時(shí)，最好將樣品調(diào)節(jié)至酸性后在水浴上先加熱 10min，以除去硫化氫，再加入銅片，防止銅片表面生成硫化物變黑。若為液體檢材，可取檢液 50ml，加濃鹽酸 10ml。 ? [試劑 ]： ? （ 1） 。二巰基丙醇的副作用大，連用 3d后，改為每天一次。 診斷 ? 病史調(diào)查 ： 主要由于誤食了含有西力生、賽力散等汞制劑處理的種子，或含汞制劑的農(nóng)藥密閉不嚴(yán)，使豬受到汞蒸氣的危害而引起。 ? 汞慢性中毒 ， 以神經(jīng)癥狀為主 。每增 10℃ 蒸發(fā)速度約增加 ～ ，空氣流動(dòng)時(shí)蒸發(fā)更多。 ? 金屬及其化合物發(fā)生急性中毒的很少，大部分為污染或工作環(huán)境導(dǎo)致的慢性中毒。 ? （ 3）飽和碳酸鈉溶液。 ? （ 4） 10%鹽酸。 ? 一般多見(jiàn)于 牛和羊 ，馬、豬、犬偶爾發(fā)生。 ? [試劑 ] 聯(lián)苯胺冰醋酸溶液：取聯(lián)苯胺 10ml冰醋酸中，加蒸餾水稀釋至 100ml。 ? ? 樣品采取時(shí)應(yīng)注意的事項(xiàng)： ? ①應(yīng)當(dāng)無(wú)化學(xué)污染或殘?jiān)? ? ②樣品不能用水沖洗，可能除去殘毒；水可污染樣品； ? ③樣品保存條件：組織樣品，應(yīng)在冰凍條件下送往實(shí)驗(yàn)室；血清和血液樣品，不應(yīng)冰凍，但可低溫保存； ? ④樣品內(nèi)不要加防腐劑或福爾馬林，除非有特殊原因應(yīng)加以說(shuō)明；⑤樣品應(yīng)注明畜主姓名、畜別或號(hào)數(shù)、死亡日期、取料日期、送檢要求及送檢單位等。 ? 為了增加透析速度及提高透析效率，可將燒杯適當(dāng)加熱（不超過(guò) 50℃ ）。 ? 檢驗(yàn)結(jié)果陽(yáng)性，現(xiàn)場(chǎng)也發(fā)現(xiàn)致病毒物，但與尸變不一致，首先考慮送檢材料是否是該中毒動(dòng)物的檢驗(yàn)材料。 ? 薄層層析的方法 ： ? 點(diǎn)樣，展開(kāi)，顯色，定性與定量分析 ? 高效液相層析法 ? 高效液相層析法 (high performance liquid chromatography, HPLC)，又稱(chēng)高壓液相色譜法 、高速液相色譜法、現(xiàn)代液相色譜法等，是在經(jīng)典液相色譜和氣相色譜的基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的分析技術(shù)。 ? 4） 、為了減少毒物在提取過(guò)程中的損耗，提取方法應(yīng)盡可能簡(jiǎn)化，提取液轉(zhuǎn)移、脫水、脫色時(shí)，應(yīng)將原器皿及殘?jiān)蠚埩舻亩疚锍浞窒疵撆c收集。既要把毒物充分提取出來(lái)，又要不使之揮散或受到破壞。 】 ? （ 2）準(zhǔn)備足夠的試劑和器皿。通過(guò)動(dòng)物中毒時(shí)所反映出的各種癥狀及病理變化，有助于提出進(jìn)一步檢驗(yàn)的方向。 ? b、檢驗(yàn)時(shí)同時(shí)作空白對(duì)照試驗(yàn) （ 陰性對(duì)照 ）和已知樣品對(duì)照試驗(yàn) （ 陽(yáng)性對(duì)照 ） ，陰性對(duì)照檢查試劑及器皿有無(wú)問(wèn)題，陽(yáng)性對(duì)照檢驗(yàn)反應(yīng)是否正常進(jìn)行，并作為判定結(jié)果的標(biāo)準(zhǔn)。預(yù)試驗(yàn)主要包括以下方面 ： ? 觀察檢材顏色 ，如磷化鋅 —— 黑色的，氟乙酰 — 紫紅色的； ? 注意氣味 ，檢查檢材氣味最好在尸體剖檢或開(kāi)封檢材的時(shí)候立即進(jìn)行，如有機(jī)磷 具有 蒜臭味； 預(yù)試驗(yàn) ? 升華試驗(yàn) （燒灼），如從胃內(nèi)容物或可疑飼料中揀出的可疑物時(shí)，可取少量放入小試管中， 在火上灼燒，根據(jù)所產(chǎn)生的蒸汽或升華物的顏色，結(jié)晶性狀，可找到一些毒物的線索。 ? 重金屬中毒、氟中毒、硒中毒等可采集臟器、尿、被毛、土壤等，在剖檢死亡動(dòng)物中，應(yīng)根據(jù)動(dòng)物的種類(lèi)及中毒時(shí)間選取材料。 送檢單的內(nèi)容主要包括：病史（發(fā)病時(shí)間、病畜的數(shù)量、病前的飼養(yǎng)管理情況，臨床癥狀、防治措施及療效、死亡情況及尸體剖檢等）。 ?一、毒物檢驗(yàn)的目的 ? 診斷性的目的 ? 通過(guò)對(duì)進(jìn)入動(dòng)物體內(nèi)的毒物的分離鑒定，查清毒物及中毒原因。 ? 預(yù)防性的目的 ? 在人醫(yī)，有防疫站專(zhuān)門(mén)搞這項(xiàng)工作，我們獸醫(yī)部門(mén)，沒(méi)有防疫站專(zhuān)門(mén)搞此項(xiàng)工作。 ? （二）檢材的采取，保管和裝送 （回答第 3個(gè)問(wèn)題） ? 通過(guò)一般診斷，大致上可確定是否為中毒和可能是哪種或哪幾類(lèi)毒物中毒，接著要進(jìn)行的就是毒物檢驗(yàn)，毒檢的第一步就是檢材的采取、保管和裝送 的 基本要求 ： ? 送檢要及時(shí) ? 最好要當(dāng)天采集當(dāng)天送，送檢材料要低溫保存（夏季在冷藏瓶），以減少毒物的損失和防止檢材的腐敗，也可在不影響毒物檢驗(yàn)的情況下，置入純酒精中送檢。檢驗(yàn)材料的采集數(shù)量見(jiàn)表 ? 4 送檢材料時(shí)必須附送檢單 ? 在送檢單上寫(xiě)清畜禽的飼喂情況 、 中毒發(fā)生的時(shí)間 、 畜種 、 中毒癥狀、 治療和預(yù)防的措施及效果 、 死亡日期 、 死后剖檢變化 、 檢材采取得時(shí)間和送檢要求等 ， 以便檢疫人員在擬定檢驗(yàn)計(jì)劃時(shí)參考 檢驗(yàn)材料的采集數(shù)量 1 2 3 檢材名稱(chēng) 適宜數(shù)量 檢材名稱(chēng) 適宜數(shù)量 胃內(nèi)容物 500g 剩余飼料 500g 嘔吐物 全部 可疑飼料 500g 發(fā)霉飼料 10001500g 飲水 至少 1000ml 血液 50100ml 肝臟 1/3或全部 腎臟 一只 骨 500g 被毛 至少 10g 土壤 1000g 尿 1000ml ? （三） 檢驗(yàn)程序的擬定 （回答第 4個(gè)問(wèn)題） ?1 經(jīng)過(guò)對(duì)中毒的一般診斷，綜合分析，可能出現(xiàn)幾種情況： ? ①確定了是中毒，但方向不明確，要求檢驗(yàn)人員進(jìn)行系統(tǒng)的檢驗(yàn)，這種檢驗(yàn)是大海撈針，最費(fèi)時(shí)間，最費(fèi)檢材。 注意 ：預(yù)試驗(yàn)只起探索的作用，不能作為診斷的依據(jù)，尚未做確診試驗(yàn)，不能作出結(jié)論。 在毒物檢驗(yàn)中，一般很少進(jìn)行含量測(cè)定，只要確定是什么毒物就可以了。試驗(yàn)方法可直接飼喂或灌胃，亦可將毒物分離提取后給動(dòng)物 ih、 im、 ip。 ? （ 4）同一次試驗(yàn)中所用的移液管、滴定管、量筒、容量瓶、比色管等，規(guī)格、型號(hào)要盡量一致。 ? 2） 、在盡可能不損失毒物的前提下，所用的提取方法，應(yīng)能將干擾物質(zhì)充分排除，必要時(shí)可進(jìn)一步凈化或提純，以提高反應(yīng)的靈敏度。 ? 層析技術(shù)操作簡(jiǎn)便，樣品可多可少，既可用于 實(shí)驗(yàn)室的研究工作 ，又可用于 工業(yè)生產(chǎn) ， 還可與其他分析儀器配合，組成各種 自動(dòng)分析儀器 。 ?四 、 檢驗(yàn)記錄及檢驗(yàn)結(jié)果的報(bào)告 ? （一）檢驗(yàn)記錄 ? 毒物檢疫人員對(duì)每次收到的檢材按規(guī)定要求多出詳細(xì)的記錄，與送檢人員核對(duì)送檢單上所訴采集材料的時(shí)間、名稱(chēng)、重量、包裹情況，并注明驗(yàn)檢日期。 檢驗(yàn)結(jié)果的判定 第二節(jié)水溶性毒物的檢驗(yàn) ? （一）水浸法 ? 將檢材研碎，用蒸餾水浸泡 1h并稍加熱，攪拌，然后進(jìn)行過(guò)濾或離心分離，濾液或離心分離液供檢驗(yàn)用。 ?臨床上以 黏膜發(fā)紺、血液褐變、呼吸困難、胃腸道炎癥為特征。 ? 格利斯（ Griess）反應(yīng)（ 靈敏度 1： 5000000） ? [原理 ] 亞硝酸鹽在酸性溶液中與氨基苯磺酸作用生成重氮化合物，再