共軛焦顯微鏡簡(jiǎn)介(存儲(chǔ)版)
【正文】 光片 共軛焦顯微鏡 共焦顯微術(shù)原理 ? 共焦顯微術(shù)的基本原理如圖所示。明斯基 提出。 近幾年 對(duì)共焦顯微術(shù)的研究已形成了一個(gè)世界性的熱潮 ，人們已經(jīng)研制出了多種多樣的共焦顯微鏡。點(diǎn)光源發(fā)出的光經(jīng)物鏡后聚焦到物體的表面，再由物體反射或透射后經(jīng)聚光鏡再聚焦到探測(cè)器。 ? 高精度掃描系統(tǒng)的設(shè)計(jì)： 目前主要采用的 掃描方式主要有以下幾種：（ 1）機(jī)械式工作臺(tái)掃描 2）光束掃描（ 3） Nipkow盤掃描 4）光學(xué)掃描 ? 光學(xué)層析與圖像重構(gòu)算法： 由探測(cè)器探測(cè)到的共焦信號(hào)是樣品某個(gè)層面的反射光，通過(guò)改變聚焦深度即可以獲得不同斷層的光強(qiáng)信息，然后信號(hào)經(jīng)過(guò) A/D轉(zhuǎn)換變?yōu)閿?shù)字量，以一定的圖像格式存儲(chǔ)到計(jì)算機(jī)中。 圖像信號(hào)及處理 ： 光電倍增管放大信號(hào)，計(jì)算機(jī)采集和處理光信號(hào)。 動(dòng)態(tài)的定量測(cè)量 共聚焦顯微鏡還能對(duì)活細(xì)胞內(nèi)的特定成分（如：鈣、鈉、氫等）進(jìn)行動(dòng)態(tài)變化測(cè)量，并給出動(dòng)態(tài)變化曲線；還可以同時(shí)測(cè)量幾種成分，并給出含量比值。 隨機(jī)選擇細(xì)胞或區(qū)域，測(cè)定其熒光強(qiáng)度值，并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。標(biāo)記細(xì)胞為損傷細(xì)胞。 Ca離子動(dòng)態(tài)檢測(cè) 加藥 峰值 所選細(xì)胞 Ca離子動(dòng)態(tài)檢測(cè) 胞漿 胞核 胞漿胞核同時(shí)測(cè)量 牛肺動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞 藍(lán)色： Hoechst 33342 染 DNA 紅色： PI，染核仁 RNA 綠色： Alexa Fluor 488 染肌絲蛋白 藤黃微球菌 綠色：活菌 紅色：死菌 染色： LIVE/DEAD BacLight Bacterial Viability Kit 猴胚腎細(xì)胞內(nèi)弓形蟲(chóng)繁殖 吖叮橙染色 綠色為 DNA 紅色為 RNA Bravo, LSM! 。標(biāo)記細(xì)胞為損傷細(xì)胞。 細(xì)胞中 特異性熒光標(biāo)記的蛋白在不同藥物環(huán)境和不同培養(yǎng)時(shí)間條件下的表達(dá)差異 。 顯微鏡 掃 激光共聚焦顯微鏡的 優(yōu)勢(shì) 定量測(cè)量： 靜態(tài)的定量測(cè)量 對(duì)于不同組的樣品，可以單純比較一種成分，也可以同時(shí)比較兩種甚至三種成分。 點(diǎn)與面掃描技術(shù) 共聚焦顯微鏡：將樣品分解成二維或三維空間上的無(wú)數(shù)點(diǎn)，用十分細(xì)小的激光束（點(diǎn)光源）逐點(diǎn)逐行掃瞄、成像，通過(guò)
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