基因芯片技術(shù)(存儲版)
【正文】 位素表達檢譜測多態(tài)性分析診斷M ol e c u l ard y n am i c s（ 美國）500 5000 nt 的 c D N A用筆打印于 10 c m 2玻璃片10000 個 c D N A 點與200 400 nt 標(biāo)記 c D N A熒光 新基因鑒定表達譜檢測N an oge n（美國）預(yù)組裝的 20 m e r 的探針俘獲于電活化芯片位點25/ 64/ 100/ 400/ 最終10000 個 O l i go 點與200 400 nt 標(biāo)記 c D N A熒光 診斷及短的重復(fù)序列鑒定P r ot oge n e L ab（美國）通過打印于表面張力陣 列 將 4 0 50 m e rO l i go 合成于 9 c m 2玻璃片8000 個 O l i go 點與 2 00400n t 標(biāo)記核酸樣品熒光 表達譜檢測多態(tài)性分析S e q u e n om( 德國，美國 )20 25 m e r 探針合成后打印成陣列250 點，激光解吸 質(zhì)譜分析質(zhì)譜 新基因鑒定診斷及作圖S y n t e n i（美國）500 5000 nt c D N A 用滴頭打印于 4 c m 2 的玻璃片10000 個 c D N A 點與 2 00標(biāo)記 c D N A熒光 新基因鑒定表達譜檢測德國癌癥研究所 （德國）約 1 0 00 個 P N A 合成于 8 10 c m 2 的芯片熒光 / 質(zhì)譜表達譜檢測及診斷八、基因芯片的主要類型 基因芯片以其片基 (substrate)的不同可以分為無機片基和有機合成物片基 。 四、基因芯片技術(shù)與傳統(tǒng)雜交檢測方式的比較 ? 操作 自動化程度 一次可檢測的序列個數(shù) 總體效率基因芯片技術(shù) 簡便 很高 極大 很高傳統(tǒng)雜交方法 復(fù)雜 很低 很小 很低 基因芯片技術(shù)從本質(zhì)上說與 Southern Blotting或 Northern Blotting相同 （ 所以 Affymetrix曾與Southern就專利問題產(chǎn)生沖突 ） ， 只是探針密度極高而已 。 不過 ， 為此花費了大量的人力物力從事研制工作 。 前者主要包括半導(dǎo)體硅片和玻璃片 ， 其上的探針主要以原位聚合的方法合成 ， 后者主要有特定孔徑的硝酸纖維膜和尼龍膜 ， 其上的探針主要是預(yù)先合成后通過特殊的微量點樣裝置或儀器滴加到片基上去 （ 如下表所示 ） 。 操作過程 （ 見下圖 ） * 使 支持物氨基化 * 用光不穩(wěn)定保護基 （ photo labile protecting group）將 NH2基保護起來 * 選擇適當(dāng)?shù)膿豕獍?（ mask） 使需要聚合的部位透光 ，不需發(fā)生聚反應(yīng)的部分不透光 。如下表所示。 樣品擴增并經(jīng)標(biāo)記后與片基上所有序列進行雜交反應(yīng) 。 玻璃支持物c o a tp h o t o r e s i s t暴光m a s kh υ去保護NHH偶聯(lián)r e p e a t圖 4 光敏抗蝕法光引導(dǎo)原位合成技術(shù)示意圖十四、基因芯片技術(shù)的應(yīng)用 ? 利用基因芯片進行雜交測序 基因芯
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