【正文】 domised placebocontrolled trial. Lancet 2022。我們通過超聲檢查評價大鼠的心功能，結(jié)果顯示：多西環(huán)素處理的大鼠LVEF和FS，均較模型組顯著提高，差異均有統(tǒng)計學意義。MI組2周時大鼠左室重量與體重比值增加，是因為MI后發(fā)生心室重塑，且有隨時間推移加重的趨勢，膠原發(fā)生堆積，心肌纖維化，形成瘢痕組織，并且模型鼠心臟增大所致。心肌梗死后MMP9的異常升高，降解正常的膠原，使其被缺乏連接結(jié)構(gòu)的纖維間質(zhì)所取代，心腔擴大，抑制MMP9基因的表達，減少MMP9的生成及抑制MMP9的活性均能能夠改善心肌重構(gòu)，改善心功能。如果細胞外基質(zhì)以降解占主導地位，將引起室壁變薄導致LV動脈瘤和心臟破裂的發(fā)生。心肌損傷后基因組表達改變引起的分子、細胞和間質(zhì)的改變，分子改變表現(xiàn)為炎癥因子、基質(zhì)金屬蛋白酶和生長因子等的表達增加，細胞的改變包括心肌細胞的肥大、安 徽 醫(yī) 科 大 學 碩 士 學 位 論 文38壞死、調(diào)亡和纖維母細胞的增殖等，間質(zhì)的改變表現(xiàn)為細胞外基質(zhì)的降解及膠原聚集又稱纖維化，它們之間關(guān)系復雜，共同促進MI后左室重構(gòu)的發(fā)生發(fā)展 [37]， 左室重構(gòu)往往伴隨著心衰的進展，是MI患者預后不良的重要原因。P），同時多西環(huán)素組 MMP2 的活性也較模型組顯著降低（177。模型組的梗死區(qū)域心室壁變薄，左室腔擴大；而多西環(huán)素組梗死區(qū)左室壁變薄、膨出均比模型組改善。 ? P Vs doxycycline group). 各組大鼠 HW/BW 值可見 MI 大鼠 HW/BW 較假手術(shù)組增大，而尤以模型組增大明顯（177。 *? 177。 *LVSd (mm) 177。 177。s)表示，應(yīng)用 SPSS 統(tǒng)計軟件對實驗數(shù)據(jù)進行分析。 裂解液制備：每 500ul 冷的 Buffer 中加入 2ul 蛋白酶制劑混合物，混勻后置冰上備用。試劑(E)洗 1min。分別與其體重（BW）比較，計算HW/BW比例。其中 34 SD 雄性大鼠只開胸，以前降支為標志，于左心耳根部下方 1 mm 處結(jié)扎冠狀動脈左前降支。多西環(huán)素抑制 MMP 的機制尚不完全清楚，可能的機制有：(1)多西環(huán)素能直接與 MMP 的 zn2+和 Ca2+結(jié)合，從而抑制酶的活性區(qū)，并可誘導酶原的構(gòu)型改變，使之易于分解 ；(2)多西環(huán)素能抑制 MMP 的 mRNA 轉(zhuǎn)錄，并能使酶原在細胞外激活過程中降解 [31,32]；(3)多西環(huán)素還有可能通過抑制 TIMP 的表達，降低MMP 的釋放和激活 [33]；(4)多西環(huán)素可以通過對 TGFβ 和 IL 的作用(通常 TGFβ 可抑制 MMP 表達；而 IL 則相反)，間接抑制 MMP 的表達[34,35]。該實現(xiàn)提出早期檢測血漿 TIMP4 對于預測心功能的重要性，其濃度變化與 VR 密切相關(guān) [25]。第一類為膠原酶(MMP 一（）1，8，l3 等)，其主要水解底物是纖維類膠原，即 3 型膠原；第二類為明膠酶(MMP2，9)，主要水解變性膠原及基膜的主要成分 4 型膠原；第三類為基質(zhì)水解酶類(MMP3，10，11 等)，其中 MMP3 和 MMP 一（）10的水解底物比較廣泛，如Ⅳ型膠原、蛋白聚糖、明膠及糖蛋白等；第四類為結(jié)構(gòu)與功能比較特殊的 MMPs(MMP 一（）7，12，19，20，23，26 等)，其除能降解幾種 ECM 成分外，還能激活其他 MMPs。研究結(jié)果提示我們利用藥物刺激內(nèi)源性心肌更新以治療心臟病可能具有很好的臨床前景 [21]。他們利用大氣中的放射性污染發(fā)現(xiàn)，在人的生長過程中，心肌細胞確實能夠在一定程度上進行更新。典型特征為細胞縮小，染色質(zhì)凝集，核膜折疊，核仁裂解，繼而細胞膜出泡（胞？），分割細胞為多個凋亡小體，凋亡小體進而被具有吞噬功能的細胞如巨噬細胞吞噬、降解。一項多中心開放性研究納入 32 例心功能 IIIV 級心力衰竭病人，植入迷走神經(jīng)刺激裝置，規(guī)律刺激患者迷走神經(jīng)達患者最大耐受程度，隨訪一年，發(fā)現(xiàn)患者 6min 步行由刺激前的（ 411177。CHF 治療中的“ALD 逃逸現(xiàn)象”：在心衰時，由于血管緊張素水平增高，刺激ALD 合成分泌增多。Tsutsumi 等人通過實驗證實選擇性刺激大動脈平滑肌細胞 AT2 能夠增加緩激肽釋放，進一步使得 NO 合成增加，引起舒張血管的效應(yīng)，顯示長期抑制 AT1 表達、同時增加 AT2 表達，對于控制高血壓病人的血壓水平是有意義的 [8]。建議只有在血流動力學穩(wěn)定后才可以應(yīng)用β1 受體阻滯劑 [2]。關(guān)鍵詞：心肌梗死 左室重構(gòu) 基質(zhì)金屬蛋白酶 多西環(huán)素 心肌纖維化 AbstractDoxycycline Attenuate Left Ventricular Remodeling and Improve Left Ventricular Function through Inhibiting Matrix metalloproteinases inPost Myocardial Infarcted RatsObjectives To observe the effects of doxycycline on the activity of matrix metalloproteinase2 (MMP2) and MMP9, left ventricular remodeling and left ventricular function in the post myocardial infarction (MI) rats. Methods Total 50 male SD rats intraperitoneal injected with sodium pentobarbital (70 ) anesthesia, after anesthesia, all of them with electrophysiology instrument monitoring ECG, endotracheal intubation and connected to a breathing machine (Respiratory rate of 45 times per minute, tidal volume of 30 ml each time),34 of them made into models of MI by ligation of anterior descending coronary artery．Except the two died, 32 successful modeling,and then randomly divided into two groups：Model group, Doxycycline (DOC) group, with 16 rats each group．Remaining 16 rats undergoing thoracic surgery without ligaturing anterior descending coronary artery called shamoperated group. Three days later，rats in DOC group were intraperitoneally injected with doxycycline (15 ,bid for 5 days), model group were injected with saline solution ( bid *5 days). Rats in shamoperated group were injected with saline solution ( bid *5 days). Cardiac function were evaluated by echocardiography 2 weeks post MI,After echocardiography examination the rats were all killed,and then open chest removed their heart tissue. Cardiac tissue went through the PBS buffer rinse and removing adhered fat. We calculated heart weight to body weight ratio, 安 徽 醫(yī) 科 大 學 碩 士 學 位 論 文10expressed with HW / BW . Cardiac tissue was fixed after the myocardial tissue embedded in paraffin, made of the 5μm thick slices,size of MI were analyzed by Masson staining method . Each group were taken six rat myocardium frozen tissue homogenate placed in Lysis buffer, centrifuged at 12022 rpm for 15 minutes and MMP2, MMP9 activity were analyzed by gelatin enzymatic analysis. Results, Compared with the model group, the left ventricular (LV) wall thickness increased significantly in DOC group, acpanied with the improvement of LV fractional shortening and LV ejection fraction (P, respectively), while the LV enddiastolic diameter was significantly reduced (P). Compared with Shamoperated group,the HW/BW in Model group and Doxycycline group were increased , especially Model group were significantly increased ,(P)。術(shù)后 2 周后 SD 雄性大鼠全身麻醉條件下心臟彩超評價 SD 雄性大鼠心功能，心臟彩超檢查結(jié)束后處死大鼠開胸右室采血后取出大鼠心臟，用 PBS 緩沖液沖洗干凈，并除去附著的脂肪，稱出全心重量（HW） 。與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻均已在論文中作了明確說明并表示謝意。保密的學位論文在解密后適用本規(guī)定。m 厚的切片，用Masson 染色法分析心肌梗死面積，各組分別取 6 只大鼠心肌冷凍組織置于 Lysis 緩沖液中勻漿，12022rpm 離心 15 分鐘，取上清液用明膠酶法分析大鼠心肌組織蛋白 MMP2 和 MMP9 的活性。因此干預 MI 后心室重構(gòu)（ Ventricular remodeling，VR）成為冠心病治療的熱點及難點問題。AT1 又分為 AT1a和 AT1b 兩種亞型。但血漿中升高的 AngII 通過激活 AT2 受體，進而激活緩激肽一氧化氮途徑，產(chǎn)生舒張血管、降低血壓、抑制心血管重構(gòu)等作用；Kaschina 等人研究結(jié)果顯示直接激活 AT2 受體可以通過抗凋亡及抗炎機制抑制 VR[9]。低鈉和高鉀是刺激ALD 分泌的主要原因；由于 ALD 在 CHF 的病理生理中的作用及“ALD 逃逸現(xiàn)象” ，決定了 CHF 現(xiàn)代治療方案中 ALD 受體拮抗劑具有不可替代的作用。射血分數(shù)（LVFE）由刺激前的（22177。在結(jié)扎大鼠冠狀動脈后 2 h，梗死區(qū)即出現(xiàn)細胞凋亡并迅速達到高峰；結(jié)扎后 6 h，細胞凋亡為細胞死亡的主要形式 [18]。細胞在進行最后一次分裂之后，其 DNA 成分不再變化。 細胞外基質(zhì)金屬蛋白酶（matrix metalloproteinase ,MMP）及其抑制劑（matrix metalloproteinase inhibitor,TIMP）與 VRMI 后除心肌細胞本身的結(jié)構(gòu)、代謝及功能異常外，心肌細胞外基質(zhì)(Extracellular matrix，ECM)尤其是心肌膠原亦發(fā)生異常改變，ECM 成分的過分降解可能導致病理性 VR。TIMPs 家族是一個多基因家族的編碼蛋白，目前已證實的 TIMPs 有安 徽 醫(yī) 科 大 學 碩 士 學 位 論 文204 種(TIMP1，TIMP2，TIMP3 和 TIMP4)，它們的表達在發(fā)育和組織重構(gòu)中受調(diào)控，它通過對 MMPs 的抑制在正常細胞外基質(zhì)改建和各種病理過程中發(fā)揮重要作用 [24]。Polyakova 等人關(guān)于不同類型終末期心衰的研究顯示：安 徽 醫(yī) 科 大 學 碩 士 學 位 論 文21正常情況下 TIMP/MMP 大概為 ，而缺血型心肌病其比值增加到，但在擴張型心肌病及其它類型心肌病其比值往往低于 。本實驗通過建立大鼠心肌梗死模型。另外 16 只大鼠僅開胸暴露心臟，不結(jié)扎冠狀動脈，同樣予以腹腔注射生理鹽水 Bid5 天，作為假手術(shù)組，對照造模是否成功以下所示為動物模型制作過程中心電圖Fig1 冠狀動脈結(jié)扎前心電圖安 徽 醫(yī) 科 大 學 碩 士 學 位 論 文27Fig2 冠狀動脈結(jié)扎后 10min 心電圖Fig3 冠狀動脈結(jié)扎后 30min 心電圖以上三幅圖比較可以看出，冠狀動脈結(jié)扎后兩張圖較結(jié)扎前圖