hxj血清清、球蛋白分離新(存儲版)
【正文】 小組標記 樣品標記 生物化學與分子生物學實驗教學中心 2022年秋季學期 22 2. 電泳 ① 薄膜 粗面向下 ② 點樣端置陰極端 ③ 兩端緊貼在濾紙鹽橋上， 膜應輕輕拉平 注意： 切勿使點樣處與電泳槽接觸 電壓： 110V 時間： 50min。 ? 上樣時，滴管應沿柱上端內(nèi)壁加入樣品，動作應輕、慢，勿將柱床沖起。利用這些性質(zhì)的差別，可分離純化各種蛋白質(zhì)。 血清清蛋白 球蛋白 半飽和硫酸銨 清蛋白不沉淀，上清 球蛋白沉淀，蒸餾水溶解 生物化學與分子生物學實驗教學中心 2022年秋季學期 8 2. 脫鹽（凝膠層析） ? 鹽析分離的蛋白質(zhì)溶液中含有大量無機鹽，必須先脫鹽后才能進一步純化。 ? 切勿將檢測蛋白質(zhì)的磺基水楊酸與檢查 SO42的 BaCl2混淆，因二者與相應物質(zhì)生成的沉淀均為白色。 取出膜，用濾紙吸干即可。因此可以將它們分離為 清蛋白（ Albumin)、 α1球蛋白、 α2球蛋白、 β球蛋白、 γ球蛋白 5條區(qū)帶。 ? 使用時勿將各時段所應用的溶液濃度弄錯。 ?不同蛋白質(zhì)的 分子量 、 溶解度 及 等電點 等都有所不同。 ? 脫鹽有多種方法，本實驗采用 凝膠層析法。 ? 葡聚糖凝膠價錢昂貴，要回收再生 ,避免損耗， 嚴禁倒掉 ! 生物化學與分子生物學實驗教學中心 2022年秋季學期 20 醋酸纖維素薄膜電泳原理 血漿中各種蛋白質(zhì)的等電點不同，一般都低于。 生物化學與分子生物學實驗教學中心 2022年秋季學期 24 思考題 ? ,為什么是 和硫酸銨 ? ? DEAE纖維素柱分離 γ球蛋白后不用再生 ,可直接用于純化清蛋白 ? ? 清清蛋白和 γ球蛋白的純度 ,根據(jù)什么來確定它是清蛋白還是 γ球蛋白 ?判定它們純度的依據(jù)是什么 ? 2022年秋季學期
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