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蛋白質(zhì)的分析ppt課件(存儲版)

2025-06-02 06:15上一頁面

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【正文】 , 試劑盒提供 ,用前用 100mM TrisHCl()配成5mg/mL。 試 劑 1. 轉(zhuǎn)移緩沖液: 甘氨酸 ( 39 mmol/L) , Tris 堿( 48mmol/L) , SDS( %) , 200ml 甲醇( 20%) , 定容至 1,000mL; 每組用量約 500mL。 封閉與雜交 6. 將膜放入塑料盒中 , 加入 20mL封閉液 , 置脫色搖床中緩慢搖動 , 室溫 1小時或 4℃ ( 層析冷柜 ) 封閉過夜 。 實驗原理 蛋白質(zhì)樣品經(jīng) SDSPAGE電泳后 , 凝膠所含的樣品蛋白質(zhì)區(qū)帶通過電泳方法轉(zhuǎn)移 、 固定到載體 ( 如尼龍膜 、 硝酸纖維素膜 、 PVDF膜 ) 上 , 以膜上的蛋白或多肽為抗原 , 與相應(yīng)的第一抗體和酶標(biāo)記的第二抗體反應(yīng) , 用適當(dāng)?shù)娜芤浩慈ノ唇Y(jié)合抗體后 , 置含底物的溶液中培育 , 顯出譜帶 , 即可檢測出樣品中的特異組
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