通風(fēng)設(shè)施專項(xiàng)檢查規(guī)定(存儲(chǔ)版)
【正文】 ．2．2血液濃集涂片法操作方法（1） 取用草酸鉀與草酸銨混合抗凝劑抗凝血液移入紅細(xì)胞比測(cè)定管內(nèi)。取上清液至第二管，然后兩管再以3000r/min離心15min。注意事項(xiàng)（1）劃皮時(shí)要注意深淺度，劃得太淺，血液不能流出，達(dá)不到檢查的效果，劃得太深血液大量流出反而降低效果。（4） 再以1000r/min離心10min，結(jié)果可以看到在阿拉伯膠之上的沉淀為第一層，內(nèi)含有大量裂殖體和少數(shù)滋養(yǎng)體僅見極個(gè)別的正常紅細(xì)胞，在離心底部的沉淀為第二層，如感染的血中有環(huán)形體，則在第二層沉淀中有環(huán)狀體，部分滋養(yǎng)體和裂殖體，以及正常紅細(xì)胞。（4） 用緩沖液沖洗數(shù)次。瘧原蟲的各個(gè)發(fā)育階段的形態(tài)可以分辨出來，如想用油鏡看可滴一滴香柏油即可觀察。操作方法穿刺骨髓液，或者淋巴結(jié)制成涂片，肝與脾也可，雖陽(yáng)性率高但不太安全。待干后，用吉氏或瑞氏染色法染色、鏡檢。如不能及時(shí)檢查時(shí)，可用10%甲醛固定保存。操作方法 （1） 消毒棉簽在疑似的病人陰道后穹窿，子宮頸及陰道壁上取分泌物。（3） 傾去上清液，吸取少量沉渣，放入載玻片上。（2）取一凹孔玻片，以凹孔覆蓋在蓋玻片上。1．4．1．2壓片檢查豬囊尾蚴：寄生于人皮下或肌肉內(nèi)的囊尾蚴，可用外科手術(shù)將結(jié)節(jié)取出，剝?nèi)ネ鈱永w維被膜，取出內(nèi)含物，置于二載玻片之間，輕輕壓平，玻片兩端用膠布纏牢，在低倍鏡下檢查有無(wú)豬肉絳蟲囊尾蚴之頭節(jié)。但此方法不常用。每天補(bǔ)充管內(nèi)蒸發(fā)掉的水分。2．2毛蚴孵化法血吸蟲卵內(nèi)含毛蚴，在適宜條件下，毛蚴可以孵出，肉眼即可觀察。夏季毛蚴孵化速度快，有時(shí)在換水過程中即可孵出，可用1%食鹽水或4%硫代硫酸鈉代替清水，以防止毛蚴早期孵化，最后一次沉淀再換清水。2．4．2操作方法 （1）接種前每管加2ml消毒洛氏液，再加少許消毒米粉及青、鏈霉素，置溫箱內(nèi)15min，即可取出接種。培養(yǎng)基法2．5．1培養(yǎng)基的制備瓊脂 14g氯化鈉 6g蒸餾水 900ml（1）將以上各物混合，加熱溶解后，分裝試管，每管6ml，高壓滅菌，置冰箱內(nèi)備用。②然后加入其他成分，加熱使之溶解。注意一切程序均需嚴(yán)格無(wú)菌，否則影響鞭毛體的生長(zhǎng)。N消毒米粉：將米粉裝在鏈霉素小瓶?jī)?nèi)，經(jīng)高壓滅菌后，再置70℃烤箱中30min。注意事項(xiàng)糞便要新鮮，否則影響效果。送檢的糞便應(yīng)注意勿混入土壤，以避免土中之線蟲進(jìn)行管內(nèi)。然后插入試管，使紙條的下端與水接觸。1．4．3切片檢查寄生于組織內(nèi)的寄生蟲，必要時(shí)可取活組織作切片檢查。1．4．1．1壓片檢查旋毛蟲：用外科手術(shù)從二頭肌或腓腸肌近肌腱處摘米粒大小的肌肉一塊，放于載玻片上，滴一滴50%甘油，用解剖針精細(xì)地分離開肌纖維，然后放上一載玻片，輕輕壓平，在低倍鏡下檢查。取材與直接涂片法基本一樣，但檢出率比直接涂片法稍高。進(jìn)行沖洗振蕩，然后取出棉簽。要注意徹底的消毒，以免發(fā)生感染。注意事項(xiàng)以下呼吸道的痰液為最好，除肺吸蟲卵外還可檢查出寄生蟲的幼蟲如棘突蚴的頭節(jié)，小鉤，蛔蟲的幼蟲等。血片染色較深時(shí)，血小板顆粒不清楚，易認(rèn)錯(cuò)，所以要注意利杜體和血小板的區(qū)別，以免誤診。1．2．3黑熱病原蟲的檢查骨髓穿刺取骨髓液檢查是診斷黑熱病的一種常用方法。染色的血片在熒光顯微鏡下，視野的背景呈暗綠或黑綠色，瘧原蟲的核和白細(xì)胞的核（因含有大量的脫氧核糖核酸），呈現(xiàn)橙紅色熒光，正常紅細(xì)胞不著色。（2） %吖啶橙染液滴在厚血膜上染半分鐘，然后在薄血膜上滴吖啶橙染色液染1分鐘。（2） 將感染瘧原蟲的血液3ml慢慢的放入離心管的上層，切莫混合。（3） 擠出微帶血液的組織液制成厚、薄血膜均可。（2）待完全溶解后離心沉淀。（8） 血膜用久退色，需復(fù)染時(shí)，可放入稀釋好的吉氏染液染2~6h，再浸于1%硼酸溶液中褪色，然后用中性蒸餾水沖洗。注意事項(xiàng)（1） 取好在病人寒戰(zhàn)發(fā)作前取血檢查，陽(yáng)性率高。（7） 制成后，將玻片平放，待干后固定染色。1．2．2瘧原蟲檢查法1．2．2．1厚薄血片法操作方法（1） 取一潔凈無(wú)油脂的載玻片，再另取一張做推片用的完整無(wú)損的載玻片。如需鑒定微絲蚴的種類，可進(jìn)行染色，再鏡檢。（6） 微絲蚴應(yīng)與棉花纖維鑒別，棉花纖維長(zhǎng)短皆不一致，且其中無(wú)體核。（6） 用水沖洗后，~1%鹽酸中數(shù)秒鐘，使新染的片子更加顯明。（2） 采血量不宜過多，否則血球會(huì)將蟲體遮蓋，但又不宜過少，血量太少，又影響檢出率。（3） 把粘有蟲卵一面的膠紙放在載玻片上，滴生理鹽水1~2滴，使膠紙平展，便可鏡檢，如加二甲苯后蟲卵更為清晰。再于受檢者肛門周圍皺襞上揩拭。試劑的配制汞碘醛染色液盧戈氏液（碘5g、碘經(jīng)鉀10g、蒸餾水100ml）1ml甲醛 硫柳汞酊 用時(shí)將三種液體按上述比例配制盧戈氏液，超過一周后不宜再用。吸取管底沉渣，滴于載玻片上鏡檢。以1500~2000r/min速度離心1~2min，棄去上清液，加入清水，調(diào)勻后再離心沉淀，至上清液清晰為止。（1） 自然沉淀法取20g左右的糞便放在燒杯內(nèi)，加少許清水充分?jǐn)嚢?，再加?0倍的水，邊加水邊攪拌。取兩層紗布過濾于離心管內(nèi)。如每95ml內(nèi)加5ml40%甲醇溶液，可起固定的作用，有利于吸蟲卵的上浮。定量板一定要置于載玻片的中部，如果定量板偏于一側(cè)，則制片后玻片邊緣的糞膜不能進(jìn)入鏡檢視野內(nèi)而產(chǎn)生漏檢。1．1．1．：鏡檢：將透明好的加藤片置光學(xué)顯微鏡的載物臺(tái)上，在低倍鏡(10)下鏡檢。（2） 用便簽挑取少許糞便的粘液部分，與生理鹽水混合，涂成適當(dāng)?shù)募S膜。（5） 分別依次放置于50%及70%酒精中，每次各需時(shí)30秒鐘。（3） 碘、伊紅染色時(shí)背景較深，不如使用碘液時(shí)背景清楚。（2） 檢查原蟲活滋養(yǎng)體時(shí)，可在用生理鹽水涂勻的糞膜附近滴一滴碘液，取少許糞便在碘液中涂勻，勿使兩塊糞膜相混合，蓋上蓋玻片，便可觀察。一般不用油鏡觀察。1．1．1．1生理鹽水涂片法：操作方法（1） 取潔凈的載玻片一張，于中央滴1~2滴生理鹽水。目的依據(jù)《寄生蟲病檢測(cè)檢驗(yàn)技術(shù)》2005建立寄生蟲基本檢驗(yàn)技術(shù)檢驗(yàn)方法操作規(guī)程，保證測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確性。缺點(diǎn)是陽(yáng)性率較低，視野中雜質(zhì)較多，蟲卵或原蟲少時(shí)不易查到。（4） 防止涂片變干，可隨時(shí)滴加生理鹽水。方法（1） 檢查原蟲包囊時(shí)在干凈的載玻片上滴一滴碘液，然后取少許糞便，于碘液中，涂抹均勻，便可檢查。（2） 碘液過濃，易使標(biāo)本沉集成塊且使原蟲染色過深，而致構(gòu)造不大明顯，故在使用時(shí)，注意調(diào)節(jié)碘液量。（4） 立即用自來水輕輕沖洗。操作方法：（1） 在干凈的載玻片上加一滴生理鹽水。 編號(hào)后置室溫25℃、濕度75%時(shí)約1小時(shí)或30~36℃溫箱中約半小時(shí)后鏡檢。糞便過硬時(shí)，加少許清水或透明液浸泡片刻，再行刮取。（1） 飽和鹽水漂浮法：試劑的配制食鹽 40g蒸餾水 100ml加熱至沸，冷后取上
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