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生物芯片技術(shù)簡介(存儲版)

2025-05-07 03:55上一頁面

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【正文】 例如多聚賴氨酸或氨基硅烷等。檢測和分析檢測的原理  熒光標(biāo)記和檢測是利用熒光標(biāo)記的DNA堿基在不同的波長下吸收和發(fā)射光。從這一點(diǎn)來說,該檢測方法是具有一定特異性的,而且熒光信號的強(qiáng)度還與樣品中靶分子含量呈一定的線性關(guān)系。聚焦掃描儀和CCD相機(jī)均已成功地應(yīng)用于芯片的檢測。這樣一方面節(jié)約了試劑,同時還可以提高反應(yīng)試劑的有效濃度(),是常規(guī)檢測()的一萬倍。引物具有較強(qiáng)的特異性,擴(kuò)增反應(yīng)也不存在交叉污染,因而省略了處理常規(guī)多重和多個PCR反應(yīng)的繁瑣工作。當(dāng)然,由于不同檢測方式的靈敏度不同對于樣品的處理和擴(kuò)增情況的要求亦有所不同,具體的處理和放大方法仍需根據(jù)實際情況進(jìn)行選擇。例如核酸與蛋白的相互作用,配體間的相互作用,糖與蛋白的相互作用等。該技術(shù)比較成功的例子就是HCV與HBV的檢測。順應(yīng)這一要求出現(xiàn)了許多解決辦法,并在不同程度上減輕了工作量。而且,還可用多個熒光素進(jìn)行標(biāo)記以實現(xiàn)一次性分析多個生物樣品。   (三)熒光探針的選擇     主要考慮以下幾個因素:     熒光探針的激發(fā)和發(fā)射頻譜;   熒光探針的發(fā)光效率;     熒光探針對PCR或逆轉(zhuǎn)錄效率的影響;  不同熒光探針的發(fā)射光譜是否有重疊。用鏈霉親和素(streptavidin)偶聯(lián)的熒光素(常用的熒光素還有l(wèi)assamine 和phycoerythrin)作為顯色物質(zhì),圖象的分析則用落謝熒光顯微鏡、激光共聚焦顯微鏡或其它熒光顯微裝置對片基掃描,由計算機(jī)收集熒光信號,并對每個點(diǎn)的熒光強(qiáng)度數(shù)字化后進(jìn)行分析。點(diǎn)樣法制作芯片的工藝比較簡單便于掌握、分析設(shè)備易于獲取,適宜用戶按照自己的需要靈活機(jī)動地設(shè)計微點(diǎn)陣,用于科研和實踐工作。只是合成工作用傳統(tǒng)的DNA、多肽合成儀或PCR擴(kuò)增或體內(nèi)克隆等方法完成。(見下圖) 打印原位合成壓電打印原位合成的方式類似于噴墨打印機(jī),合成原理與傳統(tǒng)的核酸或寡肽固相合成技術(shù)相同。聚合用單體分子一端活化另一端受光敏保護(hù)劑的保護(hù)。應(yīng)用意義     對來源于不同個體(正常人與患者)、不同組織、不同細(xì)胞周期、不同發(fā)育階段、不同分化階段、不同病變、不同刺激(包括不同誘導(dǎo)、不同治療階段)下的細(xì)胞內(nèi)的mRNA或逆轉(zhuǎn)錄后產(chǎn)生的cDNA與表達(dá)譜基因芯片進(jìn)行雜交,可以對這些基因表達(dá)的個體特異性、組織特異性、發(fā)育階段特異性、分化階段特異性、病變特異性、刺激特異性進(jìn)行綜合的分析和判斷,迅速將某個或幾個基因與疾病聯(lián)系起來,極大地加快這些基因功能的確立,同時進(jìn)一步研究基因與基因間相互作用的關(guān)系。基因芯片以及相關(guān)產(chǎn)品產(chǎn)業(yè)有可能成為下一世紀(jì)最大的高技術(shù)產(chǎn)業(yè)之一。而應(yīng)用這一技術(shù)的前提是必須首先獲得優(yōu)良基因克隆,但目前具有專一抗性的抗病基因數(shù)量有限,限制了這一技術(shù)的應(yīng)用。認(rèn)為基因芯片以及相關(guān)產(chǎn)品產(chǎn)值有可能超過微電子芯片, 成為下一世紀(jì)最大的高技術(shù)產(chǎn)業(yè),具有巨大的商業(yè)潛力。早在1988年,Bains等人就將短的DNA片段固定到支持物上,以反向雜交的方式進(jìn)行序列測定。生物芯片技術(shù)簡介生物芯片技術(shù)通過微加工工藝在厘米見方的芯片上集成有成千上萬個與生命相關(guān)的信息分子,它可以對生命科學(xué)與醫(yī)學(xué)中的各種生物化學(xué)反應(yīng)過程進(jìn)行集成,從而實現(xiàn)對基因、配體、抗原等生物活性物質(zhì)進(jìn)行高效快捷的測試和分析。其中以生物芯片技術(shù)為基礎(chǔ)的許多新型分析技術(shù)發(fā)展最快也最具發(fā)展?jié)摿ΑR虼?,國際上一些著名的政治家, 投資者和科學(xué)家均看好這一技術(shù)前景。利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)進(jìn)行品種改良,是目前最經(jīng)濟(jì)有效的防治措施。如美國的國立衛(wèi)生研究院、商業(yè)部高技術(shù)署、國防部、司法部和一些
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