微生物遺傳育種研究進(jìn)展(存儲版)
【正文】 5基因重組基因重組是遺傳的基本現(xiàn)象之一，菌株能夠經(jīng)過基因重組獲得新的遺傳型，從而獲得具有優(yōu)良性狀的菌種。近年來，滅活原生質(zhì)體融合、離子束細(xì)胞融合、非對稱細(xì)胞融合以及基因重排分子育種等新方法相繼提出并且應(yīng)用于微生物育種，這是原生質(zhì)體融合技術(shù)的新發(fā)展。缺點：設(shè)備條件要求高，費用較高。 原生質(zhì)體融合的促融方法由于在自然條件下， 原生質(zhì)體發(fā)生融合的頻率非常低， 所以在實際育種過程中要采用一定的方法進(jìn)行人為地促融合。通過2個遺傳性狀不同的親株原生質(zhì)體融合從而達(dá)到雜交的目的。有性雜交是指不同遺傳型的兩性細(xì)胞間發(fā)生的接合和隨之進(jìn)行的染色體重組，進(jìn)而產(chǎn)生新遺傳型后代的一種育種技術(shù)。如果兩種或兩種以上誘變劑合理搭配使用，復(fù)合誘變較單一誘變效果好。針對傳統(tǒng)誘變的這些不足，只要組合使用相關(guān)篩選技術(shù)，從而能夠?qū)崿F(xiàn)快速篩選目標(biāo)菌株，化學(xué)誘變技術(shù)仍可通過優(yōu)化誘變篩選實驗操作程序，在微生物育種研究中進(jìn)一步發(fā)揮不可替代的重要作用。除此之外，還有微波、雙向復(fù)合磁場、紅外射線和高能電子流等新誘變技術(shù)，它們與其他誘變源一起進(jìn)行復(fù)合誘變，能起到很好的誘變效果，因此從某種意義上稱這些誘變源為“增變劑”[15]。阮麗娟等（1993年）用低能離子注入糖化酶生產(chǎn)菌，僅僅經(jīng)過l2年時間，[4]。由于紫外線的能量比X射線和γ射線低得多，在核酸中能造成比較單一的損傷，所以在DNA的損傷與修復(fù)的研究中，紫外線也具有一定的重要性。1941年Beadle和Tatum采用X射線和紫外線誘變紅色面包霉，得到了各種代謝障礙的突變株。自然突變可能會產(chǎn)生兩種截然不同的結(jié)果，一種是菌種退化而導(dǎo)致目標(biāo)產(chǎn)量或質(zhì)量下降；另一種是對生產(chǎn)有益的突變。關(guān)鍵詞：微生物育種，離子注入，原生質(zhì)體融合目錄1前言 12自然選育 13誘變育種 2 2 3 4 44雜交育種 4 4 5 5 原生質(zhì)體融合的促融方法 6 6 代謝控制育種 75基因重組 76小結(jié) 8參考文獻(xiàn) 81前言微生物是自然界中廣泛存在的生物群體，在工業(yè)、醫(yī)藥、食品、科研等行業(yè)中具有廣泛的應(yīng)用，在工業(yè)上是某些工業(yè)產(chǎn)物的產(chǎn)生個體，醫(yī)藥行業(yè)將的很多種藥物是來源于微生物個體的初級或次生代謝產(chǎn)物，方方面面都有微生物的影子，對于微生物育種最早是來源于什么時候，這個也許應(yīng)該可以追溯到人類對微生物的應(yīng)用。微生物遺傳育種的主要方法可以大概分為物理方法、化學(xué)方法和生物方法，或者將微生物的育種工作分為傳統(tǒng)育種和現(xiàn)代生物技術(shù)育種，二者的區(qū)別在于是否有現(xiàn)代生物技術(shù)方法參與育種工作。同時也可利用自發(fā)突變而出現(xiàn)的菌種性狀的變化，去選育優(yōu)良的菌株，如在味精發(fā)酵被噬菌體污染過程中，所選出的抗噬菌體菌株。誘變劑有物理誘變劑、化學(xué)誘變劑和生物誘變劑。低能離子注入育種技術(shù)是近些年發(fā)展起來的物理誘變技術(shù)。袁成凌等[10]（2003）研究表明，在離子注人（10KeV，31014N+/cm2）條件下，后代菌株離散程度明顯高于自然分離?；瘜W(xué)誘變劑包括烷化劑如甲基磺酸乙酯、硫酸二乙酯、亞硝基胍、亞硝基乙基脲、乙烯亞胺及氮芥等、天然堿基類似物、脫氨劑如亞硝酸、移碼誘變劑、羥化劑和金屬鹽類如氯化鋰及硫酸錳等。但為了篩選獲取目的菌株，無論何種誘變方式都要配合進(jìn)行含量測定或相關(guān)活性篩選等工作[17]。4雜交育種雜交是指在細(xì)胞水平上進(jìn)行的一種遺傳重組方式。在這些雙倍體雜交子代中，通過篩選，就可以得到優(yōu)良性狀的雜種。1978年，國際工業(yè)微生物遺傳學(xué)討論會提出了原生質(zhì)體的融合問題，使這一技術(shù)迅速擴展到了育種領(lǐng)域。優(yōu)點：不需要特別的儀器設(shè)備，操作簡便。蔣文泓等[24]以禽多殺性巴氏桿菌（Pasteurel lamultocida）5:A弱毒菌株與禽大腸桿菌O2弱毒菌株作親本進(jìn)行原生質(zhì)體融合，成功獲得3株具有雙親耐藥性和雙親菌體血清型的融合菌株，為進(jìn)一步研制細(xì)菌多聯(lián)高效弱毒菌苗開辟了新途徑。快速代謝控制育種的活力在于以誘變育種為基礎(chǔ)，獲得各種解除或繞過微生物正常代謝途徑的突變株，從而人為地使有用產(chǎn)物選擇性地大量生成積累，打破了微生物調(diào)節(jié)這一障礙。載體一般為環(huán)狀DNA；（3）重組子體外構(gòu)建；（4）重組載體導(dǎo)人受體細(xì)胞；（5）重組體篩選和鑒
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