[農(nóng)林牧漁]第4章固相析出分離技術(shù)(存儲版)
【正文】 懸浮液中具有很多小的晶核，然后倒進待結(jié)晶的溶液中，用玻璃棒輕輕攪拌，放置一段時間后即有結(jié)晶析出。167。167。 溶液的濃度應(yīng)根據(jù)工藝和具體情況實驗確定。 對于蛋白質(zhì)、酶和核酸等生物大分子 ，使用較多的是硫酸銨溶液、氯化鈉溶液、磷酸緩沖溶液、 Tris緩沖溶液和丙酮、乙醇等。4． pH值167。 ④ 連續(xù)結(jié)晶設(shè)備的生產(chǎn)能力可比分批結(jié)晶提高數(shù)倍甚至數(shù)十倍，相同生產(chǎn)能力則投資少，占地面積小。不加晶種，迅速冷卻(2)加晶種而緩慢冷卻連續(xù)結(jié)晶的操作中往往要采用：三、結(jié)晶設(shè)備(1)攪拌軸； 臥式結(jié)晶箱中還設(shè)有一定的冷卻面積，因而既可作結(jié)晶用，也可作蒸發(fā)結(jié)晶操作的輔助冷卻結(jié)晶器 (晶體在其中繼續(xù)長大)，又可作為結(jié)晶分離前的晶漿貯罐。 3.吸液孔； 6.軸封填料箱； 12.清洗孔； 4.支腳； 9. 臥式結(jié)晶箱 通常是半圓底的臥式長槽或敞口的臥放圓筒長槽，常應(yīng)用于谷氨酸鈉的助晶和葡萄糖的結(jié)晶。6.這是最簡單的一種 分批式結(jié)晶器 ，它操作容易，常用于生產(chǎn)量較小的檸檬酸結(jié)晶。清目 ③ 操作控制上比分批操作困難，要求嚴格。 ② 結(jié)晶工藝簡化，相對容易保證質(zhì)量。結(jié)晶溶劑要具備以下幾個條件：167。 對于大多數(shù)生物小分子來說 ，水、乙醇、甲醇、丙酮、氯仿、乙酸乙酯、異丙醇、丁醇、乙醚等溶劑使用較多。 攪拌 能促進擴散，加快晶體生長，同時也能加速晶核形成，攪拌越劇烈，晶體越細。 影響晶體生長速度的因素主要有 雜質(zhì)、過飽和度、溫度、攪拌速度 等。另外，玻璃棒沾有溶液后暴露于空氣中，很容易蒸發(fā)形成一層薄薄的結(jié)晶，再浸入溶液中便成為同種晶核。對于有機物質(zhì)，結(jié)構(gòu)越復(fù)雜，分子量越大，成核速度越慢。晶核的大小通常在幾個納米到幾十個納米。解析法是 向溶液中加入某些物質(zhì)，使溶質(zhì)的溶解度降低，形成過飽和溶液而結(jié)晶析出。 ② 將部分溶劑蒸發(fā) ③ 二、結(jié)晶的過程167。結(jié)晶167。： ① 操作條件溫和； ② 沉淀效率高； ③ 沉淀的顆粒往往比較大。利用兩性生化物質(zhì)在等電點時溶解度最低，以及不同的兩性生化物質(zhì)具有不同的等電點這一特性，對蛋白質(zhì)、氨基酸等兩性生化物質(zhì)進行分離純化的方法 稱為等電點沉淀法 。中性鹽濃度 ③ 毒性小，揮發(fā)性適中。缺點 ： ① 有機溶劑沉淀法易使蛋白質(zhì)等生物大分子變性，操作需在低溫下進行； ② 需要耗用大量有機溶劑，成本較高； ③ 有機溶劑一般易燃易爆，所以貯存比較困難或麻煩。有機溶劑沉淀法2）有機溶劑能破壞蛋白質(zhì)表面的水膜。(5)溫度的影響 ：蛋白質(zhì)的鹽析一般在室溫下進行四、鹽析操作（以硫酸銨為例） 鹽析時，將鹽加入到溶液中有兩種方式：在實驗室和小規(guī)模生產(chǎn)中溶液體積不大時，或硫酸銨濃度不需太高時，可采用這種方式。④ 價格價廉① 鹽析能力強。(蛋白質(zhì) ) 1）中性鹽離子破壞蛋白質(zhì)表面水膜 第 4章 固相析出分離技術(shù)鹽析法有機溶劑沉淀法其他沉淀技術(shù)結(jié)晶技術(shù)第 4章 缺點 ：鹽析法分辨率不高一、鹽析法的原理 ③ 不易使蛋白質(zhì)變性。pH的影響 ： 進行鹽析時的 pH，要選擇在被鹽析的蛋白質(zhì)的 pI附近。鹽析條件如 pH、溫度和硫酸銨的純度都必須嚴格控制。② 對生物大分子的變性作用小。pH多控制在待沉蛋白質(zhì)的等電點附近 。 一、等電點沉淀法 三、有機聚合物沉淀法優(yōu)點 ② 調(diào)整溶液的性質(zhì)
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