家蠶核型多角體病毒lef-11與宿主相互作用項(xiàng)目申請(qǐng)書(shū)(存儲(chǔ)版)
【正文】 鑒定 lef11 基因 與宿主細(xì)胞相互作用蛋白 。它決定了目標(biāo)基因過(guò)表達(dá)的效率，是基因功能研究的控制性因素。 無(wú)論從前期研究基礎(chǔ)、研究?jī)?nèi)容、研究方案和技術(shù)路線、團(tuán)隊(duì)成員組成和研究條件方面，都為本項(xiàng)目的實(shí)現(xiàn)提供了保證。 西南大學(xué)基本科研業(yè)務(wù)費(fèi)專項(xiàng)資金項(xiàng)目計(jì)劃任務(wù)書(shū)（學(xué)生項(xiàng)目） 10 （ 2）預(yù)期研究結(jié)果 1） 確定 LEF11 蛋白 核定位位置 ； 2）鑒定宿主細(xì)胞中與 LEF11 相互作用蛋白 。 這些研究結(jié)果為進(jìn)一步分析 LEF11 蛋白 過(guò)表達(dá)后宿主蛋白變化奠定了基礎(chǔ) 。參與國(guó)家自然基金項(xiàng)目 ，發(fā)表論文 5 篇，其中以第一作者發(fā)表于 病毒學(xué)權(quán)威雜志 Virus Research 上 一篇。 負(fù)責(zé)人（簽字）： 單位公章 日期： 七、學(xué)校領(lǐng)導(dǎo)小組意見(jiàn) 建議資助金額 萬(wàn)元 建 議 立項(xiàng)意見(jiàn) 年 月 日 。 申請(qǐng)人簡(jiǎn)介 1．董戰(zhàn)旗 1） 個(gè)人簡(jiǎn)介（應(yīng)包含本項(xiàng)目中承擔(dān)的任務(wù)） 董戰(zhàn) 旗，西南大學(xué)，家蠶基因組生物學(xué)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，博士生，本項(xiàng)負(fù)責(zé)人。 圖 1 LEF11 的亞細(xì)胞定位 2)LEF11 過(guò)表達(dá)后 為了分析 LEF11 過(guò)表達(dá)后， 分析 LEF11 表達(dá)量 ， 通過(guò) Western blot 分析了 LEF11 過(guò)表達(dá)后， LEF11 蛋白表達(dá)效率 。 因此， 研究的理論和應(yīng)用價(jià)值上具有創(chuàng)新性。 本項(xiàng)目 選題既有理論意義，又有應(yīng)用價(jià)值， 研究方案切實(shí)可行，技術(shù)路線合理，所用實(shí)驗(yàn)技術(shù)方法先進(jìn)，能夠按期完成預(yù)定研究任務(wù)。 (3)關(guān)鍵技術(shù) 1) 免疫共沉淀技術(shù)。 2）揭示 LEF11 過(guò)表達(dá)對(duì)宿主細(xì)胞 蛋白表達(dá)的影響 。同時(shí)我們過(guò)表達(dá)lef11基因 鑒定其定位與 DNA復(fù)制中心。由于其基因組只有 130kb左右，編碼 150個(gè)氨基酸左右病毒通常需要通過(guò)與宿主之間的相互作用來(lái)幫助病毒完成復(fù)制等過(guò)程 [3]。 LEF11相互作用蛋白鑒定 。 LEF11蛋白免疫共沉淀研究 通過(guò)過(guò)表達(dá) LEF11,利用免疫共沉淀，通過(guò)質(zhì)譜分析，篩選相互作用蛋白。 國(guó)內(nèi) 外研究現(xiàn)狀及分析 BmNPV是桿狀病毒科的成員之一，能產(chǎn)生兩種不同類型的病毒粒子一種包埋性病毒（ ODV）和芽生型病毒 （ BV） [2]。我們小組先前對(duì) LEF11核定位進(jìn)行研究表明其定位于宿主細(xì)胞復(fù)制中心，說(shuō)明 LEF11很有可能參與病毒感染宿主細(xì)胞后的 DNA復(fù)制 [8]。 研究目標(biāo) 1）鑒定 LEF11 核定位 ，分析其定位位置 。 （ 2） 技術(shù)路線 西南大學(xué)基本科研業(yè)務(wù)費(fèi)專項(xiàng)資金項(xiàng)目計(jì)劃任務(wù)書(shū)（學(xué)生項(xiàng)目） 8 本項(xiàng)目的技術(shù)路線如下圖。 同時(shí)，我們對(duì) LEF11 核定位機(jī)制的研究也為此項(xiàng)目繼續(xù)深入鑒定基礎(chǔ) （相關(guān)數(shù)據(jù)已經(jīng)發(fā)表在病毒學(xué)權(quán)威雜志Virus Research 上）。 （ 2）項(xiàng)目創(chuàng)新之處 通過(guò)項(xiàng)目實(shí)施，可 鑒定 家蠶核型多角體病毒 lef11 基因?qū)?宿主蛋白相互作用的 蛋白 ，豐富和完善病毒 宿主互作的理論基礎(chǔ) 。 這些研究結(jié)果為 解析 LEF11 蛋白對(duì) 宿主復(fù)制 增殖的調(diào)控作用 奠定了 基礎(chǔ)。這些高通量、高效率和高起點(diǎn)的功能基因研究平臺(tái)，能滿足本項(xiàng)目研究的需 要。申請(qǐng)項(xiàng)目如獲資助，我單位保證對(duì)研究實(shí)施所需的人力、物力和工作時(shí)間等條件給予保障，督促項(xiàng)目負(fù)責(zé)人認(rèn)真開(kāi)展研究工作，及時(shí)報(bào)送有關(guān)材料。 2） 受教育經(jīng)歷 ? 20xx/09－，西南大學(xué)， 家蠶基因組生物學(xué)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 ，博士 ? 20xx/09－ 20xx/06，西南大學(xué)， 家蠶基因組生物學(xué)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 ，碩士 ? 20xx/09－ 20xx/06， 太原師范 大學(xué)， 生命科學(xué) 系，學(xué)士 3） 科研成果 [1] Dong ZQ, Zhang J, Chen XM, He Q, Cao MY, Wang L ,Li HQ, Dong XL, Pan CX, Lu C.*,Pan MH*. Bombyx mori
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