【正文】 一。放射生物學(xué)家們?cè)缭?1959 年就已經(jīng)用蠶豆的根尖細(xì)胞來進(jìn)行 x 射線的遺傳損傷研究。 蠶豆為長(zhǎng)日照作物。中國(guó)以四川最多，四川攀枝花涼山州更是盛產(chǎn)蠶豆。 蠶豆根尖細(xì)胞學(xué)實(shí)驗(yàn)的研究現(xiàn)狀與進(jìn)展 蠶豆 (Vicia faba)又稱胡豆、佛豆、川豆、倭豆、羅漢豆。尤其是以鉛最為明顯，根據(jù)Gao[23]等人的研究，加入磷酸鹽后有效鉛的濃度極大的降低了，使其向殘?jiān)?加11％ — 55％。目前用來修復(fù)重金屬污染的磷材料主要有磷灰石族礦物、還有無機(jī)磷肥、無機(jī)磷酸鹽與骨粉。而磷在自然界中主要以磷酸鹽的形式存在。高錳脅迫通常是顯著地降低了植物的生物量形成 ,最終引起產(chǎn)量的大幅度下降，甚至于絕產(chǎn)。錳在植物體內(nèi)維持活化酶的活性、細(xì)胞器的正常結(jié)構(gòu)起了重要作用，以及對(duì)植物的光合作用也產(chǎn)生很大的影響。于 2020年 8月 6日，胡錦濤總書記還在中央政研室第 284期簡(jiǎn)報(bào)《“錳三角”的劇毒水污染問題亟待解決》上做出重要批示“環(huán)?？偩忠钊胝{(diào)查研究，提出治理方案，協(xié)調(diào)三省市聯(lián)合行動(dòng)，共同治理”同年8月 26日，胡錦濤總書記再次批示“要明確職責(zé)，加強(qiáng)監(jiān)督，務(wù)見實(shí)效”。周婭 [9]等人對(duì)攀枝花土壤的重金屬分布特征進(jìn)行 研究，采用了原子吸收分光光度計(jì)來測(cè)定Mn、 Cu、 Zn、 Cd、 Pb、 Ni、 Cr 的含量，最后得出了 Mn的變異系數(shù)是最大的為(390％ )，而僅次于 Mn 的是 Zn 為 (90％ )。 錳污染是指錳對(duì)環(huán)境造成的污染。重金屬的修復(fù)方法是多種多樣的，每一種不同的修復(fù)方法有不 同的優(yōu)缺點(diǎn)，應(yīng)該采用互補(bǔ)的方法，綜合運(yùn)用各種方法來達(dá)到較好的修復(fù)效果。其他的污染來源還包括了大氣的沉降，以及 垃圾的堆放與處理不善等。目前，在工業(yè)大上大都以石油、煤等作為為主要的能源，并且工業(yè)生產(chǎn)過程當(dāng)中廣泛的運(yùn)用了重金屬材料，并且環(huán)境中重金屬污染主要來源為三廢中的 Pb、 As、 Cd、 Cr 等。當(dāng)金屬元素的相對(duì)密度密度大于，我們則 認(rèn)為該金屬為重金屬，比如 Mn、 Cu、 Pb、 Zn、 Co、Ni、 As、 Cd、 Ti、 V、 Cr、 Hg等 60 余種金屬 [1]。錳進(jìn)人植物體后大部分積累在根部，對(duì)細(xì)胞的毒害作用主要反映在染色體和細(xì)胞核的異常變化上。用一定的錳濃度與 不同濃度的磷復(fù)合處理蠶豆根尖，然后鏡檢觀察蠶豆根尖細(xì)胞染色體畸變情況。 關(guān)鍵詞： 蠶豆、細(xì)胞分裂指數(shù)、染色體畸變率、 KH2PO MnCl2 攀枝花學(xué)院本科畢 業(yè)設(shè)計(jì)（論文） ABSTRACT III ABSTRACT This paper explores the phosphorus mitogenic in manganese stress effects on mitosis of Vicia faba root tip. By Mn2Cl﹒ 4H2O and KH2PO4 with manganese and phosphorus. Manganese concentration with different concentrations of phosphorus pound treatment of Vicia faba root tip, and observing the chromosome aberration in root tip cells of Vicia faba by microscope. The result shows that, when using the 2mmol/L manganese phosphorus concentration pound treatment with 13mmol/L, , , , , obtained by three parallel experiment: Under the experimental conditions， the average mitotic index of Vicia faba root tip cell increased firstly and then decreased, the phosphorus concentration for ‰ was highest。 重金屬污染將導(dǎo)致一定程度的生 態(tài)風(fēng)險(xiǎn)。最近幾十年來，隨著工業(yè)與農(nóng)業(yè)的不斷發(fā)展帶來社會(huì)經(jīng)濟(jì)迅速發(fā)展的同時(shí)，大量不同種類的重金屬也依靠地表徑流、大氣沉降、垃圾轉(zhuǎn)移等各種不同的途徑進(jìn)入河流與湖泊，累計(jì)到土壤等， 分別對(duì)生態(tài)環(huán)境造成了不同程度的毒害。而農(nóng)藥中則含有大量的重金屬，大面積的使用不只是導(dǎo)致農(nóng)藥殘留物的積累，同時(shí)也引起土壤中大量重金屬污染的問題；其次則是運(yùn)用污水灌溉農(nóng)田。化學(xué)修復(fù)就是通過加入一些化學(xué)材料，利用其與重金屬發(fā)生沉淀反應(yīng)等的特點(diǎn)來緩解重金屬污染的方法。 錳廣泛的分布在地殼中，而很早就被人們熟知和利用的則是軟錳礦，因此錳礦的開采已有很久的歷史。 攀枝花屬長(zhǎng)江水系，是其上游的第一城，金沙江水系與雅礱江水系在此交匯。 進(jìn)幾年來隨著錳產(chǎn)業(yè)的不斷發(fā)展，帶來的污染也是越來越嚴(yán)重。汪明華等人 [10]也對(duì)錢塘江的錳污染的形成原因進(jìn)行過相關(guān)的調(diào)查，認(rèn)為造成錢塘江水域錳污染的主要原因?yàn)槠髽I(yè)污水以及污水處理廠的污水排放。 錳作為酶的一種活化劑，很少有特異性，只有在少數(shù)酶活化對(duì)于 Mn離子具有高度的專一性，因此錳通常被其他的二價(jià)離子或者是錳離子代替 [12]。當(dāng)植物體缺錳時(shí)，細(xì)胞壁略增厚并且導(dǎo)致表皮組織間隙皺縮，同時(shí)細(xì)胞體積會(huì)變小，最終使植物體的根系不發(fā)達(dá)，開花少結(jié)果很也少 [17]。它不但構(gòu)成人體成分，且參與到生命活動(dòng)中的重要代謝過程，是機(jī)體很重要的一種元素，因此磷也被認(rèn)為是一種重要的生命元素。一般地可溶性磷的含量越高，其對(duì)重金屬的固定能力越強(qiáng) [19]；其次則是重金屬的濃度與種類也會(huì)對(duì)修復(fù)效果產(chǎn)生影響，磷灰石對(duì)溶液中的重金屬離子去除率順序?yàn)椋? Hg+ Mn2+Cu2+Zn2+Cd2+Pb2+[20]。由于目前對(duì)磷的用量多少為最合適存在很大的分歧。為糧食、蔬菜和飼料、綠肥兼用作物。莖直立，四棱，中空，四角上的維管束較大。碳水化合物含量 47%— 60%。在染色體畸變實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上， 1982 年由 degrassi 和 Rizzoni 正式介紹蠶豆的 微核實(shí)驗(yàn) [27]。 攀枝花學(xué)院本科畢業(yè)設(shè)計(jì)（論文） 實(shí)驗(yàn)方案與過程 8 2 實(shí)驗(yàn)方案與過程 實(shí)驗(yàn)藥品與儀器 藥品：無水乙醇 — AR、冰乙酸 — AR、鹽酸 — AR、堿性品紅 — AR、甲醛 —AR、石炭酸 — AR、次氯酸鈉 — AR、氯化錳 — AR、磷酸 二氫鉀 — AR、 山梨醇 —BR。 A 液，首先稱取 3g 堿性品紅溶于 100ml70%乙醇配制成 A 液，可以長(zhǎng)期保存； B 液，取 A 液 10ml 加入 90ml 的 5%的石炭酸水溶液配制成 B 液，在兩周內(nèi)使用； C 液，取 B 液 55ml 加入冰乙酸和福爾馬林各 6ml 配制成 C 液； 染液，取 C 液 20ml 加入 45%的乙酸 70ml，再加入山梨醇 則配制成染液，5天后使用著色效果較好。 染毒 將 6個(gè) 100ml 洗凈的小燒杯編號(hào)為 6，在 1號(hào)燒杯加入 20ml蒸餾水， 2號(hào)燒杯加入 20ml26mmol/LKH2PO4溶液，用 5ml 的移液管將已經(jīng)配制好的 KH2PO4溶液移取 3ml 于 3號(hào)燒杯中稀釋 10倍；取 3號(hào)已稀釋液 3ml 于 4號(hào)燒杯中稀釋 10倍；取 4號(hào)稀釋液 3ml 于 5號(hào)燒杯中稀釋 10倍；最后取 5號(hào)稀釋液于 6號(hào)燒杯中稀釋 10倍，則配制成 5個(gè)濃度梯度的 KH2PO4溶液。 2 239。實(shí)驗(yàn)過程拍照主要是針對(duì)在實(shí)驗(yàn)過程中的一些重要實(shí)驗(yàn)步驟進(jìn)行拍照，顯微照相主要是對(duì)染色體畸變細(xì)胞進(jìn)行照相，準(zhǔn)確展示染色體畸變形態(tài) 。從實(shí)驗(yàn)四、五、六組可知在磷濃度 ，隨著磷濃度的增加染色體畸變率會(huì)逐漸的下降，但 是當(dāng)其磷濃度過低時(shí)反而可能增加蠶豆根尖對(duì)重金屬錳的吸收。其中對(duì)照一組的染色體畸變率達(dá)到 ％，而有絲分裂指數(shù)為 ‰。磷的加入對(duì)重金屬錳的確有修復(fù)效果的。在對(duì)照一組時(shí)平均染色體畸變率為 ％ ，從實(shí)驗(yàn)二組至六組，平均染色體的畸變率是隨著磷濃度的遞減而呈現(xiàn)出由 ％ 、 ％ 、 ％ 、 ％ 至 ％ 的先減后攀枝花學(xué)院本科畢業(yè)設(shè)計(jì)（論文） 結(jié)果與分析 16 增的趨勢(shì)，并且在磷濃度為 ％ 。一個(gè)細(xì)胞內(nèi)可以有一個(gè)染色體發(fā)生斷片，也可以有兩個(gè)以上的染色體發(fā)生 斷片的現(xiàn)象。當(dāng)然也有發(fā)生在后期的染色體粘連現(xiàn)象如圖 (附錄圖 A 九 )所示。由此可知磷在錳的脅迫下，不同濃度的磷可以對(duì)蠶豆根尖有絲分裂產(chǎn)生不同程度的影響，在高濃度磷和低濃度磷都會(huì)抑制細(xì)胞的有絲分裂，使細(xì)胞分裂指數(shù)下降。同時(shí)通過本次研究，根據(jù)相關(guān)數(shù)據(jù)可以知道磷對(duì)該濃度錳的最佳修復(fù)濃度，但是也可以看出磷并不是錳的最佳修復(fù)劑，因此還希望探尋更好的修復(fù)劑。 Soil Pollution,2020,3:301314. 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