freepeople性欧美熟妇, 色戒完整版无删减158分钟hd, 无码精品国产vα在线观看DVD, 丰满少妇伦精品无码专区在线观看,艾栗栗与纹身男宾馆3p50分钟,国产AV片在线观看,黑人与美女高潮,18岁女RAPPERDISSSUBS,国产手机在机看影片

正文內(nèi)容

常用動物模型(ppt100)-經(jīng)營管理(存儲版)

2025-09-25 10:41上一頁面

下一頁面
  

【正文】 紋狀體神經(jīng)元中最主要的神經(jīng)遞質是多巴胺,其含量及代謝產(chǎn)物濃度在活體動物中也易于測出,其特異的多巴胺能神經(jīng)元也可采用組織熒光方法進行檢查。由于癲癇的遺傳及后天因素十分復雜,遠非任何一種動物模型所能代表,故在評價實驗結果時,務必謹慎?,F(xiàn)以大鼠為例進行介紹 。 ? 1. 動物和試劑 成年健康雄性 SD或Wistar大鼠 , 體重 150g。 多數(shù)動物在注射藥物 9~11次后點燃 , 表現(xiàn)為注射藥物后動物出現(xiàn)全身陣攣 強直性發(fā)作 ,以陣攣發(fā)作為主 。 4去氧吡哆醇和異煙肼類物質如磷酸吡哆醛等則依賴酶系抑制劑誘發(fā)痙攣 , 但多為疾走痙攣 。 另一方面 , 用60Hz、 , 刺激誘發(fā)最大發(fā)作 。 目前 , 有關顱腦外傷模型很多 , 缺乏統(tǒng)一的分型 ,此處只介紹本實驗室開展的顱腦背側外傷模型 。 2. 實驗方法 ? ( 1) 用 10%水合氯醛 ( 300mg/kg) 腹腔注射麻醉動物 , 固定于腦立體定位儀上 。 ? ( 5) 消毒 , 縫合皮膚 。 但 Allen氏打擊法尚存在一些技術問題 , 如在挫傷脊髓的瞬間 , 脊柱和脊髓的不穩(wěn)定及脊髓的側向偏移 , 導致脊髓損傷的不對稱 , 損傷區(qū)大小亦不恒定 。 無菌條件下 , 于動物背側正中切開皮膚 ,皮下組織 。 不論創(chuàng)傷程度如何 , 脊髓損傷后灰質在 1~2h內(nèi)迅速出現(xiàn)缺血和梗死 。 切口分層縫合 。 用 %戊巴比妥鈉靜脈麻醉( ) 。本模型可用于脊髓損傷的病理生理機制和實驗性治療研究。 選擇不同重量的砝碼用作打擊物 。 目前 , 較為成熟的脊髓損傷模型有脊髓背側損傷模型 , 脊髓腹側損傷模型 ,脊髓縱向壓縮損傷模型 , 脊髓缺血性損傷模型以及脊髓火器傷損傷模型 。 ? ( 4) 用一定重量砝碼 , 從預定高度沿玻璃管自由落下 , 撞擊撞桿 , 造成顱骨及腦組織損傷 , 傷力以勢能克厘米 ( g ? ( 2) 重力打擊裝置:金屬臺架 , 不同管徑和長度的玻璃管 , 金屬砝碼 、 撞桿 。 ? 一 、 顱腦外傷模型 ? 顱腦外傷可因外力的大小 、 方向 、 速度 、著力點 、 武器的性質 ( 銳性或鈍性 ) 等因素造成不同程度的閉合性或開放性顱腦損傷 , 病情的嚴重程度受傷時病人的體位 、精神狀態(tài)和身體素質等因素也有重要的關系 。 再稍稍提高刺激電壓 ,會引起間歇性發(fā)作 , 這種狀態(tài)僅持續(xù) 5秒左右 , 將其作為最小電刺激 ( EST) 。 印防己毒素和荷花牡丹堿作用于突觸后受體阻斷 γ氨基酪酸作用 , 以此誘發(fā)痙攣 , 臨床表現(xiàn)與戊四氮引起的痙攣非常相似 , 但潛伏期較長 。 ? ( 1) 癲癇行為:急性癲癇模型于注射藥物后1h左右 , 動物即出現(xiàn)流涎 、 胡須抖動 、 動作不協(xié)調(diào)以及發(fā)生全身抽搐 。 ? 三 、 藥物誘發(fā)癲癇模型 ? 馬桑內(nèi)酯可誘發(fā)癲癇模型 , 根據(jù)出現(xiàn)癥狀的遲緩可分為急性癲癇模型和慢性癲癇模型 。 ? 二 、 部分復雜性癲癇模型 ? 目前認為 , 研究腦興奮性 、 可塑性及長時程增強最實用的模型為點燃效應 ( kindling effect) 模型 。由于實驗技術方法及倫理學等因素的限制,迄今研究人類癲癇的發(fā)病機理仍主要依靠動物實驗。 每兩周測一次 , 連續(xù)測試 3~5次 , 每次測試 60min,篩選轉速 300r/h的大鼠作為標準模型 ( PD大鼠 ) 用于實驗 。而且 6OH DA不易透過血腦屏障,在注入動物腦室或腦實質后,能永久或半永久產(chǎn)生作用。 ? 4. 化學物質聯(lián)合作用模型 本模型從多個角度 、 采用多種手段 、 多種化學物質聯(lián)合作用 , 誘導大鼠出現(xiàn)學習記憶障礙和行為改變 , 腦組織免疫組織化學染色可出現(xiàn) APP/βA4陽性細胞 , 出現(xiàn)似 AD樣的改變 。 OA 平均投遞速度177。 注射時間持續(xù) 2min, 留針 5min。 ? 2. 鵝膏蕈氨酸 ( Ibotenic acid, IBA) 損傷模型 應用腦立體定位儀固定大鼠 , 腦基底Meynert核定位坐標為前囟后 , 中線旁開, 顱骨下 。隨著人口老年化趨勢的加重, AD困擾著許多老年人,帶來了嚴重的社會和家庭問題。血管平均收縮 23%,大部分家兔出現(xiàn)了程度不等的神經(jīng)功能障礙,尤以注血后4~5天為重。顱外動脈血管痙攣模型操作簡單,動物存活率高。 應用新鮮的動脈血滴注于實驗動脈表面 ,持續(xù)觀察 4~ 6h, 則可模仿急性期 CVS的表現(xiàn) , 應用腦脊液與新鮮動脈血混合 , 37℃ 孵育 7d, 然后取混合液滴注于實驗動脈表面 , 觀察 4~ 6h, 則可模仿遲發(fā)性 CVS的表現(xiàn) 。 枕大池注血法的缺點是注血部位距生命中樞較近 , 不易造成顱內(nèi)壓增高 。 這些方法的優(yōu)點是近似人類動脈瘤破裂造成的蛛網(wǎng)膜下腔出血 , 缺點是破壞性大 , 且出血量及出血速度難以精確控制 , 可能造成同組動物出現(xiàn)的癥狀不同 , 給實驗結果分析帶來困難 。 SHR的高血壓發(fā)展過程、發(fā)病機制及并發(fā)癥與人類原發(fā)性高血壓有許多相似之處,是一種遺傳性高血壓模型,適合于出血性卒中的研究。膠原酶誘導腦出血模型操作簡單,整個操作過程僅需 20min, 產(chǎn)生的血腫大小基本一致,血腫形成后基本保持恒定,重復性好。 膠原酶是一種金屬蛋白酶 , 可以分解細胞基質及血管基底膜的膠原蛋白 , 腦內(nèi)注射后 20min即可損害腦血管基底膜上的膠原蛋白 。 出血主要好發(fā)部位是覆蓋尾核上的胚胎基質 。 ? ( 二 ) 微氣囊充脹腦出血模型 ? 將微氣囊置于 25號針中 , 經(jīng)立體定向刺入大鼠尾殼核中心 , 穩(wěn)定 30min后 , 在100mmHg壓力下于 20秒內(nèi)充脹微氣囊 , 造成類似腦出血的占位效應 。是人類高血壓腦出血最好發(fā)部位,所以大鼠腦出血模型多定位于尾殼核。 ? 一 、 腦內(nèi)占位模型 ? ( 二 ) 腦內(nèi)直接注血腦出血模型 ? 直接將自體新鮮血液或凝血塊注入動物腦內(nèi) ( 皮質下 、 腦室 、 尾殼核 、 丘腦或基底節(jié) ) 產(chǎn)生實驗性腦出血是多數(shù)研究者用來建立腦出血模型的主要方法 , 其優(yōu)點是可成批制作 , 易于標準化 , 制作簡單 。然后在頸后第一、二頸椎之上切口,暴露第一頸椎兩側翼小孔,用直徑 雙側的翼小孔中燒灼雙側椎動脈,造成永久性閉塞。 但該模型造成的模擬腦梗塞現(xiàn)象與人類腦梗塞的發(fā)生機理差異較大 。 ? ? 2.實驗方法 將家兔或大鼠麻醉,俯臥固定于手術臺上,常規(guī)消毒,采用顱頂部正中切口,暴露顱骨,以冠狀縫后方 縫左側 ,用骨鉆鉆透顱骨,暴露硬腦膜,直徑 ~ 。 Levine和 Payan曾做過該項實驗 , 腦梗死的發(fā)病率為 30%~65%, 其中大部分動物在數(shù)小時至三天內(nèi)死亡 。 ? ④ 蒸餾水沖洗 30秒后 , 置于載玻片上 ,肉眼或顯微鏡下觀察 ( 4倍 ) 。手術時間超過 30min、 術中發(fā)生呼吸困難、出血量過多、術后 2h仍不蘇醒的動物棄用。將插線抽出后 , 恢復了上述返流的血液 , 可達到再灌注的目的 , 即短暫性局灶性腦缺血再灌流模型 ,如不抽線即為永久性局灶性腦缺血模型 。③高血壓狗可存活幾年,在同一狗身上可反復觀察各種藥物的降壓作用。 該鼠自發(fā)性高血壓的變化與人類相似,是目前應用最廣泛的高血壓模型,它可產(chǎn)生腦血栓、梗塞、出血、腎硬化、心肌梗塞和纖維化等變化。 當動物單側腎臟摘除 , 大量給于高濃度鹽水和腎上腺鹽皮質激素時 ,將導致動物體內(nèi)鈉水潴留 。 ? 2. 實驗方法 取 120~150g大鼠 , 麻醉后皮膚消毒 , 沿脊椎中線切開皮膚 , 在一側季肋下 ~2cm和距脊椎 1cm處用小血管鉗分開肌肉 , 用兩指從腹下部將腎臟自創(chuàng)口中擠出 , 將腎臟與周圍組織剝離 , 將自制的雙層乳膠薄膜剪成 “ X”形 , 沿腎門將腎臟交叉包扎 , 然后在對側切開取出另一側腎 ,分離后切除 , 分別縫合肌肉和皮膚創(chuàng)口 。 一、腎動脈狹窄性高血壓模型 ? 1.基本原理 Fahr認為,人腎硬化性高血壓可能是由于腎供血不足引起的, Goldblatt用犬證實了這一假說,并首次介紹了單腎性Goldblatt型高血壓( 1KGH) 和雙腎性高血壓( 2KGH) 模型。 ? 動脈內(nèi)膜有輕度脂質浸潤 。 ? Ⅱ 級:動脈粥樣硬化病變面積 6%~15%( 1/6) 。 ? 內(nèi)膜有廣泛的奶油色或乳白色變化 , 但無凸出表面的粥樣斑塊 。 ? 三 、 評價指標 ? 1. TC的測定 采用中華醫(yī)學會檢驗學推薦酶法 ( CHODPAP) 。 ? 二 、 實驗方法 ? 1. 實驗前 , 以基礎飼料適應性喂養(yǎng)一周 , 穩(wěn)定血脂水平和代謝狀況后 , 隨機分組 。 ? 1. 小型豬誘發(fā)模型 Gottigen系小型豬較為理想 , 用含 1%~2%的高脂食物喂飼 6個月 , 即可復制出動脈粥樣硬化模型 。 ? 三 、 評價指標 ? 1. 血液流變學 全血黏度 、 血漿比黏度 、 紅細胞聚集率增高 , 紅細胞變形能力減低 。 ? 一 、 實驗準備 ? 1. 實驗動物 : 成年健康兔 ( 體重 2500g)或大鼠 ( 體重 250g) , 性別根據(jù)實驗要求而定 , 新購買的動物飼養(yǎng)數(shù)日 , 使其適應環(huán)境 。目前,人們已經(jīng)通過模型動物發(fā)現(xiàn)了許多人類疾病的起因,為研究人類疾病的發(fā)生、發(fā)展、研究開發(fā)新藥和制定防治措施做出了巨大貢獻。 配制成 5%的混懸液 , 過濾除去雜質 。 電鏡下血管內(nèi)皮細胞腫脹 、 微絨毛增多 , 細胞漿內(nèi)可見眾多吞飲小泡 。 ? 4.雄性 C57BL/6J小鼠誘發(fā)模型 在普通飼料中加 5%膽固醇、 2%膽酸鈉、 30%可可脂,喂養(yǎng) 25周,全部小鼠在主動脈弓和近端冠狀動脈內(nèi)發(fā)生脂質斑塊。 ? 3. 第 42天夜間所有動物禁食不禁水 12h, 于次日晨各組動物稱定體重 , 自耳中央動脈采血 2ml, 測定血清 TC, HDLC及 LDLC含量 , 并計算 LDLC/HDLC。以內(nèi)膜最厚處為中心,測量該點的內(nèi)膜及中膜的厚度,計算比值。 ? 3級 大小不等的粥樣斑塊融合成片 , 大的斑塊可超過3mm2。 ? Ⅴ 級:動脈粥樣硬化病變面積 50%( 1/2) 。 ? 3級 動脈內(nèi)膜粥樣斑塊占血管腔面積的 1/2以上 。將動物麻醉后俯臥位固定,從脊柱旁皮膚切口,分離皮下組織腰背筋膜,切開內(nèi)斜肌筋膜,推開背長肌,暴露腎并小心地鈍性分離出一段腎動脈。 ? 2. 實驗方法 應激源大約有二類 。 ? ? 2.實驗方法 除特殊要求外,多數(shù)都用大鼠進行實驗,特別是體重在 100~150g之間的雌性大鼠感受性最高。 SHRSR是抗腦出血和腦栓塞的自發(fā)性高血壓大鼠 。 根據(jù)缺血的部位不同可分為全腦缺血和局灶性缺血/再灌流模型 , 根據(jù)缺血 /再灌流的時間不同分為短暫性和永久性缺血模型 , 根據(jù)制備方法可分為開顱性和不開顱性兩大類 。 分離并電凝 ECA的甲狀腺上動脈和枕動脈分支 , 小心處理 ICA的翼腭動脈分支 ( 不結扎 ) 。 ? ( 2) TTC染色:即氯化 2,3,5三苯基四氮唑 ( 2 , 3 , 5 triphenyltetrazolium chloride, TTC) 染色 。缺點是動物要求嚴格,體重、鼠齡盡可能一致,健康狀況要好,手術過程中要細致輕柔,以免刺破血管,而且手術時間長,死亡率高。 一旦出現(xiàn)上述癥狀即可確定發(fā)生了腦梗死 , 80%以上的動物在一周內(nèi)死亡 。 照射完畢用牙托粉封閉缺損處的顱骨,消毒,縫合皮膚,即完成動物模型的制備。 有人選用碳素顆粒 、塑料顆粒和花生四烯酸鹽等作為栓塞劑制備腦梗塞模型 , 但因與人類卒中差異較大 , 形態(tài)觀察結果有爭議 , 因而應用受到了限制 。 第五節(jié) 腦出血模型 ? 根據(jù)制備方法的差異,腦出血模型大體可分為腦內(nèi)占位模型、人工誘發(fā)腦出血模型、高血壓卒中模型三類。 ? 應用非肝素化自體血 , 可觀察血液凝固過程中血管活性物質釋放對腦循環(huán)及腦組織的影響 ,因而較接近臨床腦出血 , 適合研究腦實質出血的自然過程 、 病理形態(tài)學特點 。因此,以上大鼠腦注血量分別相當于人腦的 20ml、40ml及 80ml的出血量,反應臨床病情不同的嚴重程度。 ? 但自發(fā)性腦出血損害并非單一的占位效應 , 還有來自血腫的血管活性物質釋放所引起的作用 , 如滲入腦組織的血漿成分可能引起炎癥性改變;蛋白水解酶和血紅蛋白氧化作用可能直
點擊復制文檔內(nèi)容
醫(yī)療健康相關推薦
文庫吧 www.dybbs8.com
備案圖鄂ICP備17016276號-1