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毒理學及微生物實驗-免費閱讀

2025-10-12 20:56 上一頁面

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【正文】 還有一點很重要,在科研型實驗室里就不能不說導(dǎo)師和師兄師姐,其實他們才是最具價值的“活文獻”,他們就是實驗室里的參考文獻,活參考書。通過一學期的實驗,我越發(fā)的明白實驗操作對于結(jié)果的重要性。PH: H+影響菌體細胞質(zhì)膜上電荷性質(zhì),微生物吸收物質(zhì)變化,影響代謝,高濃度H+:微生物在等滲溶液中可正常生長繁殖;在高滲溶液中細胞失水,生長受到抑制;在低滲溶液中,細胞吸水膨脹,因為大多數(shù)微生物具有較為堅韌的細胞壁,細胞一般不會裂解,可以正常生長,但低滲溶液中溶質(zhì)含量低,在某些情況下也會影響微生物的生長。雖然實驗結(jié)果不是很理想,但是我參與了過程,通過小組討論我們也分析了失敗的原因,找到了解決的方法,避免了下一次失誤。靜置一段時間待培養(yǎng)基凝固后倒置放入恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)一段時間再取出進行觀察計數(shù)??梢栽诘却傊囵B(yǎng)基冷卻到50攝氏度左右前對待測樣品進行10倍系列稀釋至需要的濃度。讓我重新認識了一下這個名詞:菌落形成單位,我現(xiàn)在的理解就是:1ml或者1g待測樣品中菌落的個數(shù),一定要注意的是單位是CFU/ml或CFU/g。制片: 用吸管吸取1滴上述菌懸液滴加到干凈的載玻片上,蓋上蓋玻片(注意一定不要有溢出和產(chǎn)生氣泡),將多余菌液用吸水紙吸干。 :利用相應(yīng)公式進行計算(見前面公式或者課本公式),并將實驗結(jié)果填入作業(yè)中的表格內(nèi)。計數(shù)方法:計數(shù)時,通常數(shù)五個(或四個)中方格的總菌數(shù),然后求得每個中方格的平均值,再乘上25或16,就得出一個大方格中的總菌數(shù),然后再換算成lml菌液中的總菌數(shù)。:滴加番紅染色液,水洗后用吸水紙吸干。[指導(dǎo)與訓練方案]無菌倒平板時注意的事項有哪些?平板接種后為什么要倒置培養(yǎng)?通過本次試驗?zāi)銓W到了什么?有什么體會? [實驗項目]實驗六 細菌的單染色與革蘭氏染色 [教學時數(shù)] 3學時[實驗?zāi)康呐c要求]、染色和無菌操作技術(shù)。每種微生物菌落都有其獨有的特點,如大小、顏色、表面干燥或濕潤、隆起或扁平、粗糙或光滑、邊緣整齊或不整齊等。,注意溫度的時間控制,70186。:在液體培養(yǎng)基中加入2%左右的凝固劑的固體狀態(tài)的培養(yǎng)基或農(nóng)副產(chǎn)品培養(yǎng)基。2.了解常見滅菌、清毒基本原理及方法;掌握干熱天菌、高壓蒸汽滅菌及過濾除菌的操作方法。當溫度升至100℃時,關(guān)閉排氣孔。 規(guī)格有50mL、100mL、250mL、500mL。[實驗步驟](一)學習下列常用儀器的種類、規(guī)格和應(yīng)用范圍 由一底一蓋組成一套,常用的培養(yǎng)皿皿底直徑90 mm,高15mm,皿底皿蓋均為玻璃制成。清潔的玻璃器皿是實驗得到正確結(jié)果的先決條件,包扎方法要能保證防止污染雜菌。B菌菌絲呈無色,有分隔,其分生孢子梗經(jīng)過多次分支,產(chǎn)生幾輪對稱或不對稱的小梗,形如掃帚,稱為掃帚體。:用注射器吸取液體培養(yǎng)基于載玻片上,將接種環(huán)在火焰下滅菌,挑取待檢菌放于液體培養(yǎng)基上,待液體培養(yǎng)基將要凝固,但仍有部分呈液體狀時,蓋上蓋玻片,標記好菌種。霉菌的營養(yǎng)體是分支的絲狀體,分為基內(nèi)菌絲和氣生菌絲,氣生菌絲又分化出繁殖菌絲,不同霉菌的繁殖菌絲可以形成不同的孢子。實驗三目的:掌握實驗儀器設(shè)備、器材的使用方法;掌握培養(yǎng)基、試劑的配置與滅菌方法。如受試物在液體中時,以半數(shù)致死濃度(median lethalconcentration,LC50)表示,單位為mg/L。毒理學最早用于評價急性毒性的指標就是死亡,因為死亡是各種化學物共同的、最嚴重的效應(yīng),它易于觀察,不需特殊的檢測設(shè)備。如1/20 LD50組無死亡,但各劑量組死亡呈劑量反應(yīng)關(guān)系,表明有中等蓄積毒性。⑵給藥后各種反應(yīng):死前的現(xiàn)象,各組死亡的只數(shù)等。注射用藥品,應(yīng)以注射途徑染毒,對大小鼠可用靜脈注射,對非嚙齒類可模擬臨床用藥途徑,如狗可用后肢隱靜脈注射,而嚙齒類的尾靜脈和肌肉注射難以多次染毒,必要時可改為皮下注射。經(jīng)呼吸道染毒I 靜式吸入染毒:將一定數(shù)量的嚙齒類動物放在密閉的染毒柜中,加入易揮發(fā)的液態(tài)受試物或氣態(tài)受試物使成一定濃度。頸椎脫臼法:一只手用力住下按住鼠頭,另一只手抓住鼠尾,用頸稍向后上方一拉,使之頸椎脫曰動物立即死亡。[操作方法]選擇的基本原則是:選擇對受試物在代謝、生物化學等與人最接近;自然壽命不太長;易于飼養(yǎng)和操作;經(jīng)濟易獲得。經(jīng)口多次染毒,一般不禁食,但應(yīng)每日定時染毒。另一種是皮膚刺激和致敏試驗。[實驗材料]實驗動物:昆明種小鼠(雌雄各半)實驗藥品:苦味酸酒精飽和液,亞硝酸鈉實驗器材:灌胃器,電子稱等[實驗方法]1預(yù)試驗取小鼠8~10只,以2只為一組分成4~5組,選擇組距較大的一系列劑量,分別按組灌胃染毒亞硝酸鈉溶液,找出引起0%死亡率和100%死亡率劑量的所在范圍。每天灌胃一次,連續(xù)20天。與LD50概念相同的劑量單位還有半數(shù)致死濃度(LC50)和半數(shù)抑制濃度或半數(shù)失能濃度(IC50)。因為劑量—反應(yīng)關(guān)系的“S”型曲線在中段趨于直線,直線中點為50%,故LD50值最具有代表性。最大耐受劑量(maximal tolerance dose,MTD或LD0或LC0):指某實驗總體的一組受試動物中不引起動物死亡的最大劑量微生物檢驗實驗一目的:掌握微生物檢驗工作中常用儀器設(shè)備的工作原理、使用方法、常見故障的排除和一般的維修技術(shù)。真菌中的酵母菌是單細胞微生物,細胞核和細胞質(zhì)有明顯的分化,個體直徑比真菌大10倍左右,多為圓形或卵圓形。1材料和方法 待鑒定的三種真菌A、B、D PDA培養(yǎng)基 懸液、載玻片、蓋玻片、無菌培養(yǎng)皿、濕盒,1mL無菌注射器、生理鹽水、酒精燈等 :將接種環(huán)經(jīng)火焰滅菌冷卻后,取待測的真菌,按照細菌的平板劃線分離法進行平板劃線,即用接種環(huán)從待測培養(yǎng)基上蘸取菌種在平板上劃1/51/4,劃畢灼燒滅菌接種環(huán),待冷卻后,于第二段處再做劃線,且從第一段處引線,劃畢,灼燒滅菌接種環(huán)。D菌在固體培養(yǎng)基上菌落密集,最初呈白色,孢子呈黑色。獸醫(yī)微生物實驗教程胡貴學2006第三篇:微生物實驗教案《微生物學》實驗教學教案[實驗項目] 實驗一 微生物學試驗常用玻璃儀器洗滌及干熱滅菌 [教學時數(shù)]3學時 [實驗?zāi)康呐c要求]1.認識微生物實驗所需要的各種器皿,了解常用工具和儀器的名稱、用途。[實驗材料與設(shè)備]1.培養(yǎng)皿、大試管、三角瓶6只、燒杯(500ml)2只、燒杯(1000ml)1只、小試管6只、吸管( 2支, 2支,1ml 2支,5ml 2支)共8支。 規(guī)格有
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