【正文】 提取液吸光度的表征可 知 ：經(jīng)除雜后的提取液光譜強(qiáng)大有較大的增強(qiáng)，提取液純度有較好的提高。 提取液處理前后的紫外光譜分析 處理后的樣品 光譜見圖 。 回歸方程為： Y=A+exp(x/t1)+Y0 （ 31） 0 1 2 3 4 5 6246810121416182022Temperauure/℃Tim e /h 圖 水的降溫曲線 A= t1= Y0= 17 0 30 60 90 120 15020304050Temperatuer/℃Tim e /m in 圖 水 45℃ 升溫曲線 A= t1= Y0= 根據(jù)上述分析的結(jié)果，確定控溫溫度與要求溫度的差為 2℃ 。 (2)密度梯度離心：也叫區(qū)帶離心，即離心是在具有連續(xù)密度梯度的介質(zhì)中進(jìn)行。 離心分離的基本原理 當(dāng)非均相體系圍繞一 中心軸做旋轉(zhuǎn)運(yùn)動(dòng)時(shí)，運(yùn)動(dòng)物體會(huì)受到離心力的作用，旋轉(zhuǎn)速率越高，運(yùn)動(dòng)物體所受到的離心力越大。 四 是 溶液品質(zhì)。某種油脂最穩(wěn)定晶型的獲 得是由冷卻速度和結(jié)晶溫度決定的 ， 溫差過大的急驟冷卻易形成無法分離的玻璃質(zhì)體 ， 只有緩慢冷卻至一定的結(jié)晶溫度 ， 才能獲得相應(yīng)的晶型 ， 冷卻速率取決于冷卻介質(zhì)與油脂的溫差和傳熱面積。近年來 ， 親和層析技術(shù)被廣泛應(yīng)用于靶標(biāo)蛋白尤其是疫苗的分離純化 ，特別是在融合蛋白的分離純化上 ， 親和層析更是起到了舉足輕重的作用 ， 因?yàn)槿诤系鞍拙哂刑禺愋越Y(jié)合能力 [19]。當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)處于不同的 pH 值條件下 ， 其帶電狀況也 不同。利用等電聚焦技術(shù)分離蛋白質(zhì)混合物是在具有 pH 梯度的介質(zhì)中進(jìn)行的。反膠團(tuán)是當(dāng)表面活性劑在非極性有機(jī)溶劑溶解時(shí)自發(fā)聚集而形成的一種納米尺寸的聚集體。冷乙醇法也是目前 WHO 規(guī) 程和中國(guó)生物制品規(guī)程推薦的方法 ， 不僅分辨率高、提純效果好、可同時(shí)分離多種血漿成分 ， 而且有抑菌、清除和滅病毒的作用。為防止不同分子之間產(chǎn)生共沉淀現(xiàn)象 ， 蛋白質(zhì)樣品的含量一般控制在 %～ %。他們利用堿溶法提取葡萄籽蛋白質(zhì) ， 得到了最佳的提取工藝為 ： 以 511 10 mol L????的 NaOH溶液 ， 按 1∶ 5 的料液比 ， 在 40℃ 攪拌 40 min， 葡萄籽蛋 白質(zhì)提取率達(dá) %。常用的方法有等電點(diǎn)沉淀和 pH 值調(diào)節(jié)、蛋白質(zhì)的鹽溶和鹽析、有機(jī)溶劑法、雙水相萃取法、反膠團(tuán)萃取法等。蔣辰等通過比較不同密度梯度介質(zhì)的分離效果 ， 利用溴化鈉密度梯度得到了高純度的蘇云金芽孢桿菌伴孢晶體蛋白。所以在使用超濾方法時(shí)要選擇合適的濾膜 ， 也可以選擇切向流過濾得到更理想的效果。 蛋白質(zhì)分離純化 方法 (1)根據(jù)分子大小不同進(jìn)行分離純化 蛋白質(zhì)是一種 大分子物質(zhì) ， 并且不同蛋白質(zhì)的分子大小不同 ， 因此可以利用一些較簡(jiǎn)單的方法使蛋白質(zhì)和小分子物質(zhì)分開 ， 并使蛋白質(zhì)混合物也得到分離。一個(gè)姜黃原料可以生產(chǎn)出姜黃油、姜黃素、姜黃油樹脂、姜黃粉、乳化姜黃色素等多種產(chǎn)品 ， 這對(duì)于農(nóng)產(chǎn) 品的深加工以及廢棄物的處理 ， 不失為一個(gè)好方法。在天然色素的發(fā)展方面 ， 應(yīng)當(dāng)進(jìn)一步加強(qiáng)天然色素實(shí)用技術(shù)的研究、開發(fā) ， 這個(gè)課題并不亞于天然色素本身的研究、開發(fā)和生產(chǎn) ， 是我國(guó)天然色素打開國(guó)內(nèi)外市場(chǎng)的關(guān)鍵。采用了高新技術(shù) ， 就是提高設(shè)備的裝備水平 ， 這是提高天然色素的收率 ， 提高產(chǎn)7 量 ， 保證優(yōu)質(zhì)的基礎(chǔ)。 我國(guó)天然 產(chǎn)物 的發(fā)展方針 我國(guó)天然 產(chǎn)物 產(chǎn)業(yè)是改革開放以來 ， 隨著食品工業(yè)的蓬勃發(fā)展而發(fā)展壯大起來的。焦糖色素是一種天然的食品著色劑和天然食用色素。云南的西雙版納、武陵山區(qū)、秦巴山及東北的長(zhǎng)白山為天然色素植物資源較為集中的地區(qū) ， 玉米、紅花、辣椒等品種為我國(guó)發(fā)展天然色素工業(yè)提供了充足的原料。應(yīng)用纖維素酶提取紅花中的紅花黃色素 ， 與傳統(tǒng)水浸提取工藝相比 ， 提取率提高了%%， 具有提取條件溫和 ， 有效成分理化性質(zhì)穩(wěn)定等優(yōu)點(diǎn)。 (6)雙水相萃取技術(shù) (ATPE) 雙水相萃取技術(shù)是二十世紀(jì) 60 年代以來研究開發(fā)的新型固 液分離技術(shù)。 Tsunc 等的專利報(bào)道中 ， 應(yīng)用超臨界 2CO 從蝦殼中提取蝦青素 ， 濃度可達(dá)到 %[9]。相對(duì)而言 ， 有機(jī)溶劑提取法萃取劑便宜 ， 設(shè)備簡(jiǎn)單 ， 操作簡(jiǎn)單易行 ， 提取率較高 ， 但用其提取的某些產(chǎn)品質(zhì)量較差 ， 純度較低 ， 有異味或溶劑殘留 ，影響產(chǎn)品的應(yīng)用范圍。由于生物合成代謝的復(fù)雜 性 ， 許多天然物質(zhì)很難在人工控制下化學(xué)合成 ， 人工合成的方法只能生產(chǎn)極個(gè)別的具有天然 產(chǎn)物 化學(xué)組成和分子結(jié)構(gòu)的物質(zhì)。 Impurity1 引 言 天然產(chǎn)物廣泛存在于多種生物特別是動(dòng)植物體中，其安全性和營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高，有的兼有一定的藥理作用。 天然產(chǎn)物提取液中蛋白質(zhì)和脂肪等 雜質(zhì)的去除試驗(yàn) Remove Test of Protein and Fat and other Impurities from natural product extraction 目錄 摘要 ............................................................................................................................... I Abstract...................................................................................................................... II 引 言 ............................................................................................................................1 第 一 章 緒論 ............................................................................................................2 天然產(chǎn)物的介紹 ...........................................................................................2 我國(guó)天然產(chǎn)物的研究和應(yīng)用現(xiàn)狀 ...............................................................2 天然產(chǎn)物的研究方法 ...................................................................................2 天然產(chǎn)物的提取方法 ...................................................................................2 我國(guó)天然產(chǎn)物的應(yīng)用現(xiàn)狀 ...........................................................................5 天然產(chǎn)物的發(fā)展前景 ...................................................................................5 我國(guó)天然產(chǎn)物的發(fā)展方針 ...........................................................................6 天然產(chǎn)物提取液的精制方法 .......................................................................8 蛋白質(zhì)分離純化方法 ...................................................................................8 冷凍脫脂的原理及影響因素 .....................................................................12 高速離心分離技術(shù) .....................................................................................12 離心分離簡(jiǎn)介 .............................................................................................12 離心分離的基本原理 .................................................................................13 常用離心方法 .............................................................................................13 第 二 章 實(shí)驗(yàn)部分 ................................................................................................14 實(shí)驗(yàn)材料 .....................................................................................................14 儀器和試劑 .................................................................................................14 實(shí)驗(yàn)儀器 .....................................................................................................14 主要試劑 .....................................................................................................14 分析方法 .....................................................................................................14 實(shí)驗(yàn)方法 .....................................................................................................15 粗提取液純化 .............................................................................................15 提取液的高效液相色譜分析 .....................................................................15 第 三 章 結(jié)果與討論 ...........................................................................................16 溫度控制條