肝糖原的提取鑒定與定量肝糖原的提取與鑒定-免費(fèi)閱讀
【正文】 ●糖原溶液加碘試劑后呈紅棕色，但與碘試劑原來顏色區(qū)別不大。由于上清液為水溶液，比重大于95%乙醇，溶液分成兩層。這是糖原中葡萄糖長鏈形成的螺旋中，依靠分子間引力吸附碘分子后呈現(xiàn)的顏色。 了解肝糖原提取、糖原和葡萄糖鑒定與蒽酮比色測定糖原含量的原理和注意事項(xiàng)，掌握其操作方法。 二、實(shí)驗(yàn)原理 ●肝糖原的提取 糖原儲存于細(xì)胞內(nèi)，采用淹沒勻漿等方法可使細(xì)胞破碎，低濃度的三氯醋酸能使蛋白質(zhì)變性，破壞肝組織中的酶且沉淀蛋白質(zhì)，而糖原仍穩(wěn)定地保存于上清液中，從而使糖原與蛋白質(zhì)等其他成分分離開來。利用此反應(yīng)與同樣處理的已知葡萄糖含量的標(biāo)準(zhǔn)溶液比色，通過標(biāo)準(zhǔn)對照法即可計(jì)算出樣品中糖原的含量。 糖原水解液中鑒定葡萄糖時(shí)，加班氏試劑不能過量，否則反應(yīng)液呈黑色渾濁，觀察不到應(yīng)有的結(jié)果。 第7頁 共7頁。葡萄糖殘基在20個(gè)以下的會(huì)使碘呈現(xiàn)紅色，2030個(gè)之間使碘呈現(xiàn)紫色，60個(gè)以上的會(huì)使碘呈現(xiàn)藍(lán)色。該物質(zhì)在620nm處有最大吸收。 正確掌握溶液轉(zhuǎn)移的操作。 熟練運(yùn)用溶液混勻的各種方法。cuso4+2naoh=na2so4+cu（oh
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