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肝糖原的提取鑒定與定量肝糖原的提取與鑒定-免費閱讀

2024-09-29 18:15 上一頁面

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【正文】 ●糖原溶液加碘試劑后呈紅棕色,但與碘試劑原來顏色區(qū)別不大。由于上清液為水溶液,比重大于95%乙醇,溶液分成兩層。這是糖原中葡萄糖長鏈形成的螺旋中,依靠分子間引力吸附碘分子后呈現(xiàn)的顏色。 了解肝糖原提取、糖原和葡萄糖鑒定與蒽酮比色測定糖原含量的原理和注意事項,掌握其操作方法。 二、實驗原理 ●肝糖原的提取 糖原儲存于細胞內(nèi),采用淹沒勻漿等方法可使細胞破碎,低濃度的三氯醋酸能使蛋白質變性,破壞肝組織中的酶且沉淀蛋白質,而糖原仍穩(wěn)定地保存于上清液中,從而使糖原與蛋白質等其他成分分離開來。利用此反應與同樣處理的已知葡萄糖含量的標準溶液比色,通過標準對照法即可計算出樣品中糖原的含量。 糖原水解液中鑒定葡萄糖時,加班氏試劑不能過量,否則反應液呈黑色渾濁,觀察不到應有的結果。 第7頁 共7頁。葡萄糖殘基在20個以下的會使碘呈現(xiàn)紅色,2030個之間使碘呈現(xiàn)紫色,60個以上的會使碘呈現(xiàn)藍色。該物質在620nm處有最大吸收。 正確掌握溶液轉移的操作。 熟練運用溶液混勻的各種方法。cuso4+2naoh=na2so4+cu(oh
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