劉寧_dna重組技術(shù)的基本工具-免費閱讀
【正文】 :29:3504:29:35February 26, 2023 1意志堅強的人能把世界放在手中像泥塊一樣任意揉捏。 2023年 2月 上午 4時 29分 :29February 26, 2023 1少年十五二十時，步行奪得胡馬騎。 2023年 2月 26日星期日 4時 29分 35秒 04:29:3526 February 2023 1做前，能夠環(huán)視四周；做時，你只能或者最好沿著以腳為起點的射線向前。 質(zhì)粒是基因工程中最常用的運載體，它的主要特點是 ? ①能自主復(fù)制 ②不能自主復(fù)制 ③結(jié)構(gòu)很小 ④蛋白質(zhì) ⑤環(huán)狀 RNA ⑥ 環(huán)狀 DNA ? ⑦ 能“友好”地“借居” ? A．①③⑤⑦ B．①④⑥ ? C．①③⑥⑦ D．②③⑥⑦ ? 人們常選用的細菌質(zhì)粒分子往往帶有一個抗菌素抗性基因，該抗性基因的主要作用是 ? A . 提高受體細胞在自然環(huán)境中的耐藥性 ? B. 有利于對目的基因是否導(dǎo)入進行檢測 ? C. 增加質(zhì)粒分子的分子量 ? D．便于與外源基因連接 靜夜四無鄰，荒居舊業(yè)貧。 3）通過基因重組構(gòu)建新的 殺蟲劑 ，取代生產(chǎn)過程中耗能多、易造成環(huán)境污染的農(nóng)藥，并試圖通過基因工程 回收和利用工業(yè)廢物 。 生產(chǎn)基因工程藥品 胰島素 —— 治療糖尿病 的 特效藥 。 無表達產(chǎn)物 無表達產(chǎn)物 有表達產(chǎn)物 無表達產(chǎn)物 (四 )目的基因的檢測與鑒定 —— 檢查是否成功 檢測 — 鑒定 —— ①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的 DNA 上是否插入了目的基因 ②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了 mRNA ③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì) 抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等 方法 —— 方法 —— 方法 —— DNA分子雜交 分子雜交 （ DNARNA雜交） 抗原抗體雜交 DNA分子雜交示意圖 采用一定的技術(shù)手段，將兩種生物的 DNA分子的單鏈放在一起，如果這兩個單鏈具有互補的堿基序列，那么，互補的堿基序列就會結(jié)合在一起，形成雜合雙鏈區(qū)；在沒有互補堿基序列的部位，仍然是兩條游離的單鏈。 ① 概念： PCR全稱為 _______________，是一項 在生物 ____復(fù)制 ___________的核酸合成技術(shù) ③條件： _______________________、 _______________、 ___________ (做啟動子 )、 ： ②原理： __________ ④方式：以 _____方式擴增，即 ____（ n為擴增循 環(huán)的次數(shù)） ⑤結(jié)果： 選修 1 P60 聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng) 體外 特定 DNA片段 DNA復(fù)制 已知基因的核苷酸序列 四種脫氧核苷酸 一對引物 DNA聚合酶 指數(shù) 2n 使目的基因的片段在短時間內(nèi)成百萬倍地擴增 (二 )利用 PCR技術(shù)擴增目的基因 _________切割 質(zhì)粒，使其出現(xiàn)一個切 口，露出 ____________。 轉(zhuǎn)錄完畢后， RNA鏈釋放出來，緊接著 RNA聚合酶也從 DNA模板鏈上脫落下來。 多個限制酶切點 ，以便與外源基因連接。 有切割位點 能復(fù)制并帶著插入的目的基因一起復(fù)制 質(zhì)粒 —— 裸露的、結(jié)構(gòu)簡單的、獨立于細菌染色體（即擬核DNA）之外，并具有 自我復(fù)制能力 的很小的雙鏈環(huán)狀 DNA分子。 15 類型 來源 功能 相同點 差別 E 舉例： 黏性末端 黏性末端 EcoRI限制酶的切割 被限制酶切開的 DNA兩條單鏈的切口，帶有幾個 伸出的核苷酸 ， 他們之間正好互補配對，這樣的切口叫 黏性末端 。這就要用到 定向改造生物 的新技術(shù) ——基因工程 又叫做 基因拼接技術(shù) 或 DNA重組技術(shù) 。 SmaI只能識別 CCCGGG序列， 并在 C和 G之間切開。coliDNA連接酶 T4DNA連接酶 大腸桿菌 T4噬菌體 恢復(fù)磷 酸二酯 鍵 只能連接 黏性末端 能連接 黏性末端 和 平末端 (效率較低 ) 閱讀課本第 5頁 “分子縫合針” ——DNA連接酶 的相關(guān)內(nèi)容，填寫下表 自主學(xué)習(xí) DNA連接酶 DNA聚合酶 相同點 作用實質(zhì) 化學(xué)本質(zhì) 不 同 點 模板 作用對象 作用結(jié)果 用途 都能催化形成 磷酸二酯鍵 都是蛋白質(zhì) 不需要 需要 形成完整的重組 DNA分子 形成 DNA的一條鏈 基因工程 DNA復(fù)制 DNA連接酶與 DNA聚合酶的比較
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