免疫組織化學技術-免疫組織化學方法-免費閱讀
【正文】 2023年 2月 10日星期五 上午 11時 23分 13秒 11:23: 1最具挑戰(zhàn)性的挑戰(zhàn)莫過于提升自我。 2023年 2月 10日星期五 11時 23分 13秒 11:23:1310 February 2023 1空山新雨后，天氣晚來秋。 上午 11時 23分 13秒 上午 11時 23分 11:23: 沒有失敗，只有暫時停止成功！。 , February 10, 2023 雨中黃葉樹，燈下白頭人。 固定液不合適或濃度不對，導致固定不佳。 ⑦后按選好的免疫組化染色方法進行染色。 ⑥ PBS沖洗 3次， 2分鐘 /次。 ③自來水洗，蒸餾水洗。 ? 隔水熱抗原修復法： ①切片脫蠟至水。 ④ （ ），于微波爐內(nèi)微波輻射 10分鐘，如檢測 Er和 Pr則需要 20輻射分鐘左右。 ? 顯微鏡觀察拍照 ? IPP軟件分析光密度 抗原修復方法 ? 真空負壓抗原修復法： ①切片脫蠟至水。 ? 待細胞生長達到 60％以上后取出玻片。 組織石蠟包埋 切 片 ? 載玻片的清潔： 市售載玻片需經(jīng)清潔液泡 24h，流水沖洗，系列乙醇浸泡，涼干涂膠，如需開展原位雜交，還需將玻片 240℃ 烤 2h。 （ 6） 經(jīng)過固定的組織能對染料產(chǎn)生不同的親和力而著色清晰，便 于辨認。 免疫組織化學 技術 ? 基本原理 通過免疫學中抗原抗體結合反應，用特異性抗體（單克隆或多克?。z測組織、細胞內(nèi)相應的抗原物質(zhì)，形成抗原 — 抗體復合物；此復合物上帶有事先標記的標記物，通過與標記物相對應的檢測系統(tǒng)，如酶底物顯色反應可使之呈現(xiàn)某種顏色，從而可檢測組織細胞內(nèi)的抗原，以達到診斷、鑒別診斷和研究的目的。 組織材料的固定 ? 固定液的選擇： (1)甲醛固定液： 10％福爾馬林， 10％中性福爾馬林， 10％中 性緩沖福爾馬林 (2)4％多聚甲醛固定液 (3)Bouin S液及改良 Bouin S液 (4)Zenker S液 (5)Zamboni S液 (6)PLP固定液：過碘酸 賴氨酸 多聚甲醛固定液。 ? 切片粘合劑的使用： （ 1）多聚賴氨酸（分子量 300KD）： %濃度。 ? 用 4%的多聚甲醛固定 2h以上。 ② %H2O2甲醇真空負壓處理 5分鐘。 ⑤待修復液降至室溫后， PBS洗 3次，隨后按選好的免疫組織化學的染色方法進行染色。 ② %H2O2甲醇處理切片 10分鐘。 ④將切片放入抗原修復液中于電爐上加熱，不時用溫度計測量溫度，當達 92℃ 后，即可拔離電源，當溫度低于 92℃ 時，再插上電源，如此反復持續(xù)至 10分鐘左右。 ⑦后按選擇好的免疫組化該法進行染色。 注意事項 一、抗體的保存 濃縮抗體：有效期內(nèi)，只需放在
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