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免疫細胞化學與圖像分析-免費閱讀

2025-07-03 22:33 上一頁面

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【正文】 四是帶頭警示行為。二是帶頭接受監(jiān)督?! 〉聡鳯eitz公司制造Leitz ,圖像輸入裝置是一臺Leitz Orthplan顯微鏡,該儀器還包括一臺TU—58雙盒式磁帶機,可用于存貯程序、數(shù)據(jù)、圖像。最使研究工作者感興趣的是該儀器中設有坐標發(fā)生器,能使被檢圖像的坐標數(shù)據(jù)通過臺式計算機在輸出打印機上打印出來。MIAS系列圖像分析儀的軟件系統(tǒng)是在DOS(磁盤操作系統(tǒng)),全部采用C語言和匯編語言(80286宏匯編,TMS340系列專用匯編)進行編程,共98個功能模塊。圖像采集速度:,慢速高精方式2~10秒/幀?! “?、國內(nèi)外生產(chǎn)圖像分析儀的情況簡介 ?。ㄒ唬﹪鴥?nèi)情況  80年代初,以IBM—PC為代表的個人計算機得到了突飛猛進的大發(fā)展和在普及;緊接著各種功能強大面向圖像處理與分析的專用超大規(guī)模(VLSI)蕊片或單板達到商品化水平,兩者的結合,為微機圖像處理系統(tǒng)的問世奠定了硬件基礎。常用的符號如下:  P測試點數(shù)  P1單位測試線長上的交點數(shù)  Pa單位測試面積上的點數(shù)  Pv單位測試體積上的點數(shù)   L測試線長  L1單位測試線長上的截距  La單位測試面積上線的單元長  Lv單位測試體積上線的單元長  A測試面積  S表面積  Aa單位測試面積上被測物的面積  Sv單位測試體積內(nèi)被測物的表面積  V體積  Vv單位測試體積內(nèi)被測物的體積  N被測物數(shù)目  N1 單位測試線長上與被測物相交的數(shù)  NA單位測試線長上與被測物的數(shù)  Nv單位測試體積內(nèi)被測物的數(shù)  用測試網(wǎng)格的體視學方法,楊光等,1987年曾對腹腔神經(jīng)節(jié) 小強熒光細胞進行超微結構的定量分析,測量了線粒體、溶酶體、粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、顆粒小泡的Vv、Sv、Na、Nv等參數(shù),得出了標準小強熒光細胞的計量值?! ◇w積密度(volume density):在單位包容空間內(nèi),某相的體積。  組分(ponent):在結構中能被截然分開而且能被辨認的部分。由此可大致體現(xiàn)我國在此領域的研究現(xiàn)狀?! ∥覈?991年11月出版的“計量學在形態(tài)學研究中應用學術研討會論文集“共收集論文123篇,其中有關免疫細胞化學與計量學結合的論文共8篇:①大鼠燙傷后下丘腦室旁核和視上核內(nèi)AVP含量變化的形態(tài)學計量(第二軍醫(yī)大學張忠義等)用圖像分析儀測定AVP陽性反應物的面積?! cmillan等1983年在第六屆國際體視學會議上曾報告了“用圖像信息處理機客觀評定免疫組織化學染色的組織”,闡明了當組織與第一抗體作用時,不斷攪動血清,明顯提高了免疫反應。在生物組織中,如皮膚的表皮、各種上皮的外表面均可作為水平面,只要與水平面垂直的各個方向所切的切片均為垂直切片。P=d/260=30d。如果某一個細胞的電鏡照片作為參照面,線粒體作為特征物,欲測單位面積電鏡照片內(nèi)線粒體斷面周界線的長度,可用以下公式:  SV=2IL  SV表面積密度2IL交點密度  IL=測線與特征物斷面周界線之間的交叉點數(shù)除以參照面內(nèi)測線總長度。也可將94復印在較大的透明膠片上,可用來測量電鏡照片或光鏡照片,將透明膠片疊加在照片上即可進行測量。  用網(wǎng)格測量的具體操作舉例:圖94為一關聯(lián)方測格,由于測點、測線、測面之間有互相關聯(lián)的關系,故稱為關聯(lián)方測格。③在25個視場內(nèi)取25個點的著色強度進行分級?! ∥?、沒有圖像分析儀可否進行圖像分析?  當沒有圖像分析儀時,研究者早已想到用網(wǎng)格來進行圖像分析,也獲得了客觀的評定結果。原始的參數(shù)可由計算機轉化成容易理解的數(shù)值,例如面積可由某圖形所占像素數(shù)轉化為平方微米,使觀察者容易理解。圖92 示測量框位置,圖中有10個被測物的FCP在測量框內(nèi)  5.陰影校正校正圖像細節(jié) 直到正確無誤并達到能被測量的要求。如果所需相比背景亮,如免疫熒光化學技術的標本,那么亮于上限的東西都被選,例如相的灰度是5~20,5是下限,20是上限,背景灰度大于20,所謂上限既指比灰度20淺的亦即灰度20以下的相被選,而背景是暗于上限的,不被選作測量。圖91為圖像分析儀的簡化圖?! 。ㄈ┟娣e  無論是在光鏡或電鏡免疫細胞化學標本的觀察中,都要涉及有關標本中某些結構的面積問題。光密度在細胞化學反應的定量領域內(nèi)極為有用。彩色有兩種情況:在屏幕上出現(xiàn)與標本一樣的顏色稱為真色(real color),如果將不同的灰度轉換成不同的顏色則稱為假色(pseudo color),應用假色的目的是增強對比度,來改善對細胞結構的視覺識別,同時可增強輪廓用來強調(diào)結構的細節(jié) ?! ∪?、常用的測量方法  (一)灰度  灰度(grey level)指圖像各種分顏色的深淺程度。圖91 圖像分析系統(tǒng)簡圖  有關圖像分析的學術活動,1963年召開了第一屆國際討論會,此后每四年有一次國際學術交流活動。圖像中包含著極其豐富的內(nèi)容,是人們從客觀世界中獲得信息的重要手段,因此,正確地測量和處理圖像已成為測量技術中的重要課題,并廣泛應用于航空遙感測量、金屬圖像測量、微電子技術中微圖形檢測、精密機件尺寸檢測,光波干涉圖、醫(yī)學生物學的研究及應用等有關領域中。所謂反應產(chǎn)物的“量”包括顏色深淺,其所占的長度或面積等,就要借助于圖像分析儀(image analyzer)了。講政治紀律,就是要堅持黨的基本理論、基本路線不動搖,在政治上同黨中央保持一致,保證中央的政令暢通。一是作為領導干部一定要樹立正確的權力觀和科學的發(fā)展觀,權力必須為職工群眾謀利益,絕不能為個人或少數(shù)人謀取私利。黨員必須在行動上服從,決不允許公開發(fā)表同中央的決定相反的言論,決不允許散布同黨的路線方針政策相反的意見,決不允許制造、傳播政治謠言,決不允許有令不行,有禁不止,搞“上有政策,下有對策”?! ∫酝覀儗γ庖呒毎瘜W或一般組織化學光鏡標本的觀察,對反應產(chǎn)物的量常用“+”號表示,一般可分為0~+++,共五個等級,這種方法對差別較大的標本當然還是可以用的,但存在以下三方面的問題:①同一張標本,不同的觀察者可以得到出不同的結論,因為這種分級沒有明確的客觀標準;②即使同一張標本同一個觀察者,間隔若干天后進行再次觀察時,可能結論也不一樣的;③最后一點也是最重要的一點,人的視覺是有一定限制的,用一般觀察法實際上已經(jīng)丟失掉了許多可貴的信息,因為你察覺不到實際上存在的較小的差異。圖像測量將會隨著信息科學和人工智能的發(fā)展而日益顯示其重要作用。1983年在美國召開了第六屆國際學術會議,與會代表約150人。比較高級的圖像分析儀可將灰度分成為256級,也有的只能將灰度分成64級,總之都是2n,24是26256是28。例如,免疫細胞化學中常用的非標記抗體過氧化物酶—抗過氧化物酶法,最終反應產(chǎn)物呈棕色,假設在腦內(nèi)某核團的許多細胞中,呈現(xiàn)出不同深度的棕色,深淺差別較大者顯示在屏幕上人眼還能區(qū)別,若差別小的則不易區(qū)別了,操作者可將灰度11~15用紅色顯示,灰度16~20用藍色顯示、灰度21~25用黃色顯示、灰度26~30用綠色顯示等?;叶仁且环N相對值,因為你可將標本上的灰度隨你編輯分為64級、也可將其分為128級或者256組,而光密度是絕對值。即使是極不規(guī)整的結構,用圖像分析法容易算出其面積?! D像分析儀主要包括輸入(input)、中央信息處理機(central processor)和輸出(output)三大部分。如果相暗于圖像某些部分而又亮于圖像的另一些部分,那就要在二限之間的部分選擇灰度了。所謂陰影(shading)是指人眼看來是
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