【正文】 禽流感主要通過橫向傳播，即通過易感禽類與感染禽類的直接接觸或與病毒污染物的間接接觸而傳播，如被污染的飲水、飛沫、飼料及其他被污染的蛋筐、蛋盤、運輸工具等。 羊瘙癢病 PrPC與 PrPSC的三維結(jié)構(gòu) β折疊 PrPC（正常） PrPSC（致病） 瘋牛病的檢測 ? 根據(jù)臨床癥狀和流行病學(xué)資料可建立初步診斷，確診必須采用腦組織病理學(xué)檢查、 PrPSC檢測（細胞免疫化學(xué)檢查、免疫印跡、組織印跡、ELISA等）及 PrP基因分析。新型克－雅氏癥患者以年輕人為主，發(fā)病時間平均為 14個月。 2022年 12月，美國發(fā)現(xiàn)首例瘋牛病。 ? 盡管歐洲各國紛紛采取預(yù)防措施，但是到了 1989年，瘋牛病還是攻破了英國的近鄰愛爾蘭的大門。 ? 將標(biāo)本加入特異性抗體 HAV血清，經(jīng)孵育后， HAV顆粒與抗血清發(fā)生凝集，再用超速離心加以濃縮，取其免疫復(fù)合物，用磷鎢酸鹽進行染色，于電鏡下檢查 HAV球形顆粒。屬微小 RNA病毒科，新型腸道病毒72型。 （ 4）雜交技術(shù)和逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)（ RTPCR） RTPCR方法是檢測病人排泄物和環(huán)境中樣品的諾瓦科病毒基因的特異手段。 免疫電鏡能使電鏡的靈敏度提高 10100倍。 ? 在 2022年底的一周內(nèi)，日本各地小兒科醫(yī)療機構(gòu)上報的諾瓦克病毒腹瀉人數(shù)，達到了 6萬多人，發(fā)病率超過了有相關(guān) 統(tǒng)計 25年來的歷年最高紀(jì)錄。 ?諾瓦科病毒是直徑 27nm的圓形結(jié)構(gòu)的病毒，無包膜，尚不能在實驗室培養(yǎng)。 ? PCR（對毒力基因 ctxAB、 tcpA進行擴增）。 霍亂弧菌 (Vibrionaceae cholerae) ? 霍亂弧菌是由 O1血清群和 O139血清群引起的烈性消化道傳染病。這種毒素毒性強烈，是一種獨特的神經(jīng)麻痹毒素，即肉毒毒素。 1 ℃ ， 2 4 h 3 6 ℃ 177。其中以 A型引起的食物中毒最多， B和 C型次之。近年來用堿性磷酸酶人工合成的寡核苷酸檢測人工污染的糞便樣品，檢測量為一百萬個菌落形成單位（ CFU)，敏感性和特異性達 100％。基因探針系統(tǒng)采用的是發(fā)光劑標(biāo)記的單鏈 DNA探針，該探針與核糖體 RNA結(jié)合形成穩(wěn)定的 DNA:RNA雜交體。 ② 生化學(xué)、血清學(xué)鑒定 ③ 混雜培養(yǎng)物 對呈混雜的 TSI瓊脂培養(yǎng)物，皆應(yīng)劃線于 MC、HE或 XLD瓊脂上，于 35℃ 培養(yǎng) 24h后，進行重新分離并至少挑取 2個可疑菌落接種到斜面上進行鑒定。 ② 選擇性增菌： 此培養(yǎng)基允許沙門氏菌持續(xù)增菌，同時阻止大多數(shù)其他細菌的增殖。 從食品中分離沙門氏菌樣品制備 ? 由于食品種類繁多，且每類中包括許多品種。 ? 沙門氏菌主要通過食物、飲水經(jīng)口感染。在世界各國各類細菌性的食物中毒中，沙門氏菌常居前列。 1℃ 培養(yǎng) 48177。 2h，觀察產(chǎn)氣情況。 36177。 1C培養(yǎng) 24h時后，取約 2ml培養(yǎng)液，加入 Kovacs氏試劑 2~3滴，輕搖試管，呈紅色為陽性，或先加少量乙醚或二甲苯，搖動試管以提取和濃縮靛基質(zhì)，待其浮于培養(yǎng)液表面后，再沿試管壁徐緩加入 Kovacs氏試劑數(shù)滴，在接觸面呈紅色，即為陽性。 1℃ 培養(yǎng) 48177。 1℃ 培養(yǎng) 48177。 EHEC O157:H7檢驗程序圖解 檢樣 25g ↓ mEC225mL →酶聯(lián)熒光免疫測試 VIDAS快速篩選 ↓41177。從 104， 105， 106稀釋度，各取 TCSMAC平板。 ?我國于 1999年在蘇、皖、魯、豫發(fā)生爆發(fā)流行。 EPEC產(chǎn)生 VT毒素。 腸致病性大腸桿菌（ Enteropathogenic E. coli)。 ?培養(yǎng)溫度為 35186。C。 腸侵襲性大腸桿菌（ Enteroinvasive E. coli)。 VT毒素具有神經(jīng)毒素、細胞毒素和腸毒素性。 腸出血性大腸桿菌 腸出血性大腸桿菌 O157: H7的檢驗方法： 培養(yǎng)基制備 ? 改良 EC新生霉素增菌肉湯 （ mEC）： EC肉湯滅菌后添加 20mg/mL過濾除菌的新生霉素，使終濃度為 20μg/mL。于 36177。 1℃ ， 1824h 104， 105， 106稀釋度涂布 TCSMAC ↓36177。 2h。 2h,觀察試管中是否產(chǎn)氣。 甲基紅（ Methyl Red）試驗 ? 腸桿菌科各菌屬都能發(fā)酵葡萄糖，在分解葡萄糖過程中產(chǎn)生丙酮酸，進一步分解中，由于糖代謝的途徑不同，可產(chǎn)生乳酸，琥珀酸、醋酸和甲酸等大量酸性產(chǎn)物，可使培養(yǎng)基 PH值下降至 ，使甲基紅指示劑變紅。 1℃ 培養(yǎng) 48177。 ? 報告：根據(jù)證實為大腸桿菌陽性的管數(shù)，查 MPN表，報告每100ml（ g）大腸菌群的 MPN值。 2h，觀察是否產(chǎn)氣。因此，沙門氏菌的檢測是各國檢驗機構(gòu)對多種進出口食品的必檢項目之一。根據(jù)侵入機體沙門氏菌菌種的不同，在臨床上引起四種不同的疾病。因其加工方式不同，導(dǎo)致性狀各異。 ③ 選擇性平板分離： 采用固體選擇培養(yǎng)基，抑制非沙門氏菌的生長，提供肉眼可見的疑似沙門氏菌純菌落的識別。 ④ 純培養(yǎng)物 將每個可疑陽性的 TSI瓊脂斜面培養(yǎng)物，分別接種于尿素肉湯中， 35℃ 培養(yǎng) 24h，獲取多量的瓊脂斜面培養(yǎng)物接種于快速尿素肉湯中，于 37℃ 水浴培養(yǎng) 2h。選擇試劑將未雜交和雜交探針分開。 此方法只在臨床檢測中應(yīng)用，尚未用于食品檢測。腸毒素是一種可溶性蛋白質(zhì)純化的腸毒素，能耐高溫。 1 ℃ ， 2 4 h 3 6 ℃ 177。該毒素性質(zhì)穩(wěn)定，是目前已知化學(xué)毒物和生物毒素中毒性最強烈者，對人的致死劑量為 0. 1ug。該病傳播快 , 波及面廣，是屬于國際檢疫的傳染病。 致病性弧菌的檢測方法 具有代表性檢驗方法簡介 （ 1） FDA的細菌學(xué)分析手冊 霍亂、付弧、創(chuàng)傷弧菌和其他弧菌（ 1995 1998修訂）分別著重介紹了霍亂弧菌、副溶血弧菌、創(chuàng)傷弧菌的方法。 ? Norwalk病毒是最重要的引起腹瀉的腸道病毒。根據(jù)推算，日本境內(nèi)已經(jīng)有超過 300萬人感染諾瓦克病毒。在顯微鏡下包被康復(fù)病人的血清。這個方法的靈敏度為 102～104病毒顆粒 /mL排泄物。人類感染 HAV后，大多表現(xiàn)為亞臨床或隱性感染，僅少數(shù)人表現(xiàn)為急性甲型肝炎。 （ 2）固相放射免疫測定法 ? 將放射性同位素與免疫化學(xué)相結(jié)合的體外測定超微量物質(zhì)的實驗方法，具有同位素技術(shù)的高靈敏性、準(zhǔn)確性的優(yōu)點，同時又兼有抗原抗體反應(yīng)的專一性。瑞士和法國1990年也各自發(fā)現(xiàn)了第一例瘋牛病。不到 20年工夫，瘋牛病就已擴散到了歐洲、美洲和亞洲的幾十個國家。截至 2022年底累計已有至少 137人死于新型克雅氏癥，其中多數(shù)在英國。 ? 1998年愛爾蘭報道了