【正文】 谷氨酸濃度216。 分為：提取和精制216。光密度：殘?zhí)牵海ヒ韵? 無菌檢查：()噬菌體檢查：()(雙層平板法、劃線法、液體培養(yǎng)法）鏡檢：菌體生長均勻、粗壯，排列整齊革蘭氏陽性反應(yīng)。 控制關(guān)鍵：生物素亞適量（510μg/L）216。l 帶式干燥機(jī)l 粉碎和篩分。 糖化車間216。216。n 國內(nèi)一般的流程是發(fā)酵液過濾后用離子交換柱提取，氨水洗脫后用陽離子交換柱轉(zhuǎn)型，經(jīng)脫色和除雜質(zhì)后濃縮和結(jié)晶.n 電滲析法提取葡萄糖糖蜜發(fā)酵液的工藝流程如圖4所示．發(fā)酵液（pH=～）經(jīng)過濾預(yù)處理后，用電滲析器分離，并濃縮2倍，這種粗提取液再利用活性炭和離子交換除去色素和雜質(zhì)離子，得到淡黃色、高純度檸檬酸水溶液 在檸檬酸提取中使用超濾、納濾和微濾l 氨基酸發(fā)酵的特點216。通過陽離于交換柱可除去Ca2+、Fe2+等陽離子，最常用的陽離子交換樹脂是732樹脂，檸檬酸被進(jìn)入陽離子交換往后應(yīng)控制一定流速并定時用黃血鹽和酒精分別檢測流出液中有無Fe2+和Ca2+ ，若出現(xiàn)Fe2+或Ca2+則應(yīng)立即停止進(jìn)料。除檸檬酸外，還包括菌體、殘?zhí)?、蛋白質(zhì)、色素、膠體、有機(jī)雜酸、無機(jī)鹽等多種雜質(zhì)，總的來說，它們來源于原材料、未消耗的營養(yǎng)鹽或發(fā)酵的中間副產(chǎn)物，所以從檸檬酸發(fā)酵液中提取檸檬酸是比較困難的。糖蜜是甘蔗或甜菜制糖后的剩余物，除含有豐富的糖分外，還含有大量的金屬離子以及硫胺素、核黃素等生長因子。工業(yè)生產(chǎn)方法主要有深層液體發(fā)酵法、淺盤液體法以及固體原料的淺層制曲或厚層通風(fēng)制曲法。4. 細(xì)胞內(nèi)有較高水平的氨基酸、NH4+，即NH4+庫水平高。n 標(biāo)準(zhǔn)呼吸鏈的存在使得菌體在代謝過程中產(chǎn)生了大量的ATP，用于菌體自身的生長上，這種現(xiàn)象，在生產(chǎn)上通常稱之為：只長菌不產(chǎn)酸 ，大量的葡萄糖被消耗了，卻沒有生產(chǎn)出檸檬酸，是一種失敗，（大型檸檬酸生產(chǎn)企業(yè)需要自己備用的發(fā)電系統(tǒng)）。 207。黑曲霉之所以能在特定環(huán)境條件下累積檸檬酸，是因為在這種環(huán)境條件下代謝途徑前段的運(yùn)轉(zhuǎn)速率大于后段的運(yùn)轉(zhuǎn)速率。 n 生物發(fā)酵法：q 表面發(fā)酵法：又稱淺層發(fā)酵法，多以甜菜糖蜜為原料。o 選育抗色氨酸結(jié)構(gòu)類似物突變株。交換基團(tuán)(由能起交換作用的陽(陰)離子（Ｈ＋）和與交換樹脂本體聯(lián)結(jié)在一起的陰(陽)離子（SO3）兩部分組成（磺酸基）。6菌體7殘?zhí)?L－谷氨酰胺9雜菌和噬菌體10水解糖液質(zhì)量11不同谷氨酸產(chǎn)生菌種對谷氨酸結(jié)晶晶型的影響12玉米漿膠體過多時對結(jié)晶的影響13某些氨基酸、多肽類物質(zhì)及雜質(zhì)的影響：Ｌ－天冬氨酸、Ｌ－苯丙氨酸，Ｌ－酪氨酸，Ｌ－亮氨酸及Ｌ－胱氨酸能促進(jìn)а－晶型的生成。影響谷氨酸晶型的主要因素1谷氨酸含量（4－8%）室溫自然冷卻條件下，隨溶液谷氨酸含量升高， β晶型增多，水分增加，母液難分離。（發(fā)醇醪中谷氨酸含量為5%左右）水解等電點法低溫等電點法一次冷凍等電點法提取工藝，收率達(dá)78－82%%左右。降低發(fā)酵糖濃度，連續(xù)流加糖發(fā)酵降低發(fā)酵糖濃度，可降低滲透壓，有利于菌體生長和代謝產(chǎn)物的排泄。 對應(yīng)的酶在稍高溫度下易失活224。流加糖發(fā)酵初糖8%，接種量10%，；發(fā)酵810h，當(dāng)殘?zhí)墙抵粒矗r，開始流加含糖50%的甘蔗糖蜜，至總糖濃度達(dá)20%（發(fā)酵時的糖濃度始終保持在4%左右），產(chǎn)酸10%以上，轉(zhuǎn)化率50%55%，發(fā)酵周期30h左右。加入劑量為35U/mL。風(fēng)量控制：采用梯形通風(fēng)控制，分3級或4級提風(fēng)，達(dá)最高風(fēng)量后維持10h，再分3級4級降風(fēng)。甜菜糖蜜添加吐溫發(fā)酵工藝工藝特點：高生物素、大接種量、添加表面活性劑(吐溫60)，產(chǎn)谷氨酸高、轉(zhuǎn)化率高。操作：通氣、攪拌泡沫的穩(wěn)定性取決于液體表面張力，粘度。培養(yǎng)基濃度大，氧的傳遞阻力大，需要增加供氧。這類氨基酸經(jīng)過乙醛酸循環(huán)和磷酸烯醇式丙酮酸羧化系統(tǒng)兩個途徑形成的，產(chǎn)生的NADH量最多。液氨或氨水添加法(主流)作用快而明顯易于實現(xiàn)連續(xù)自動流加。溫度對谷氨酸發(fā)酵的影響酶活改變生物合成途徑，使代謝產(chǎn)物發(fā)生變化改變發(fā)酵液物理性質(zhì)影響菌種對營養(yǎng)物的分解與吸收不同微生物的最適生長溫度不同同一種微生物，菌體生長和產(chǎn)物合成的最適溫度不一定相同pH對谷氨酸發(fā)酵的影響酶的活性影響微生物細(xì)胞膜所帶電荷，改變細(xì)胞膜的滲透性影響物質(zhì)分解速率，影響微生物對培養(yǎng)基物質(zhì)的吸收利用改變菌體代謝途徑，使代謝產(chǎn)物發(fā)生變化。G+對鎂離子最低要求量是25ppm。但添加碳酸鈣易形成污染，生產(chǎn)上一般不用此法。谷氨酸發(fā)酵氮源（碳氮比為100：15－30）比其它發(fā)酵工業(yè)（碳氮比為100：－）高。發(fā)酵培養(yǎng)基對谷氨酸發(fā)酵的影響斜面菌種的培養(yǎng)目的：純菌生長繁殖措施：多含有機(jī)氮，不含或少含糖一級種子培養(yǎng)目的：大量繁殖活力強(qiáng)的菌體措施：少含糖分，多含有機(jī)氮，培養(yǎng)條件有利于長菌。斜面菌種不宜多次移接，一般只移接三次。乙酸減少224。無芽孢。胞內(nèi)有橫隔。 G+。消耗：我國谷氨酸發(fā)酵糧耗平均在3t左右，國外為2t左右?；瘜W(xué)合成法 　　該方法是20世紀(jì)50年代隨著石油化工工業(yè)的發(fā)展而興起，是利用有機(jī)合成和化學(xué)工程相結(jié)合來生產(chǎn)氨基酸。 原輔材料不純、設(shè)備腐蝕而游離出來較多的鐵離子等
Fe2+、 Fe3+64目前國內(nèi)除鐵、鋅離子的方法 .硫化鈉法 .樹脂除鐵65結(jié)晶的過程分三個階段，分別為：形成過飽和溶液、晶核的形成、晶體的長大66起晶的概念及方法。β型晶體和α型晶體 俗稱的輕質(zhì)谷氨酸屬于β型晶體 α型晶體理想結(jié)晶 避免形成β型晶體50離子交換樹脂與這些離子的交換能力各不相同，這主要取決于該離子的相對濃度，以及該離子對交換樹脂的親和力。31谷氨酸發(fā)酵不同階段對PH的要求：、 、 32谷氨酸發(fā)酵時,出現(xiàn)泡沫過多,一般是什么原因,該怎樣處理?原因P92原因 (1)水解糖質(zhì)量不好(2)染菌；處理方法(1)改進(jìn)水解糖質(zhì)量(2)按染菌處理
33谷氨酸發(fā)酵過程，菌體生長緩慢或不長的原因及解決方法？原因(1)感染噬菌體 (2)培養(yǎng)基貧乏(3)菌種老化 (4)前期風(fēng)量過大,或初尿過多抑制生長
處理(1)按感染噬菌體處理(2)補(bǔ)料,并停攪拌(3)換種、補(bǔ)種(4)停攪拌、小通風(fēng)
34谷氨酸發(fā)酵過程，耗糖快,pH偏低, 產(chǎn)酸低原因及解決方法原因(1) 培養(yǎng)基豐富,生物素過量 (2) pH低,流尿不及時(3) 通風(fēng)不足,空氣短路,攪拌轉(zhuǎn)速低(4) 感染雜菌
處理方法(1)提高風(fēng)量,提高pH(2)及時流尿,提高pH(3)提高風(fēng)量,提高pH(4)按染菌處理35谷氨酸生產(chǎn)菌最適生長溫度為？發(fā)酵谷氨酸最適發(fā)酵溫度？最適合生長pH為？P101 P84谷氨酸產(chǎn)生菌：最適生長溫度30~34℃ 最適產(chǎn)酸溫度35~37℃ ~36發(fā)酵過程中CO2迅速下降，說明污染噬菌體， CO2連續(xù)上升，說明污染雜菌37消泡方法有哪幾種？消泡的方法（1）物理消泡 改變溫度（2）機(jī)械消泡：消泡器（3）化學(xué)消泡 加消泡劑 天然油脂類 高碳醇脂肪酸和脂類 聚醚類
39噬菌體侵染的異?，F(xiàn)象 P114 “二高三低”即pH高、殘?zhí)歉摺D值低、溫度低、谷氨酸產(chǎn)量低(1)二級種子污染噬菌體
二級種子03h感染噬菌體，泡沫大，pH高，種子基本不生長；6h以后感染噬菌體，泡沫多，pH偏高，種子生長較差，輕度感染或后期感染長看不出異常變化，可用快速檢測法，半小時之內(nèi)就能確定是否污染噬菌體。（2）由自然界采集樣品，如土壤、水、動植物體等，從中進(jìn)行分離篩選。棒狀桿菌屬、短桿菌屬、小桿菌屬及節(jié)桿菌屬中的細(xì)菌17谷氨酸發(fā)酵生產(chǎn)菌的主要生化特點。谷氨酸發(fā)酵的有機(jī)氮源常用玉米漿、麩皮水解液、豆餅水解液和糖蜜等。1．空氣的凈化（1）減少濾前空氣的塵粒（2）減少濾前空氣的油水含量（3）保證壓縮空氣的溫度（4）妥善裝填過濾介質(zhì)（5）選用高效濾材（6）保持一定的氣流速度（1）合理調(diào)配培養(yǎng)基（2）保證滅菌溫度和時間（3）保證設(shè)備無積污和滲漏（4）保證流動蒸汽質(zhì)量（5）減少泡沫（6）正確進(jìn)行空氣保壓（1）防止軸封滲漏（2）合理安裝罐內(nèi)設(shè)備（3）合理安裝管路（4）閥門的連接（5）管路的布置（6）管路的試漏（7）管路的吹洗（1）嚴(yán)格進(jìn)行斜面和搖瓶菌種的無菌操作（2）嚴(yán)格進(jìn)行種子罐的無菌操作
42污染噬菌體后的挽救措施（1）并罐法（2）菌種輪換或使用抗性菌株（3）放罐重消法（4）罐內(nèi)滅噬菌體法
43提煉的概念P127將谷氨酸生產(chǎn)菌在發(fā)酵過程中積累的L谷氨酸從發(fā)酵液中提取出來，再進(jìn)一步中和，除鐵、脫色、加工精制成谷氨酸單鈉鹽（俗稱味精）的過程稱為谷氨酸的提煉44生產(chǎn)上選擇谷氨酸提取工藝的原則是：工藝簡單、操作方便、所用原材料價格低廉，來源豐富、提取收率高、產(chǎn)品純度高、勞動強(qiáng)度小、盡量不造成或減少環(huán)境污染。生產(chǎn)上要求使用含鹽分少的碳酸鈉或固體氫氧化鈉進(jìn)行中和中和時純堿用量：1mol碳酸鈉可中和2mol谷氨酸，即106g碳酸鈉可中和147*2=，才能達(dá)到谷氨酸完全中和59谷氨酸中和液中色素的來源淀粉制糖、培養(yǎng)基滅菌、發(fā)酵液濃縮等。73味精溶解后渾濁的原因及解決措施（1）產(chǎn)生原因①硫化鈉過量②消泡劑過量 ③含有DL谷氨酸鈉 ④原材料質(zhì)量差
（2）解決措施①中和、結(jié)晶操作規(guī)范 ②控制硫化鈉質(zhì)量和用量③控制消泡劑用量 ④控制原材料質(zhì)量74味精帶有顏色的原因及解決措施產(chǎn)生原因
味精發(fā)黃 料液脫色不徹底，帶有色素；味精分離不干，母液帶入味精，使色素增加；味精干燥溫度過高或過長，引起焦化變質(zhì)；洗活性炭中殘留谷氨酸鈉時，將被吸附的色素解析出來；烘盤布清洗不干凈，出現(xiàn)底層發(fā)黃
味精發(fā)紅 母液除鐵不干凈；母液接觸鐵器或味精將誒出鐵器；活性炭再生不完全，鐵離子沒清除徹底味精發(fā)灰發(fā)青 發(fā)灰：活性炭帶入味精中 發(fā)青：硫化鈉過量
味精久放變黃 料液除鐵不徹底，帶入成品；谷氨酸含殘?zhí)歉撸瑤氤善方鉀Q措施 加強(qiáng)脫色操作；加強(qiáng)結(jié)晶操作，合理控制參數(shù)；加強(qiáng)分離操作；采用振動式干燥器；采用樹脂除鐵；提高谷氨酸質(zhì)量；控制好硫化鈉用量75味精發(fā)臭的原因及解決措施產(chǎn)生原因：室內(nèi)衛(wèi)生差，母液染菌變質(zhì)，帶入味精；活性炭渣子和洗水沒及時處理，導(dǎo)致雜菌繁殖；母液存放時間長或存放母液的容器長時間沒用清洗，雜菌繁殖；全中和操作時泡沫溢出，回收時帶入雜菌；濕谷氨酸堆放時間長，長菌霉變
解決措施 搞好環(huán)境衛(wèi)生；母液和濕谷氨酸及時處理；設(shè)備及時清洗
76強(qiáng)力味精是哪些呈味核苷酸按不同比例與谷氨酸鈉混合制成的添加了5′鳥苷酸、5′肌苷酸，或兩者的混合物77脫敏作用定義經(jīng)特定處理后，不喪失酶活性而失去對變構(gòu)效應(yīng)物的敏感性，稱脫敏作用78酶活性的控制方法終產(chǎn)物的抑制或激活；輔酶水平的活性調(diào)節(jié)；酶原的活化；潛在酶的活化79氨基酸發(fā)酵代謝控制中，酶活性調(diào)節(jié)的類型有哪些？P226變構(gòu)效應(yīng) 共價修飾寡聚酶的解聚、蛋白質(zhì)水解激活等氨基酸生產(chǎn)方法蛋白質(zhì)水解、抽提法 　　以豆粕為原料，采用酸水解大豆蛋白的方法來獲取氨基酸。目前應(yīng)用酶法生產(chǎn)的氨基酸有10多種，如L－丙氨酸、L－色氨酸、L－絲氨酸等。賴氨酸總產(chǎn)量的65%、蛋氨酸的63%和蘇氨酸的55%均為亞太地區(qū)國家所消費(fèi)。 單個、成對及“V”字形排列。 折斷分裂。青霉素誘變育種的基本過程：選擇選擇合適的出發(fā)菌株 制備待處理的菌懸液 誘變處理 篩選 保藏和擴(kuò)大試驗出發(fā)菌株：(1)要有一定的目標(biāo)產(chǎn)物的生產(chǎn)能力(2)對誘變劑敏感(3)生產(chǎn)性能好，如生長快、營養(yǎng)要求低、產(chǎn)孢子多且早，最好是生產(chǎn)上自然選育的菌株。固定CO2的情況：1 乙酰CoA濃度增加，與F16P共同激活PEP羧化酶；2 乙酰CoA氧化，產(chǎn)生的ATP抑制丙酮酸激酶。另一方面，種子培養(yǎng)基應(yīng)盡可能與發(fā)酵培養(yǎng)基接近，以適合發(fā)酵的需要。發(fā)酵糖濃度選擇一般控制在125－150g/L，產(chǎn)酸55－70g/L采用一次高糖發(fā)酵工藝（糖濃度170－190g/L），產(chǎn)酸可達(dá)80g/L。氮源種類及添加方式氮源分類有機(jī)氮（蛋白質(zhì)、胨、氨基酸等，谷氨酸發(fā)酵的有機(jī)氮源常用玉米漿、麩皮水解液、米糠水解液、豆餅水解液和糖蜜等）無機(jī)氮（尿素、液氨、氨水、碳酸氫銨、硫酸銨、氯化銨和硝酸銨等）菌體利用無機(jī)氮比有機(jī)氮快速，銨鹽、尿素、氨水等比硝基氮優(yōu)越，因為硝基氮需先經(jīng)過還原才能被利用。2. 硫酸鎂功能葉綠素的組成成分。,－微量元素微量元素是指微生物需要量十分微小，但又不可完全沒有的元素錳是某些酶的激活劑，羧化反應(yīng)必需錳，如谷氨酸生物合成途徑中，草酰琥珀酸脫羧生成α酮戊二酸是在錳存在下完成的。，在將近放罐時，為了后工序提取谷氨酸。v 不同的代謝途徑產(chǎn)生不同數(shù)量的NAD(P)H，再氧化所需要的溶氧量不同。谷氨酸生成期，在細(xì)胞最大呼吸速率時，谷氨酸產(chǎn)酸量最大。除控制補(bǔ)料速度外，在工業(yè)上，還可采用調(diào)節(jié)溫度(降低培養(yǎng)溫度可提高溶氧濃度)、液化培養(yǎng)基、中間補(bǔ)水、添加表面活性劑等工藝措施，來改善溶氧水平。消泡劑消泡的機(jī)理破泡：降低表面張力抑泡：抑泡劑分子優(yōu)先被吸附，除去發(fā)泡劑的吸附層，使表面粘度局部地方顯著降低。、產(chǎn)酸速率明顯下降；發(fā)酵后期，OD值下降，菌體發(fā)生自溶。發(fā)酵控制劑：，添加35U/mL青霉素之后，視OD值凈增、菌體有否變形、耗糖等情況，考慮是否需再補(bǔ)加一次或兩次青霉素添加青毒素的時間與量青霉素必須在細(xì)胞對數(shù)生長期的早期加入，確保在加入青霉素后，菌體培增，由長菌型細(xì)胞向產(chǎn)酸型細(xì)胞轉(zhuǎn)化。最高風(fēng)量比一次糖發(fā)酵法高50%100%.溫度控制開始控制溫度3032℃，之后每隔56h升一度。 蒸汽間接殺菌224。缺點及解決措施：糖濃度高，滲透壓大，菌體不適應(yīng)。谷氨酸的提取發(fā)酵液中不僅有目的產(chǎn)物谷氨酸，還有菌體、殘?zhí)?、色素、膠體物質(zhì)及其他副產(chǎn)物工藝選擇原則：簡單、操作方便、原料價格低廉、來源豐富、產(chǎn)品純度高、勞動強(qiáng)度小、設(shè)備簡單、造價低、盡量不造成或減少對環(huán)境的污染　谷氨酸發(fā)酵液的性質(zhì)發(fā)酵液呈淺黃色漿體、表面