微生物發(fā)酵產(chǎn)酶-免費閱讀
【正文】 （四）其他提高酶產(chǎn)量的方法 添加細胞滲漏增強物： 如吐溫（ Tween）、催通（ Triton）等。 ?消泡方法： 機械消泡、化學(xué)消泡。反之，加 尿素或液氨 ； ① pH值還與通氣量有關(guān)。 （ 3）溫度的控制方法 一般采用熱水升溫，冷水降溫。 水 配制培養(yǎng)基的注意事項 ： （ 1）培養(yǎng)基的 碳氮比 是培養(yǎng)基成分配比的重點； （ 2）碳源和氮源的選擇，要注意避免 碳分解代謝阻遏 和 氮分解代謝阻遏 ； （ 3）培養(yǎng)基中無機鹽的選擇要注意鹽類引起的 生理酸堿性反應(yīng) ； （ 4）發(fā)酵生產(chǎn)所用的培養(yǎng)基成分配比 不可輕易改變 。 注意 ：在選擇碳源時，應(yīng)盡量選擇對所需酶有誘導(dǎo)作用的碳源，而不使用或少使用有分解代謝物阻遏作用的碳源。 （ 2 ）擴大培養(yǎng) 目的： 活化后的菌種經(jīng)過一級至數(shù)級的擴大培養(yǎng)，以獲得 足夠數(shù)量 的 優(yōu)質(zhì) 細胞。 產(chǎn) ?淀粉酶菌株的篩選 產(chǎn)蛋白 酶菌株的篩選 （ 3）復(fù)篩：從所得菌株中篩選優(yōu)良株； 在初篩的基礎(chǔ)上，篩選產(chǎn)酶量高、性能更符合生產(chǎn)要求的菌種。 根霉 (Rhizopus) ? 根霉因有假根（ Rhizoid）而得名（假根的功能是在培養(yǎng)基上固著，并吸收營養(yǎng)）。 (一 )生活習(xí)性 青霉通常在柑桔及其他水果上 ,冷藏的干酪及被它們的孢子污染的其他食物上均可找到 ,其分生孢子在土壤內(nèi) ,空氣中及腐爛的物質(zhì)上到處存在，青霉?fàn)I腐生生活。菌絲體常呈白色、褐色、灰色，或呈鮮艷的顏色，有的可產(chǎn)生色素使基質(zhì)著色（如赤霉菌等）。一方面 ,放線菌的細胞構(gòu)造和細胞壁的化學(xué)組成與細菌相似 ,與細菌同屬原核生物 。常在工業(yè)生產(chǎn)中應(yīng)用于生產(chǎn) 谷氨酸脫羧酶、天冬氨酸酶、限制性核酸內(nèi)切酶 等。 改造 非理想模式：在細胞選育上下功夫，并適當(dāng)調(diào)節(jié)工藝條件： （ 1）同步合成型： 適當(dāng)降低發(fā)酵溫度，盡量 提高 酶所對應(yīng)的 mRNA的穩(wěn)定性 。 時間 (h) 濃度 酶濃度 細胞濃度 屬于滯后合成型的酶，之所以要在細胞生長一段時間甚至進入平衡期以后才開始合成，主要原因是 由于受到培養(yǎng)基中存在的阻遏物的阻遏作用。 （ 2）該酶對應(yīng)的 mRNA不穩(wěn)定 。 （ 2）分解代謝物阻遏 是指某些物質(zhì)經(jīng)過分解代謝產(chǎn)生的物質(zhì)阻遏其他酶合成的現(xiàn)象。 啟動基因（ P）（啟動子）： 有兩個位點： （ 1） RNA聚合酶的結(jié)合位點 （ 2） cAMPCAP的結(jié)合位點。 液體深層發(fā)酵 （ 目前酶發(fā)酵生產(chǎn)的主要方式 ） 液體培養(yǎng)基，經(jīng)滅菌、冷卻后，接入產(chǎn)酶細胞，在一定條件下發(fā)酵。 重點： ?酶生物合成的基本理論； ?微生物發(fā)酵產(chǎn)酶工藝 。 酶發(fā)酵生產(chǎn)的類型 固體培養(yǎng)發(fā)酵 ：主要適于各種霉菌的發(fā)酵產(chǎn)酶 培養(yǎng)基以麩皮、米糠等為主要原料，經(jīng)滅菌后，接入產(chǎn)酶菌株，在一定條件下發(fā)酵。 意義： 通過阻止酶的過量合成，節(jié)約生物合成的原料和能量。 誘導(dǎo)物一般是酶催化作用的底物或其底物類似物。 （ 2）生長至平衡期后，酶濃度不再增長，說明 mRNA很不穩(wěn)定 。 許多水解酶的生物合成都屬于這一類型。 （ 1） 不受 培養(yǎng)基中某種物質(zhì) 阻遏 時，可隨著細胞生長而開始合成； 受阻遏的酶 ，要在細胞生長一段時間或進入平衡期后，解除阻遏，酶才開始合成。 大多數(shù)大腸桿菌是無害，但也有些大腸桿菌是致病的，會引起腹瀉和尿路感染。生產(chǎn)淀粉酶、蛋白酶、5’ 核苷酸酶。構(gòu)成霉菌菌（個）體的基本單位稱為菌絲（ hyphae），呈長管狀，可不斷自前端生長并分支。 紅曲霉（ Monascus） 生產(chǎn) α淀粉酶、糖化酶、麥芽糖酶、蛋白酶等。在木質(zhì)素、纖維素豐富的基質(zhì)上生長快，傳播蔓延迅速。 （二 ）生產(chǎn)菌種的來源 向菌種中心購買或索取。 發(fā)酵產(chǎn)酶的一般工藝流程 [原 料 ] [ 原始菌種 ] [ 麩皮等原料 ] ↓ ↓ 餅粕等原料 淀粉質(zhì)原料 試管斜面培養(yǎng) (活化 ) [ 配制培養(yǎng)基 ] ↓ ↓ ↓ (滅菌 ) 按不同原料 凈化 、 粉碎 搖瓶等分級擴大培養(yǎng) 作不同處理 ↓ ↓ 水解 種子罐培養(yǎng) ↓ ↓ [ 淀粉糖液 ] [ 發(fā)酵罐 (液體發(fā)酵 ) ] [ 發(fā)酵池 (固體發(fā)酵 ) ]
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