放線菌抗生素的發(fā)酵及目的產(chǎn)物的提取實(shí)驗(yàn)報(bào)告-免費(fèi)閱讀
【正文】 滴加完畢，用陶瓦蓋覆蓋雙碟，平穩(wěn)置于雙碟托盤內(nèi)，雙碟疊放不可超過(guò)3個(gè)，避免受熱不均，影響抑菌圈大小，以水平位置平穩(wěn)移入35~37℃恒溫培養(yǎng)室，培養(yǎng)至所需時(shí)間。標(biāo)準(zhǔn)品與供試品高低濃度之比為2:1或4:1，但所選用的濃度必須在劑量反應(yīng)直線范圍內(nèi)。 吸取中和液100 μL 加入牛津杯中，37℃培養(yǎng)16hr，觀察結(jié)果。取2ml發(fā)酵液濾液于三角瓶?jī)?nèi),加蒸餾水10ml,甲基紅指示劑2滴,(中性),加18%中性甲醛溶液4ml,搖勻,靜置10min,加l%酚酞指示劑8滴,。接種后立即進(jìn)行第一次取樣。 提起玻璃罐體及補(bǔ)料瓶放入滅菌鍋，蓋好牛皮紙，蓋好鍋蓋，確定發(fā)酵溫度及時(shí)間。（5）草酸，10 M NaOH四、實(shí)驗(yàn)步驟 ⑴篩選高產(chǎn)放線菌從土壤里篩選出高產(chǎn)放線菌，于斜面培養(yǎng)基中保藏 ⑵接種ml，500ml）、量筒（250ml，500ml，1000ml）、玻璃棒、試紙、塑料漏斗、電爐、接種鏟（針）、振蕩培養(yǎng)箱、恒溫箱、臺(tái)秤、5L發(fā)酵罐，無(wú)菌室、培養(yǎng)皿（直徑9 cm）、陶瓦蓋、鋼管、鋼管放置器、恒溫培養(yǎng)室、滅菌刻度吸管、玻璃容器、稱量管、毛細(xì)滴管、天平、直尺或游標(biāo)卡尺、超凈工作臺(tái)，無(wú)菌培養(yǎng)皿，酒精燈，牛津杯，鑷子，移液器等等（五）.生物效價(jià)測(cè)定所需材料（1）菌種：大腸桿菌（Escherichia coli），菌液濃度約為106個(gè)/mL。?測(cè)殘氮的方法甲醛法 1. 甲基紅：，用95%乙醇定容100ml。如樣品中只含有某一種已知氨基酸，由甲醛滴定的結(jié)果即可算出氨基氮的含量。二劑量法系將抗生素標(biāo)準(zhǔn)品和供試品各稀釋成一定濃度比例（2:1或4:1）的兩種溶液，在同一平板上比較其抗藥活性，再根據(jù)抗生素濃度對(duì)數(shù)和抑菌圈直徑成直線關(guān)系的原理來(lái)計(jì)算供試品效價(jià)。管碟法的基本原理是在含有高度敏感性試驗(yàn)菌的瓊脂平板上放置小鋼管（177。發(fā)酵罐配備有控制器和各種電極，可以自動(dòng)地調(diào)控試驗(yàn)所需要的培養(yǎng)條件，是微生物學(xué)、遺傳工程、醫(yī)藥工業(yè)等科學(xué)研究所必需的設(shè)備。 本原理和操作技術(shù)二、實(shí)驗(yàn)原理 ①發(fā)酵罐是進(jìn)行液體發(fā)酵的特殊設(shè)備。 抗生素的效價(jià)常采用微生物學(xué)方法測(cè)定，它是利用抗生素對(duì)特定的微生物具有抗菌活性的原理來(lái)測(cè)定抗生素效價(jià)的方法，如管碟法。根據(jù)擴(kuò)散定律的推導(dǎo)，抗生素總量的對(duì)數(shù)值與抑菌圈直徑的平方成線性關(guān)系，比較抗生素標(biāo)準(zhǔn)品與檢品的抑菌圈大小，可計(jì)算出抗生素的效價(jià)。 ⑶求出Pr ：Pr = Arθ (式 ) 式中：Pr：供試品實(shí)際單位數(shù)； Ar：供試品標(biāo)示量或估計(jì)單位 ?黃豆餅粉 4g, 淀粉10g, g , , MgSO4 g, CaCO3 , (NH4)2SO4 g, α淀粉酶（105u/ml） . 100ml ?可溶性淀粉 ，NaCl ，KNO3 , K2HPO4 ， ， ， 加蒸餾水至100ml，PH ， 牛肉膏蛋白胨牛肉膏 (），蛋白胨（）， NaCl（5
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