【正文】 存在的問題 搖床對試驗的影響本試驗所使用的恒溫搖床培養(yǎng)箱由于溫度傳感器會隨著使用時間的增長其內(nèi)的水垢會越來越多，最終導(dǎo)致傳感器對溫度的敏感性降低。代入變換公式即得豆粕添加量為 %，初始 pH 值為 ，CaCl 2 添加量為 %。由表 36 可知，方程失擬項不顯著(P=＞)，說明方程不失擬。由表 33 方差分析結(jié)果表明，所得的回歸方程達到顯著(P=)，決定系數(shù)R2=，說明 %的試驗數(shù)據(jù)的變異性可以用此回歸模型來解釋。根據(jù)果糖標(biāo)準(zhǔn)曲線計算還原糖含量。17 個試驗點可以分為兩類，其一是析因點，自變量取值在 XX X3 所構(gòu)成的三維頂點，共有 12 個析因點；其二是零點，為區(qū)域的中心點，零點試驗重復(fù) 5 次，用以估計試驗誤差。 菌種篩選(1)菌種初篩從上述分離得到的菌株中，挑取菌落形態(tài)不同且長勢較好的單菌落于初篩培養(yǎng)基平板中進行劃線，并置于 28℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng) 1d，得到 3040 株菌株，將得到的純化菌株接種于斜面保藏培養(yǎng)基進行保藏，待復(fù)篩篩選高產(chǎn)菌株備用。 研究的目的意義我國在菊粉酶研究和應(yīng)用中的主要困難：產(chǎn)酶成本高，導(dǎo)致應(yīng)用成本高。Pessoa 等人研究了酵母胞外菊粉酶的純化，在離子色譜柱上，對于弱陰離子交換劑 DEAE，最佳吸附 pH 為 ，對于強陰離子交換劑，最佳吸附pH 為 [19]。 菊粉酶的分布不同菌種菊粉酶的分布不一樣，Rottweatlioist 等人報道酵母有 50%酶在胞外。Gupta 等人研究了不同氮源對克魯維酵母(Kluyveromyces waltii)產(chǎn)菊粉酶的影響，發(fā)現(xiàn)以蛋白胨作氮源時產(chǎn)菊粉酶活力最高 [7]。 不同條件對微生物合成菊粉酶的影響(1)碳源的影響菊粉酶通常認為是一種誘導(dǎo)酶。真菌類有黑曲霉(Aspergillus niger)，無花果曲霉() ，米曲霉() ，盛泡曲霉()，青霉菌 (Penicillium)，甜瓜枯萎病菌(Fusarium oxysporum)，高大金孢(Chrysosporium pannorum)等 [19]；酵母類有克魯維酵母(Kluyveromyces waltii)，馬克斯克魯維酵母(K .Marxianus) ，乳酸克魯維酵母 ()，克魯斯假絲酵母(Candidacrusei)等 [23]；細菌類有熒光假單胞菌(Pseudoumonas sp)，丙酮丁醇梭桿菌(Clostridium acetobutylicum)等。 (3)利用菊粉酶生產(chǎn)酒精利用菊粉酶生產(chǎn)酒精，國外相關(guān)研究較多。酸法雖然產(chǎn)量高，但副產(chǎn)物多，色素重，分離精制難 [17]。(3)根據(jù)來源不同可分為微生物菊粉酶和植物菊粉酶。低聚果糖在消化道能促進雙岐桿菌的繁殖，從而抑制病原菌的活動。it enzyme activity is Key words:inulin enzyme；h ighyielding strains；optimal fermentation conditions目錄1 引言 ........................................................................................................................1 菊粉酶概述 .........................................................................................................3 研究現(xiàn)狀 .............................................................................................................6 研究的目的意義 ................................................................................................62 材料與方法 ............................................................................................................7 樣品 ....................................................................................................................7 培養(yǎng)基 ................................................................................................................7 主要試劑 ......................................................7 主要儀 器設(shè)備 .....................................................................................................8 技術(shù)路線及操作要點 .........................................................................................8 技術(shù)路線 ..........................................................................................................8 操作要點 ..........................................................................................................9 研究內(nèi)容 ...........................................................................................................10 菌種分離 ........................................................................................................10 菌種篩選 ........................................................................................................11 發(fā)酵條件優(yōu)化研究 ........................................................................................11 菊粉酶活力的測定方法 ..................................................................................123 試驗結(jié)果與 分析 ..................................................................................................15 菌種分離 ..........................................................................................................15 菌種篩選 ..........................................................................................................15 菌種初篩 .......................................................................................................15 菌種復(fù)篩 .......................................................................................................16 發(fā)酵條件優(yōu)化研究 ..........................................................................................16 PlackettBurmen 試驗 ....................................................................................16 響應(yīng)面優(yōu)化試驗 ...........................................................................................194 討 論 ......................................................................................................................225 結(jié)論 ......................................................................................................................24參考文獻 .................................................................................................................25致謝 .........................................................................................................................27附錄 A 譯文