【正文】 箱內(nèi)備有紫外燈，可消毒操作室內(nèi)空氣。 此法對于一般厭氧微生物適用 。 第三節(jié) 厭氧培養(yǎng) ? 厭氧培養(yǎng)在發(fā)酵工業(yè)研究上是很重要的 ， 發(fā)酵工業(yè)中的制酒等混合發(fā)酵過程有大量厭氧微生物的有益作用 ， 特別是對己酸菌 、 丁酸菌 、 甲烷菌等的研究 。 ? （ 2） 染菌的控制 ? 必須加強接種室的消毒管理工作 ， 定期檢查消毒效果 ， 嚴格無菌操作技術(shù) 。 泡沫 ? （ 1） 泡沫的作用： ? 培養(yǎng)過程中產(chǎn)生的泡沫與微生物的生長和合成酶有關(guān) ， 泡沫的持久存在影響著微生物對氧的吸收； ? 妨礙二氧化碳的排除 ， 因而破壞其生理代謝的正常進行 ， 不利于發(fā)酵； ? 由于泡沫大量生成 ， 致使培養(yǎng)液的容量一般只能等于種子罐容量的一半左右 ， 大大影響了設(shè)備的利用率 ， 甚至發(fā)生跑料 ， 招致染菌 ， 造成巨大損失 。 ? 連續(xù)培養(yǎng)用于廢水處理 、 葡萄糖酸發(fā)酵 、 酒精發(fā)酵等工業(yè)中 。 ④ 分批發(fā)酵法 (間歇發(fā)酵法 ) ? 先將空罐殺菌 ， 培養(yǎng)基裝入發(fā)酵罐 ， 接種之后進行培養(yǎng) ， 在培養(yǎng)過程中 ， 培養(yǎng)基成分減少 ， 微生物增殖 。 菌種先在豐富的培養(yǎng)基上大量繁殖 ， 然后收集菌體濃縮物 ， 洗滌后再轉(zhuǎn)入添加誘導(dǎo)物的產(chǎn)酶培養(yǎng)基 ， 在此期間 ， 菌體積累大量的酶 ，一般不再繁殖 ， 營養(yǎng)成分或誘導(dǎo)物得到充分利用 。 一般從實驗室規(guī)模到工廠生產(chǎn)要經(jīng)過3— 5級放大步驟 。 ? ② 溫度控制：培養(yǎng)基滅菌后 ， 冷卻至培養(yǎng)溫度進行發(fā)酵 ， 由于隨著微生物的增殖和發(fā)酵會發(fā)熱 、 攪拌產(chǎn)熱等 ， 所以為維持溫度恒定 ， 須在夾套中以冷卻水循環(huán)流過 。 ② 防止污染：利用霉菌能在水分較低的基質(zhì)表面進行增殖的特性 ， 在這種條件下 ， 細菌生長不好 ， 因此不易引起細菌污染 。 ? 氧的供給常成為發(fā)酵的限速因素 ， 所以發(fā)酵周期長 ， 占地面積大 。 ? 在靜置和通氣培養(yǎng)兩類方法中又可分為液體培養(yǎng)和固體培養(yǎng)兩大類型 ， 其中每一類型又有表面 培養(yǎng)與深層培養(yǎng)之分 。 ? 接種量的大小直接影響發(fā)酵周期 。 ? 通氣量的多少 ， 最好按氧溶解的多少來決定 。 ? 培養(yǎng)基 pH在發(fā)酵過程中能被菌體代謝所改變 。 ? 機體的重要組成如蛋白質(zhì) 、 核酸等都對溫度較敏感 ， 隨著溫度的增高有可能遭受不可逆的破壞 。 ? (7)根據(jù)經(jīng)濟效益選擇培并基原料 ? 考慮經(jīng)濟節(jié)約 ， 盡量少用或不用主糧 ， 努力節(jié)約用糧 ， 或以其他原料代糧 。 培養(yǎng)基內(nèi) pH可由添加碳酸鈣來調(diào)節(jié) ， 其他如硝酸鈉 、 硫酸銨也可用來調(diào)節(jié) 。 ? （ 3） 最好先選擇一種較好的化學(xué)合成培養(yǎng)基做基礎(chǔ) ， 開始時先做一些搖瓶試驗 。以硫酸鎂加入，但在堿性溶液中會形成沉淀。 ? 當鹽濃度太高時 ， 對微生物生長有抑制作用 ，而在較低濃度 時卻能刺激生長 。 ? （ 2） 滲透 、 分泌 、 排泄等作用都是以水為媒介的； ? （ 3） 水直接參與代謝作用中的許多反應(yīng) 。 ? 玉米漿：是玉米淀粉生產(chǎn)中的副產(chǎn)物，其中固體物含量在 50％。 ? 油和脂肪：在微生物分泌的脂肪酶作用下水解為甘油和脂肪酸，在溶解氧的參與下，氧化成水和 CO2。 葡萄糖： ? 是最易利用的糖，并且作為加速微生物生長的一種有效的糖。如檸檬酸發(fā)酵中鐵 、 錳和鋅離子都能明顯影響產(chǎn)量 ， 鈣離子對細菌淀粉酶的生產(chǎn)有促進作用 ，而鈷離子對葡萄糖異構(gòu)酶的發(fā)酵是必需的 ， 這些在培養(yǎng)基配制時都必須予以注意 。 ? 酶的正常底物或底物的類似物都可作為誘導(dǎo)物 。 這種物質(zhì)不被微生物利用 。 發(fā)酵培養(yǎng)基的設(shè)計和注意事項 ? 1． 提供必要的營養(yǎng)成分：培養(yǎng)基成分必須滿足細胞生長 ， 代謝活動和合成產(chǎn)物所需的基本要求 。 三、發(fā)酵培養(yǎng)基的選擇 ? (1)必須提供合成微生物細胞和發(fā)酵產(chǎn)物的 基本成分 。 ? 2. 種子培養(yǎng)基中各種營養(yǎng)物質(zhì)的濃度不必太高 。 這類培養(yǎng)基主要作用是供給細胞生長繁殖所需的各類營養(yǎng)物質(zhì) 。 ? 在菌種篩選工作和菌種培養(yǎng)工作中 ， 也常用液體培養(yǎng)基進行搖瓶培養(yǎng) ? 微生物在液體培養(yǎng)基中生長的情況有時也可用作鑒定菌種的參考 。 成分精 確 ， 重復(fù)性強 ， 可以減少不能控制的因素 ? 適用于在實驗室范圍作有關(guān)營養(yǎng) 、 代謝 、分類鑒定 、 生物測定及選育菌種 、 遺傳分析等定量研究工作 。 ? 所有發(fā)酵培養(yǎng)基都必須提供微生物生長繁殖和產(chǎn)物合成所需的能源，包括 碳源、氮源、無機元素、生長因子及水、氧氣 等。 ? （ 2） 按物理性質(zhì) ? 固體 ， 液體 ? （ 3） 按用途 ? 選擇性培養(yǎng)基 、 鑒別培養(yǎng)基 、 富集培養(yǎng)基等 ? （ 1） 天然培養(yǎng)基 ? 是采用化學(xué)成分還不清楚或化學(xué)成分還不恒定的各種植物和動物組織或微生物的浸出物 、 水解液等物質(zhì) (例如牛肉膏 、 酵母膏 、 麥芽汁 、蛋白胨等 )制成的 。 ? （ 1） 液體培養(yǎng)基：常用于大規(guī)模的工業(yè)生產(chǎn)及生理代謝等基本理論研究工作 。 ? 鑒別培養(yǎng)基：是根據(jù)微生物能否利用培養(yǎng)基中某種營養(yǎng)成分 ， 借助指示劑的顯色反應(yīng) ， 以鑒別不同種類的微生物 。 2．種子培養(yǎng)基 (包括搖瓶種子和小罐種子培養(yǎng)基 )： ? 培養(yǎng)種子的目的： ? ， 增加細胞數(shù)量； ? 同時也必須培養(yǎng)出強壯 、 健康 、 活性高的細胞 。 對于生產(chǎn)氨基酸等含氮的化合物時 ， 它的發(fā)酵培養(yǎng)基除供給充足的碳源物質(zhì)外 ， 還應(yīng)該添加足夠的銨鹽或尿素等氮素化合物 。 ? (6)原料價格低廉 ， 質(zhì)量穩(wěn)定 ， 取材容易 。 pH的具體控制方法 ? 1. 可以在微生物培養(yǎng)過程中加入酸或堿或流加某些營養(yǎng)物質(zhì)調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的 pH， 但更應(yīng)在配制培養(yǎng)基時考慮所用營養(yǎng)物質(zhì)的組成成分 ， 使其pH值適合該微生物生長或合成代謝產(chǎn)物的需要 。 ? 在發(fā)酵中添加前體物質(zhì)將有利于產(chǎn)物的合成和顯著提高產(chǎn)量 ， 如苯乙酸及其衍生物被認為是青霉素的前體物質(zhì) 。 ? 在培養(yǎng)基配制時必須注意加入有益的抑制劑 ， 而避免混入有害的抑制物 。 ? 脂肪酸如甲酸 、 乙酸 、 丙酸 、 丁酸等低級脂肪酸都可用作碳源 ?？煽朔咸汛x過快的弊病。 ? 氮的來源可分為無機氮和有機氮： ? 有機氮源：花生餅粉、黃豆餅粉、棉子餅粉、玉米漿、玉米蛋白粉、蛋白胨、酵母膏、魚粉、蠶蛹粉、尿素、廢菌絲體和酒糟等。 ? 利用無機氮時應(yīng)注意引起的 pH變化。主要功用是： ? ① 構(gòu)成菌體成分； ? ② 作為酶活性基的組成部分或維持酶的活性； ? ③ 調(diào)節(jié)滲透壓 、 pH值 、 氧化還 原電位等； ? ④ 作為自養(yǎng)菌的能源 。 ? 鈣：培養(yǎng)基中鈣鹽過多時，會形成磷酸鈣沉淀。 ? 工業(yè)生產(chǎn)主要應(yīng)用細菌 、 放線菌 、 酵母菌和霉菌四大類微生物 。 ? 其次再確定各種重要的金屬和非金屬離子對發(fā)酵的影響 ， 即對各種無機元素的營養(yǎng)要求 ， 試驗其最高 、 最低和最適用量 。 工業(yè)生產(chǎn)中也常采用固體原料 ， 如小米 、 大米 、 鐵皮 、馬鈴署等直接制作斜面 ， 或在茄子瓶表面培養(yǎng)霉菌 、 放線菌 。 ? 代用的原料可以是棉籽餅粉 、 玉米漿 、 蠶蛹粉 、雜魚粉 、 黃漿水或麩汁 、 飼料酵母 、 石油酵母 、骨膠 、 菌體 、 酒糟 ， 以及各種食品工業(yè)下腳料等 。 ? 微生物通過其活動也能改變環(huán)境的 pH值 。 ? 不同微生物或同一微生物的不同生長階段對通風(fēng)量的要求也不相同 。