組織培養(yǎng)育苗技術(shù)ppt課件-免費(fèi)閱讀
【正文】 一般需要 20～ 30天轉(zhuǎn)移培養(yǎng)一次 。 四 、 接種 材料的接種必須在無菌條件下進(jìn)行 。 次氯酸鈉能分解產(chǎn)生具有殺菌能力的氯氣而揮發(fā)掉 。 4． 從無菌種子發(fā)芽得到的材料 ：對種子進(jìn)行消毒處理 ， 播種在消過毒的沙子等基質(zhì)上 ， 這樣從長出的幼苗切取材料被污染的機(jī)會(huì)少 ， 有利于進(jìn)行培養(yǎng) 。 2． 較大材料的切取 ；組織培養(yǎng)中較大材料的切取比較簡便 ， 用肉眼就可進(jìn)行 。 2)保藏 隨采隨用最好 ， 如需遠(yuǎn)運(yùn) ， 要注意保濕 、 通氣和保持適宜的溫度 ， 如貯藏 ， 應(yīng)置于低溫冰箱內(nèi) 。 4 滅菌 ：培養(yǎng)基的滅菌采用高壓氣鍋進(jìn)行 ， 在壓力達(dá) /平方厘米左右 ， 保持 1020分鐘即可 。 可用 pH試紙或酸度計(jì)進(jìn)行測試 。再按母液順序 ， 依母液的濃度量取規(guī)定的量加入量筒中 。 玉米素 （ ZT） 先用少量 95%的酒精溶解 ， 再加水定容 。 現(xiàn)以 MS培養(yǎng)基為例加以說明 （ 見表 12） 。 6． MH培養(yǎng)基：該培養(yǎng)基曾用于油棕的胚培養(yǎng) 、 柚的胚乳培養(yǎng)以及桉屬等樹木的生根培養(yǎng) 。 選用瓊脂以色白 、 潔凈的為佳 ， 必要時(shí) ， 可以對瓊脂進(jìn)行預(yù)先浸洗 ， 以減少其中的無機(jī)鹽和可溶性有機(jī)物的含量 。 （ 5） 氨基酸：在組織培養(yǎng)中 ， 常用的氨基酸有甘氨酸以及酰胺類物質(zhì)如谷酰胺 、 天門冬酰胺和多種胺基酸的混合物如水解酪蛋白 、 水解乳蛋白等 。 （ 2） 維生素類：維生素是植物組織培養(yǎng)中經(jīng)常使用的 ，有維生素 C、 B B 生物素 、 煙酸 、 葉酸等 ， 有的外植體 （ 用于組織培養(yǎng)的植物材料 ） 、 愈傷組織會(huì)合成維生素 ， 可以不必添加 。 它作為能源的 ATP合成所不可缺少的 ， 培養(yǎng)基中以 PP4～ 3的形式添加 。 1． 無菌操作室和預(yù)備室 2． 培養(yǎng)室 3． 化學(xué)實(shí)驗(yàn)室： 4． 細(xì)胞學(xué)實(shí)驗(yàn)室 5． 攝影室 6． 滅菌室 二 培養(yǎng)基的制備 （ 一 ） 培養(yǎng)基的成分 培養(yǎng)基的成分主要可以分水 、 無機(jī)鹽 、 有機(jī)化合物 、天然復(fù)合物 、 培養(yǎng)體的支持材料等五大類 。 2 取材植株的個(gè)體發(fā)育狀況 有兩方面的差異：植株的生命周期和年季節(jié)變化 3 常用的外植體：幼胚 、 營養(yǎng)芽 （ 頂芽和側(cè)芽 ） 、 莖段 、葉 、 幼花芽 、 花器等 繼代培養(yǎng)分化潛力的喪失 在繼代培養(yǎng)中發(fā)生內(nèi)在的生理生化變化，對細(xì)胞分化和器官形成有明顯影響。 器官形成途徑 （一） 由外植體上原有的器官原基形成 （二） 由外植體形成的器官原基形成 1 分生細(xì)胞團(tuán)形成 （ 1） 離體的外植體脫分化，形成愈傷組織，在新形 成的愈傷組織或繼代培養(yǎng)的愈傷組織中形成分生細(xì)胞團(tuán)， （ 2）外植體的部分細(xì)胞在重新分裂后直接形成分生細(xì)胞團(tuán)而不經(jīng)過典型的愈傷組織即可形成器官原基 （ 3）分生細(xì)胞團(tuán)可以繼續(xù)形成愈傷組織 2 由分生細(xì)胞團(tuán)分化形成不同的器官原基。 最基本問題是一個(gè)全能細(xì)胞是通過什么方式使其大部分遺傳信息不再表達(dá)即細(xì)胞分化通過什么方式分化的 ， 怎樣選擇性地活化和阻碣 DNA鏈上不同的基因 怎樣激活 DNA鏈上被阻碣的基因 植物細(xì)胞發(fā)育途徑的決定和分化的穩(wěn)定性 細(xì)胞發(fā)育途徑的決定指胚胎細(xì)胞所具有的多種發(fā)育潛能 ， 隨著發(fā)育過程逐漸受到抑制 ， 從而使胚胎細(xì)胞發(fā)生不可逆的特化現(xiàn)象 。 脫分化是其相反的過程 。 這些工作確定了組織培養(yǎng)的基本方法 。 由于繁殖系數(shù)極大 ， 因而 能在短期內(nèi)生產(chǎn)大量苗木 。 組織培養(yǎng)的應(yīng)用 1 無性系快速繁殖： 瀕危植物 ， 名優(yōu)特新產(chǎn)品 。 (二 )生長周期短 、 繁殖率高 由于植物組織培養(yǎng)可以人為控制培養(yǎng)條件 ， 可根據(jù)不同植物不同離體部位的不 同要求而提供不同的培養(yǎng)條件 ， 因此培育幼苗生長快 ，繁殖率高 ， 能及時(shí)提供規(guī)格 整齊一致的優(yōu)質(zhì)種苗 。 植物組織培養(yǎng)發(fā)展 （ 二 ） 1904年 ， 有人首次進(jìn)行蘿卜胚胎培養(yǎng)獲得成功 。早在本世紀(jì) 30年代初期，李繼侗教授就對銀杏的胚進(jìn)行了組織培養(yǎng)研究，羅宗洛教授研究了離體根尖培養(yǎng)的適宜條件 50后代以來，特別是近十幾年來，我國很多科研單位和高等院校都開展了植物組織培養(yǎng)的研究，其中有些科研成果已應(yīng)用在生產(chǎn)上，收到了良好的經(jīng)濟(jì)效益。 細(xì)胞選擇性地活化和阻碣 DNA鏈上不同的基因 ， 導(dǎo)致細(xì)胞形成不同結(jié)構(gòu) ， 引起功能改變或潛在的發(fā)育方式改變 ， 最終使細(xì)胞表現(xiàn)出執(zhí)行特定的功能 。 （ 與動(dòng)物不同點(diǎn) ） 在植物組織培養(yǎng)中 ， 細(xì)胞不易保持其原有的分化狀態(tài) ， 而在不同的培養(yǎng)條件下在形態(tài)發(fā)生方面表現(xiàn)出極大的可塑性 。 （ 2） 溫度 （ 3） 空氣氣流流速 。為了使苗木適應(yīng)移栽環(huán)境 ， 保證移栽的成活 ， 除要求試管苗具有發(fā)育完整 、 良好的根系外 ， 更重要的是正確地移栽和移栽后的科學(xué)管理 。 培養(yǎng)基的成分 （ 二 ） 無機(jī)鹽 2． 無機(jī)鹽 （ 1） 氮：是培養(yǎng)基中大量需要的 。 鐵是用量較多的一種微量元素 ， 鐵在培養(yǎng)基中常以硫酸亞鐵和Na2～ EDTA（ 螯合劑 ） 制成螯合物的形式出現(xiàn) 。 細(xì)胞分裂還能顯著地改變其他激素的作用 。 現(xiàn)在發(fā)現(xiàn) ， 天然復(fù)合物并不是一切組織培養(yǎng)所必需的 ， 但加入以后 ， 可以起到一定的促進(jìn)作用 。 4． ER培養(yǎng)基：曾用此培養(yǎng)基培養(yǎng)大葉相思 ， 但多用于豆科作物的
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