【正文】
DNA合成包括:起始、延伸和終止三個階段 ? 起始 (initiation):涉及一種蛋白質(zhì)復(fù)合物,它識別復(fù)制起始點 (origin)。 stahl用同位素( 15N) 示蹤標記加密度梯度離心技術(shù) 實驗 ,該實驗跟蹤了生長了三代的大腸桿菌, 證明了DNA是采取半保留的方式進行復(fù)制 。 使正超螺旋轉(zhuǎn)化為負超螺旋,每次改變兩個連接數(shù)。 ( 2) 利用 DNA聚合酶 I 進行缺口平移法制備探針的基本原理 DNA聚合酶 I 與缺口平移法制備探針 Nick translation replaces part of a preexisting strand of duplex DNA with newly synthesized material. DNase Ⅰ 真核生物 DNA聚合酶的種類及其功能 真核生物由不同 DNA聚合酶 分別負責(zé)起始和延伸 三種細胞核 DNA復(fù)制酶具有不同的功能 : ? DNA polymerase α 起始新鏈合成 ? DNA polymerase δ 延伸先導(dǎo)鏈 ? DNA polymerase ε 可能與后隨鏈合成有關(guān),也可能具有其他功能 DNA聚合酶所具有的共同結(jié)構(gòu) ? 許多 DNA聚合酶有一個由三個結(jié)構(gòu)域組成的大裂隙,類似于手形。 如 λ 噬菌體:滾環(huán)產(chǎn)生多聚復(fù)制子); (2) 某種蛋白質(zhì)可能會介入,在真正的末端上啟動 。 ? 質(zhì)粒一般 是一個自主環(huán)狀的 DNA基因組,構(gòu)成一個獨立復(fù)制子; ? 原核生物 基因組中一般只含一個復(fù)制子,在唯一的起始點啟動就會引起整個基因組復(fù)制; ? 真核生物 基因組含多個復(fù)制子(一般40100kb/個)。 ? 了解內(nèi)容: ① 基因組復(fù)制與細胞分裂的關(guān)系; ② 復(fù)制叉移動方向的確定;真核生物 DNA聚合酶的種類及各自的功能;③ DNA復(fù)制的調(diào)控。 復(fù)制子是根據(jù)它含有復(fù)制所需的控制元件來定義的,在復(fù)制啟動位點具 起始點( origin),在復(fù)制終止位點具 終點( terminus)。在真核生物中普遍存在。 真核生物染色體可能采用這種方式,在這種情況下, DNA末端的短重復(fù)序列的拷貝數(shù)改變(如端粒的復(fù)制); ( 1)通過將線性復(fù)制子轉(zhuǎn)變?yōu)榄h(huán)狀或多聚分子 The rolling circle replicates DNA Phage λ A rolling circle appears as a circular molecule with a linear tail by electron microscopy. Adenovirus terminal protein binds to the 5` end of DNA and provides a COH end to prime synthesis of a new DNA strand. ( 2) 某種蛋白質(zhì)介入而在真正的末端啟動復(fù)制 Adenovirus DNA replication is initiated separately at the two ends of the molecule and proceeds by strand displacement. ( 3) DNA末端形成特殊結(jié)構(gòu)