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酵母rna的提取及組份鑒定與核酸的定量測定-免費閱讀

2024-11-09 04:00 上一頁面

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【正文】 選擇厚度為 1cm的石英比色杯,在 260nm波長處測定 A值。注意觀察核糖是否變成綠色。棄去上清液。 ? 鉬酸銨-過氯酸沉淀劑:取 70%過氯酸和 ,即成 %鉬酸銨- %過氯酸溶液。該法操作簡便,迅速,并對被測樣品無損,用量也少。稀堿法使用稀堿使酵母細胞裂解,然后用酸中和,除去蛋白質(zhì)和菌體后的上清液用乙醇沉淀 RNA或調(diào) 。 實驗原理 ? 由于 RNA的來源和種類很多,因而提取制備方法也很各異。一般有苯酚法、去污劑法和鹽酸胍法。 ? 酵母含 RNA達 %,而 DNA含量僅為 %,為此,提取 RNA多以酵母為原料。 ε(P) pH7, 260nm 含磷量 /(%) A260nm 1μg/mL RNA 77007800 DNANa鹽 (小牛胸腺) 6600 實驗原理 ? 蛋白質(zhì)也能吸收紫外光。 ? 56%氨水:用 2530%氨水稀釋 5倍。用 95%乙醇洗滌沉淀兩次。 ? 3.磷酸:取水解液 1mL,加定磷試劑 1mL。 四、計算: ? 式中, 為甲管稀釋液在260nm波長處 A值減去乙管稀釋液在 260nm波長處 A
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