20xx年醫(yī)學(xué)專題—第二章-生化制藥基本技術(shù)生化制藥技術(shù)-預(yù)覽頁(yè)
【正文】 頁(yè)，共四十八頁(yè)。 冷凍法預(yù)處理：有些材料要冷凍保存或低溫保存，以便抑制微生物和酶的作用。 動(dòng)物臟器組織：常用絞肉機(jī)機(jī)械法粉碎； 植物肉質(zhì)組織：常用磨碎法； 微生物：常用自溶、冷熱交替、加砂研磨、超聲、加壓等 處理(chǔlǐ)方法。 2.物理法 A、反復(fù)凍融法：把待破碎的樣品冷至20℃15℃ ，使 之凝固，然后緩慢的溶解，如此反復(fù)操作，大部分動(dòng)物性 細(xì)胞及細(xì)胞內(nèi)的顆?？梢云扑椤)和核酸。操作時(shí)注意避免溶液中氣泡的存在。,第九頁(yè)，共四十八頁(yè)。ngzhǐ)外界細(xì)菌的污染。多用于微生物，對(duì)蝸牛(wōni C. 表面活性劑處理法：表面活性劑的分子中，兼有親脂性和親水性基團(tuán)，能降低水的界面張力，具有乳化、分散、增溶作用。qǔ)：也稱抽提、萃取，就是利用一種溶劑對(duì)物質(zhì)的不同溶解度，從化合物中分離出一種或幾種組分的過(guò)程。適用于動(dòng)植物和微生物原料。如胃蛋白酶、酵母(ji224。,四、分離(fēnl237。在高鹽情況下，蛋白質(zhì)不易發(fā)生變化，一般在室溫下操作。,鹽析時(shí)應(yīng)注意的幾個(gè)問(wèn)題： （1）鹽飽和度：由于蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)和性質(zhì)不同，鹽析要求(yāoqi （2）pH 值的選擇：蛋白質(zhì)在pI時(shí)的溶解度最小。選擇適當(dāng)?shù)牡鞍踪|(zhì)濃度，可避免共沉的干擾。 常在04 ℃范圍內(nèi)迅速操作。 有機(jī)溶劑沉淀法 利用不同蛋白質(zhì)在不同濃度的有機(jī)溶劑中的溶解度差異而分離目的蛋白質(zhì)的方法。)的介電常數(shù)，使其溶解度變小，同時(shí)，還破壞蛋白質(zhì)的水化膜而使蛋白質(zhì)沉淀析出。 注：水有較高的介電常數(shù)，具有很好的溶劑性能，是一種廣譜溶劑。,有機(jī)沉淀法應(yīng)注意(zh249。 （2）防止溶劑局部濃度過(guò)高：加入有機(jī)溶劑時(shí)攪拌要均勻，速度要適當(dāng)，避免局部濃度過(guò)高，引起沉淀物的破壞、變性或失活。,第十八頁(yè)，共四十八頁(yè)。n xī)法聯(lián)合使用。在液壓的驅(qū)動(dòng)下，能通過(guò)超濾膜的分離粒子的范圍，一般(yībān)在0.001—0.01μm。,第二十頁(yè)，共四十八頁(yè)。 （3）微孔濾膜：由高分子材料制成的薄膜過(guò)濾介質(zhì)，可以過(guò)濾一般(yībān)介質(zhì)不能截留的細(xì)菌和微粒。用于水的精制、循環(huán)水的凈化、除懸浮固體粒子以及糖液、酶液的精制。zǐ)交換樹(shù)脂在水中能溶脹，溶脹后，其分子中的極性基團(tuán)（活性基團(tuán)），具有可擴(kuò)散的離子(l237。離子(l237。,第二十二頁(yè)，共四十八頁(yè)。在酸性溶液中不發(fā)生交換，pH愈大交換能力愈強(qiáng)。 pH愈低交換能力愈大。 （3）離子濃度：交換速度隨離子濃度的上升而增加，達(dá)到(d225。 （5）樹(shù)脂酸堿性的強(qiáng)弱和溶液的pH：,第二十四頁(yè)，共四十八頁(yè)。 凝膠層析 指化合物隨流動(dòng)相流經(jīng)裝有凝膠的固定相的層析柱時(shí)，因其各種物質(zhì)分子大小不同而被分離的技術(shù)。ng)，凝膠可重復(fù)使用，無(wú)需再生處理。 幾種常用的凝膠： （1）葡聚糖凝膠：基本骨架是16糖苷鍵。 n224。,第二十六頁(yè)，共四十八頁(yè)。 缺點(diǎn)：不耐酸。空隙度以契紙?zhí)堑臐舛葋?lái)改變，化學(xué)穩(wěn)定性不如葡聚糖凝膠。他能分離及萬(wàn)到幾千萬(wàn)相對(duì)分子質(zhì)量的物質(zhì)，彌補(bǔ)了葡聚糖和聚丙烯酰胺凝膠的不足?？赡娼Y(jié)合的特異性物質(zhì)稱為配基，與配基結(jié)合的層析介質(zhì)稱為載體。 缺點(diǎn)：通用性較差，洗脫條件要求苛刻。目前主要用于分離與核酸有關(guān)的物質(zhì)。,（2）瓊脂糖凝膠：用于親和層析的主要為交聯(lián)珠狀凝膠。ng zh224。 注意避免接觸強(qiáng)氧化劑，配基偶聯(lián)后會(huì)使它的網(wǎng)格縮小，在一定程度上限制了它的應(yīng)用。 改良(gǎili225。,第三十一頁(yè)，共四十八頁(yè)。C。,第三十二頁(yè)，共四十八頁(yè)。nɡ suō),濃縮：低濃度溶液通過(guò)除去熔劑邊為高濃度溶液的過(guò)程。)蒸發(fā)器 減壓蒸發(fā)濃縮Decompression evaporation concentration 減壓抽真空（真空濃縮），適用不耐熱的藥物和制品。)中的溶劑分子使溶液(r243。ngy232。吸附劑除去溶劑后可重復(fù)使用。,第三十五頁(yè)，共四十八頁(yè)。蛋白質(zhì)和酶，純度不低于50%。,第三十六頁(yè)，共四十八頁(yè)。)pH在pI附近，有利于晶體析出。 （6）晶種 Crystal seed：不易結(jié)晶的藥物常加晶種。它也是一種蒸發(fā)，但不同于濃縮。但時(shí)間長(zhǎng)，易污染。,第三十八頁(yè)，共四十八頁(yè)。實(shí)驗(yàn)表明：把含水量為80%的1L溶液，噴成直徑約1060 μm霧滴，當(dāng)與熱空氣接觸時(shí)，僅35s可使霧滴水分氣化而得到干燥產(chǎn)品。,（4）冷凍干燥Freezing desiccation：在低溫（ 6010 ℃ ）及高真空6.6740Pa（0.050.3mmHg）下，將物料與溶液中的水分直接升華的干燥方法。設(shè)備投資及維護(hù)費(fèi)用高，生產(chǎn)能力不大。 干熱(ɡ224。滅菌的時(shí)間應(yīng)自全部進(jìn)行滅菌的物品達(dá)到滅菌溫度時(shí)算起。,濕熱滅菌： 常壓滅菌，即在常壓下用100 ℃流通(li,紫外線滅菌：主要用于空氣和物體的表面滅菌。 人體若照射紫外線過(guò)久會(huì)產(chǎn)生眼結(jié)膜炎、紅斑和皮膚變紅等。,過(guò)濾滅菌：通過(guò)適宜的濾器除去藥液中所含的細(xì)菌。滅菌后的藥液進(jìn)行分裝時(shí)，要特別注意防止染菌，應(yīng)進(jìn)行無(wú)菌操作。,第四十四頁(yè)，共四十八頁(yè)。 需要經(jīng)常注意的幾個(gè)問(wèn)題： 生物材料的組成成分復(fù)雜，各種化合物的形狀、大小、相對(duì)分子質(zhì)量和理化性質(zhì)都各不相同，有些還屬于未知。 生物活性物質(zhì)，一旦離開(kāi)了生物體內(nèi)環(huán)境，很易變性。,第四十六頁(yè)，共四十八頁(yè)。ng)總結(jié),第三章 生物制藥的基本技術(shù)。即利用一種特制的膜對(duì)溶液中的各種溶質(zhì)分子進(jìn)行選
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