實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目：黃酮提取(ppt31頁(yè))-預(yù)覽頁(yè)
【正文】 先與亞硝酸鈉發(fā)生氧化還原反應(yīng)， 再加硝酸鋁絡(luò)合，最后加氫氧化鈉溶液使黃酮類化合物開環(huán)，生成 2羥基查耳酮而顯紅橙色 ,在 510 nm波長(zhǎng)處有吸收峰且符合定量分析的比爾定律 ,一般與蘆丁標(biāo)準(zhǔn)系列比較定量（它的顯色原理發(fā)生在黃酮醇類成分鄰位無(wú)取代的鄰二酚羥基部位 ,不具有鄰位無(wú)取代鄰二酚羥基的黃酮醇類成分加入上述試劑時(shí)是不顯色的）。 二、實(shí)驗(yàn)原理與相關(guān)知識(shí) ? ? 二甲胺與亞硝酸鈉在模擬人體胃液的條件下 (pH ，溫度 37℃ )，可適宜地生成二甲基亞硝胺。 三、儀器與試劑 ?（一）實(shí)驗(yàn)室提供下列儀器和試劑 ? 儀器： ?電子分析天平；粉碎機(jī)；數(shù)顯恒溫水浴鍋；三用紫外儀；真空泵；分光光度計(jì)；電熱套；比色管；常用玻璃儀器。 ? 1 %三氯化鋁溶液。 ? 5％的醋酸鉛溶液。 ? 1 1 mmol/L 的二甲胺溶液。 ? 1 % 對(duì)氨基苯磺酸溶液。 ?(2)氨水反應(yīng)：取待測(cè)液 mL放在測(cè)試瓶中，滴加幾滴氨水振搖，觀察反應(yīng)現(xiàn)象。 ? (6)濃硫酸反應(yīng) : 在樣品液中滴加少量濃 H2SO4溶液，觀察反應(yīng)現(xiàn)象。 ? (9)與 1％高錳酸鉀溶液反應(yīng)：在試管中加 1． 0 mL 1％KMnO4，滴入 3～ 4滴提取物，觀察 KMnO4溶液是否褪色。溶液 mL，搖勻，再放置 6 min，加 4 % NaOH溶液 4mL，搖勻放置15min，在 510 nm波長(zhǎng)處，以同法配制空白對(duì)照，測(cè)定吸光度值，得回歸方程。用 50mL蒸餾水沖洗冷凝管上的附著物，拆開冷凝管后加入 150 g無(wú)水硫酸鋰和幾滴溴水（邊加邊搖晃），開口繼續(xù)加熱沸騰 15 min，使溴水完全揮發(fā)為止，終點(diǎn)顏色為黃綠色。再?gòu)母飨盗袠?biāo)準(zhǔn)溶液中吸取 1mL于 25 mL比色管內(nèi)，加 10 mL蒸餾水，搖勻，再加 mL Folin Ciocalteu試劑，充分搖勻，立即加入 6 mL 10 % Na2CO3溶液，混勻，加水定容，再混勻，然后在 30℃ 下避光放置反應(yīng) 2 h，以試劑樣為空白，在波長(zhǎng) 760 nm處測(cè)定吸光值，以吸光度值為縱坐標(biāo)，標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。在確定的最大吸收波長(zhǎng) λmax = 540 nm 處測(cè)定吸光度，并計(jì)算總黃酮對(duì)亞硝酸鈉清除率。取出后加入質(zhì)量分?jǐn)?shù) 1% 對(duì)氨基苯磺酸 mL，再加入質(zhì)量分?jǐn)?shù) % 1萘胺 mL，蒸餾水 mL，搖勻靜置 15 min。 ? (3)硝酸鋁反應(yīng)：取待測(cè)液 1． 0 mL放在測(cè)試瓶中，滴加幾滴硝酸鋁振搖。 五、 結(jié)果與分析 ? (6)濃硫酸反應(yīng) : 在樣品液中滴加少量濃 H2SO4溶液，觀察反應(yīng)顏色變橙色，表明有黃酮類化合物。 ? (9)與 1％高錳酸鉀溶液反應(yīng)：在試管中加 mL 1％KMnO4，滴入 3～ 4滴提取物，觀察 KMnO4溶液是否褪色，若褪色表明含有酚類化合物。 五、 結(jié)果與分析 ?4. 總黃酮對(duì)亞硝酸鈉清除率的測(cè)定 ?式中： A0 為未加樣品溶液時(shí) NaNO2 的吸光度 (以試劑空白溶液為參比溶液 )； ?A 為加入樣品溶液后 NaNO2 的吸光度 (以樣品溶液為參比溶液 )。為層析板點(diǎn)樣、定位照明，座內(nèi)還裝有一根普通熒光燈。 五、注意事項(xiàng) ? 4）由于多酚在光照、溫度等的條件下極易發(fā)生變化，如分解等，因此在實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程中需要進(jìn)行避光處理來(lái)防止多酚的分解。 2023/3/162023/3/16Thursday, March 16, 2023 雨中黃葉樹，燈下白頭人。 2023/3/162023/3/162023/3/162023/3/163/16/2023 1他鄉(xiāng)生白發(fā)，舊國(guó)見青山。 2023/3/162023/3/162023/3/162023/3/16 沒(méi)有失敗，只有暫時(shí)停止成功！。 2023/3/162023/3/162023/3/16Thursday, March 16, 2023 1不知香積寺，數(shù)里入云峰。 2023/3/162023/3/16March 16, 2023 1空山新雨后，天氣晚來(lái)秋。 2023/3/162023/3/162023/3/16Mar2316Mar23 1越是無(wú)能的人，越喜歡挑剔別人的錯(cuò)兒。 2023年 3月 16日星期四 2023/3/162023/3/162023/3/16 1最具挑戰(zhàn)性的挑戰(zhàn)莫過(guò)于提升自我
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