核酸的凝膠電泳-預(yù)覽頁(yè)
【正文】 存及使用 EB常用水配制成 10 mg/ml的貯存液，于室溫保存在 棕色瓶 或用鋁箔包裹的瓶中，使用終濃度為 μg/ml 。 （二） 凝膠載樣緩沖液 載樣緩沖液： 臨上樣到 凝膠加樣孔 之前與待電泳的樣品相混合的一種緩沖液。 5 所用的電壓 低電壓時(shí) DNA片段遷移率與所用的電壓成正比。（ 3）便于回收： 核酸凝膠電泳的基本原理 1） 核酸分子之糖 磷酸骨架中的磷酸基團(tuán)，呈 負(fù)離子化 狀態(tài)；核酸分子在一定的電場(chǎng)強(qiáng)度的電場(chǎng)中，它們會(huì)向正電極方向遷移； 2） 由于在電泳中往往使用 無(wú)反應(yīng)活性的穩(wěn)定的支持介質(zhì) ，電泳遷移率（或遷移速度）與分子的摩擦系數(shù)成反比。（ 2）便于檢測(cè) 。 4 凝膠和電泳緩沖液中的溴化乙錠 溴化乙錠（ EB）插入雙鏈 DNA造成其負(fù)電荷減少、剛性和長(zhǎng)度增加。超螺旋 DNA在 TAE中的電泳分辨率要好于 TBE。 主要有溴化乙錠（ ethidium bromide, EB）染色法和 SYBR Gold染色法。其與 DNA結(jié)合的親和力高，并且結(jié)合后，能夠極大增強(qiáng)熒光信號(hào)。 網(wǎng)格孔徑的平均直徑?jīng)Q定于丙烯酰胺和雙功能交聯(lián)劑的濃度。 2 非變性聚丙烯酰胺凝膠 用于雙鏈 DNA片段的分離和純化。 Home 三、 脈沖場(chǎng)凝膠電泳 pulsedfield gel electrophoresis PFGE 為何選 PFGE？ 超過(guò)一定大小的線狀雙鏈 DNA分子在瓊脂糖凝膠中以相同速率遷移。 DNA分子在交替變換方向的電場(chǎng)中作出反應(yīng)所需的時(shí)間取決于它的大小。 2 電壓： 若固定脈沖時(shí)間，增加電場(chǎng)強(qiáng)度就增大了可分離最大片段的范圍，但是太大的電場(chǎng)強(qiáng)度會(huì)導(dǎo)致較小片段泳動(dòng)的紊亂。 Hom
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