第十三章肝功能檢驗(yàn)-預(yù)覽頁(yè)
【正文】 方法。g/L 400181。 （２） 方法評(píng)價(jià)： ① 賴(lài)氏法的實(shí)驗(yàn)結(jié)果需與 卡門(mén)分光法的結(jié)果 對(duì)比后求出； ② NaOH的濃度 對(duì)顯色有影響； ③ 該法的 重復(fù)性差 。根據(jù)線(xiàn)性反應(yīng)期吸光度下降速率 (△ A/min)，來(lái)計(jì)算 ALT的活性。 AST （１）原理： 血清中的 AST可催化 門(mén)冬氨酸 (aspartate)與 α 酮戊二酸間的氨基移換， 生成 草酸乙酸 (oxaloacetate)和 L谷氨酸 。據(jù)此可 用比色法測(cè)定 AST活性。 雙試劑法 :同ＡＬＴ測(cè)定。 酚在堿性溶液中與 4－氨基安替比林作用，經(jīng)鐵氰化鉀氧化形成紅色醌類(lèi)化合物 ，根據(jù)紅色深淺確定 ALP的活力。 ALP主要用于診斷肝膽和骨骼疾病 【 臨床意義 】 ALP （１）原理： 以磷酸對(duì)硝基酚 (pnitrophenyl phosphate,4NPP)為底物， 2氨基 2甲基 1,3丙醇（ 2amino2methyl1propanol,AMP）或二乙醇胺為磷酸基的受體。 【 參考范圍 】 男性： 1～ 12歲 500U/L, 女性： 1～ 12歲 500U/L 12～ 15歲 750U/L， 15歲 40 ～ 150U/L， 25歲 40～ 150U/L。以芐氨偶氮 β 萘酚為底物 ,在O2和 H20參與下， MAO催化生成芐醛偶氮 β 萘酚、氨及過(guò)氧化氫，用環(huán)己烷抽提后進(jìn)行比色測(cè)定。 三、血清膽紅素測(cè)定 重氮鹽法 膽紅素氧化酶 (bilirubin oxidase,BOD)法 高效液相色譜法 (high performance liquid chromatography,HPLC)、 導(dǎo)數(shù)分光光度法 直接分光光度計(jì)法 測(cè)定方法 1．重氮鹽改良 JG(Jendrassik and Grof method,JG)法 (1) 原理 : 血清中 結(jié)合膽紅素與重氮鹽反應(yīng)生成偶氮膽紅素 ；同樣條件下， 游離膽紅素 需要在加速劑作用下 ，使游離膽紅素分子內(nèi)的 次級(jí)鍵斷裂 ，極性上升并與重氮試 劑反應(yīng)。因此，建議濃度過(guò)高時(shí)減少血樣用量測(cè)定。 (2) 方法評(píng)價(jià)： BOD法測(cè)定總膽紅素的準(zhǔn)確性、精密度比改良 JG法好 【 參考范圍 】 血清總膽紅素： 177。mol/L =膽紅素 mg/L X 【 臨床意義 】 見(jiàn)重氮比色法 四、血清膽汁酸測(cè)定 高效液相色譜法 放射免疫分析法 酶免疫分析法 比色分析測(cè)定法 測(cè)定方法 (1) 酶比色法測(cè)定原理 3α HSD 膽汁酸 + NAD+ 3氧 5β 類(lèi)固醇 + NADH （ 1） NADH + NBT 甲 jie（藍(lán)色化合物 λ=540nm ） （ 2） 3氧 5β 類(lèi)固醇 + NAD+ 3氧 5β 類(lèi)固醇 + NADH （ 3） 黃遞酶 △ 4DH ?酶比色法 由于膽汁酸在血中含量低，方法檢測(cè)的靈敏度達(dá)不到要求，通過(guò) 增加 3氧 5β 類(lèi)固醇脫氫酶 (△ 4DH)，膽汁酸經(jīng) 3α HSD催化的產(chǎn)物 3氧代膽酸在 △ 4DH作用下再 次脫氫，加大了 NADH 的生成量，提高了反應(yīng)的檢測(cè)能力（見(jiàn)反應(yīng)式 3） 。但試劑價(jià)貴、不易保持。 【 參考范圍 】 1 ～ 7 181。 五、血氨測(cè)定 ?為一步法，也叫直接測(cè)定即不需從全血中分離出氨即可直接測(cè)定 ?兩步法，即先從全血中分離出氨 ,而后再進(jìn)行測(cè)定； 微量擴(kuò)散法、離子交換法 酶法和氨電極法 (1)原理： 血漿中的氨在足量 α 酮戊二酸和 NADPH存在時(shí)，經(jīng)谷氨酸 脫氫酶作用生成谷氨酸 ,并消耗 NADPH， NADPH的下降速率與血漿 氨濃度成正比。精密度：批內(nèi) CV=%；批間
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