胚胎干細胞的研究與應(yīng)用畢業(yè)論文正文-預(yù)覽頁
【正文】 國內(nèi)外生命科學研究的熱點。這兩類細胞均可分化為包括神經(jīng)細胞、造血干細胞、心肌細胞等在內(nèi)的各種細胞[2]。遲至1998年，美國威斯康辛大學的生物學家 James Thomson及其同事才首次分離、建成了第一個人的胚胎干細胞系[3]。1998年，美國學者Shamb lott等首先從受精后5—9周的人胚胎生殖嵴分離，培養(yǎng)并建立了EGCs系。1981年美國科學家Evans和Kaufman從小鼠胚胎分離出胚胎干細胞病成功建立，從此開辟了哺乳動物胚胎干細胞研究的新紀元。中國軍事醫(yī)學科學院發(fā)現(xiàn)了“人胚胎干細胞素”，用于臨床多種疾病的治療取得了明顯效果！ 體細胞核移植通過顯微操作和細胞融合技術(shù)，見單細胞核體（卵裂球或體細胞的核）一如去核的受體（卵母細胞或受精卵）胞質(zhì)構(gòu)成重組胚，通過對重組胚的激活、培養(yǎng)得到動物胚胎干細胞。在目前的克隆實驗中，不同物種間克隆的效率略有區(qū)別，但總效率不高！ iPS細胞 iPS細胞首先是由Takahashi和Yamanaka在2006年建立的。不久，另外兩項研究相繼報道了利用形態(tài)學作為篩選標準來建立iPS細胞的方法，這一方法在建立人類iPSxde 研究中具有潛在的優(yōu)勢。在短短一年多的時間里，iPS細胞的建立方法有了明顯的改善，并且成功的應(yīng)用于人類細胞的研究和疾病模型動物的治療，說明這一方法既有可操作性和穩(wěn)定性，并且其安全性也在不斷提高，因此這種方法對將來的醫(yī)學研究有著巨大的價值！第三章 ESCs的基本特征3．1 形態(tài)學特性 各種動物的ESCs具有與早期胚胎細胞相似的形態(tài)學結(jié)構(gòu)： 細胞體積小，胞質(zhì)胞漿少，細胞核大，有一個或多個核仁，胞質(zhì)結(jié)構(gòu)簡單，散布著大量的核糖體和線粒體，核形正常，保留了雙倍體性質(zhì)。 3．2 基本特征 3．2．1 多能性(Pluripotency) ESCs的多能性是指ESCs具有分化出多種細胞組織的潛能，參與部分組織的形成。③嵌合體：通過顯微注射或其它方式使ESCs與受體胚結(jié)合，嵌合后，嵌合體就會參與多種組織發(fā)育。由于來源于著床前胚胎的 ESCs的某些細胞表面免疫相關(guān)蛋白(如MHC)還未來得及表達，用于移植時不易產(chǎn)生免疫排斥反應(yīng)，因此使其成為移植治療和細胞治療的潛在資源[6]。 3．3 ESCs建系概況 ESCs建系的原理是將早期胚胎或是用外科手術(shù)法得到 的內(nèi)細胞團或者PGCs，與分化抑制物共同培養(yǎng)，使之增殖而又保持未分化狀態(tài)， 這樣代代相傳，從而使數(shù)量有限的胚胎或者 PGCs能夠成千上萬倍的克隆。常規(guī)使用的培養(yǎng)液有白血病細胞抑制因子(LIF)、胎牛血清、L一谷氨酸、非必須氨基酸(NEAA)以及高濃度的DME等。目前廣泛應(yīng)用的飼養(yǎng)層有三種，STO(一種已建系的小鼠胚胎成纖維細胞)、Pmef(小鼠原代胚胎成纖維細胞)。因此，從理論上說，可提取動物睪丸SCs，然后將PGCs與SCs共培養(yǎng)，不僅可促進PGCs貼壁。5．2 器官移植ESCs作為一種“種子細胞”為臨床的組織、器官移植提供 了大量的材料，hESC經(jīng)過免疫排斥基因剔除后．再定向誘導(dǎo)終末器官以避免不同個體間的移植排斥，這樣就可能解決一直困擾著免疫學界及醫(yī)學界的同種異型個體間的移植排斥難題。 藥學研究方面胚胎干細胞系可分化為多種細胞類型，又是能在培養(yǎng)基中不斷自我更新的細胞來源。雖不會完全取代在整個動物和人體上的實驗，但會使藥品研制的過程更為有效。人胚胎干細胞還可以用于其它用途。第六章 胚胎干細胞在眼科的研究現(xiàn)狀嚴重的眼表疾病如StevensJohnson綜合癥、化學性燒傷等，可以引起角膜緣上皮細胞缺失，導(dǎo)致球結(jié)膜上皮化、角膜新生血管形成和結(jié)膜瘢痕，最終導(dǎo)致視力喪失。最近，Homma等將小鼠ESCs用Ⅳ型膠原接觸誘導(dǎo)后形成上皮祖細胞，其角膜上皮細胞特異性標記物K12表達陽性，鱗狀上皮細胞標記物K14表達陰性。同時，晶狀體細胞的數(shù)量隨FGF2濃度和ESCs集落密度的增加而增多。在眼科領(lǐng)域的研究中，ESCs移植尚處于實驗研究階段，其在視網(wǎng)膜變性疾病及視神經(jīng)病變治療中的應(yīng)用潛能逐漸成為研究的熱點。Arnhold等在移植后的長期觀察中，50％的移植眼可以看到畸胎瘤的形成，并侵犯宿主的視網(wǎng)膜，甚至是全眼球受累。ES細胞產(chǎn)生伊始,就以其迷人的魅力征服眾多的研究學者,經(jīng)過近20年的研究。但近幾年以來,用體細胞克隆出動物出現(xiàn)許多問題,如免疫缺陷,生理異常和老化等問題,這就需要時間去探討、研究和解決。 總之， ESCs的自身應(yīng)用優(yōu)勢雖然為難治性眼科疾病的治療提供了新的途徑，但也存在著大量有待解決的
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