基因工程工具酶簡(jiǎn)化版-預(yù)覽頁(yè)
【正文】 交換 （ 置換 ） 反應(yīng)進(jìn)行快速末端標(biāo)記 。 用途 1） 可使特定序列擴(kuò)增 106倍 。 變性 94?C 延伸 72?C 退火 Tm5?C 基本反應(yīng)步驟 PCR技術(shù)的特點(diǎn) 高特異性 高靈敏度 簡(jiǎn)便快速 低純度標(biāo)本也可使用 第五節(jié) DNA連接酶（ ligase） DNA連接酶：將兩個(gè) DNA片段通過(guò)催化形成 3’， 5’－磷酸二酯鍵而連接起來(lái)的酶。 一、連接酶功能 間斷修復(fù)功能 連接功能 三、粘性末端連接技術(shù) 銜接體 (linker)技術(shù) 結(jié)合體 (adaptor)技術(shù) 同聚體 (homopolymer)加尾技術(shù) 第六節(jié) 結(jié)合體技術(shù)的應(yīng)用 — AFLP AFLP （ Amplified Fragment Length Polymorphism） ? AFLP一詞是 1991年 Gustavo提出的 。 第七節(jié) 基因工程的其它酶類 一、 DNA及 RNA的修飾酶 （一）未端（脫氧核苷酸）轉(zhuǎn)移酶 （二）堿性磷酸酶 (alkaline phosphatase） （三）多核苷酸激酶 (polynucleotide kinase) 二、單鏈核酸內(nèi)切酶 （ 一 ） S1核酸酶 （ 二 ） Bal 31核酸酶 核酸外切酶 底物 切割位點(diǎn) 大腸桿菌核酸外切酶 Ⅰ ssDNA 5’— OH末端 大腸桿菌核酸外切酶 Ⅲ dsDNA 3’ — OH末端 大腸桿菌核酸外切酶 Ⅴ DNA 3’ — OH末端 大腸桿菌核酸外切酶 Ⅶ ssDNA 3’末端， 5’ P末端 λ噬菌體 λ核酸外切酶 dsDNA 5’ P末端 T7噬菌體核酸外切酶 dsDNA 5’ P末端 三、核酸外切酶 (exonucleases) 本章復(fù)習(xí)要點(diǎn) ? 限制性內(nèi)切酶 三種類型酶及各自特征； II型酶的相關(guān)概念；酶切位點(diǎn)的估算；酶切反應(yīng)。
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