基因工程工具酶簡化版-預覽頁
【正文】 交換 （ 置換 ） 反應進行快速末端標記 。 用途 1） 可使特定序列擴增 106倍 。 變性 94?C 延伸 72?C 退火 Tm5?C 基本反應步驟 PCR技術的特點 高特異性 高靈敏度 簡便快速 低純度標本也可使用 第五節(jié) DNA連接酶（ ligase） DNA連接酶：將兩個 DNA片段通過催化形成 3’， 5’－磷酸二酯鍵而連接起來的酶。 一、連接酶功能 間斷修復功能 連接功能 三、粘性末端連接技術 銜接體 (linker)技術 結(jié)合體 (adaptor)技術 同聚體 (homopolymer)加尾技術 第六節(jié) 結(jié)合體技術的應用 — AFLP AFLP （ Amplified Fragment Length Polymorphism） ? AFLP一詞是 1991年 Gustavo提出的 。 第七節(jié) 基因工程的其它酶類 一、 DNA及 RNA的修飾酶 （一）未端（脫氧核苷酸）轉(zhuǎn)移酶 （二）堿性磷酸酶 (alkaline phosphatase） （三）多核苷酸激酶 (polynucleotide kinase) 二、單鏈核酸內(nèi)切酶 （ 一 ） S1核酸酶 （ 二 ） Bal 31核酸酶 核酸外切酶 底物 切割位點 大腸桿菌核酸外切酶 Ⅰ ssDNA 5’— OH末端 大腸桿菌核酸外切酶 Ⅲ dsDNA 3’ — OH末端 大腸桿菌核酸外切酶 Ⅴ DNA 3’ — OH末端 大腸桿菌核酸外切酶 Ⅶ ssDNA 3’末端， 5’ P末端 λ噬菌體 λ核酸外切酶 dsDNA 5’ P末端 T7噬菌體核酸外切酶 dsDNA 5’ P末端 三、核酸外切酶 (exonucleases) 本章復習要點 ? 限制性內(nèi)切酶 三種類型酶及各自特征； II型酶的相關概念；酶切位點的估算；酶切反應。
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