人感染豬鏈球菌病樣品采集運(yùn)送與實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)方案-預(yù)覽頁(yè)
【正文】 下游引物： agtctctaca gctgtagctg g PCR反應(yīng)的條件： 94℃ 預(yù)變性 5分鐘 。98年用 MAS300微生物自動(dòng)生化分析儀，曾將 2型豬鏈球菌誤判為血鏈球菌 ? 用 API 20 strep生化系統(tǒng)能很好地對(duì)分離株進(jìn)行菌種鑒定 ?PCR也是有效和快速的檢測(cè)方法 謝謝！ 。取 5微升擴(kuò)增產(chǎn)物在 ℅ 的瓊脂糖凝膠中進(jìn)行電泳。據(jù)報(bào)道 ,加拿大和澳大利亞有商品化血清分型試劑。 ? 應(yīng)盡可能 床邊接種分離 培養(yǎng) ， 如無法立即接種 ，應(yīng)在樣品送達(dá)實(shí)驗(yàn)室后立即進(jìn)行分離 。 ? 需要馬上檢測(cè)的標(biāo)本在實(shí)驗(yàn)室可暫放 48℃冰箱 。 ? 無菌的剪刀 、 鑷子和手術(shù)刀 。 鏈球菌 . Gram stain. CDC/Dr. Richard Facklam 鏈球菌 豬鏈球菌培養(yǎng)特性 ? 10℃ 培養(yǎng)不生長(zhǎng)， 45℃ 培養(yǎng)生長(zhǎng)，60℃ 30分鐘試驗(yàn)不生長(zhǎng) ? 55℃30 分鐘即可被殺死 豬鏈球菌生化特征 ? 豬鏈球菌生化特性往往差異較大，一般難以作為分類依據(jù) ? 觸酶試驗(yàn)陰性 ? 水解七葉苷、淀粉和精氨酸，不水解馬尿酸鹽和明膠 ? 分解乳糖、葡萄糖、麥芽糖、蔗糖和甘露糖，不分解阿拉伯糖、鼠李糖和甘露醇 致病因子 ? 豬鏈球菌 2型主要 致病因子 – 溶菌酶釋放蛋白（ muramidasereleased protein,MRP） – 細(xì)胞外因子（ extracellular factor,EF） – 豬溶素（ suilysin） – 莢膜多糖 ? 用南通地區(qū)分離的人源豬鏈球菌對(duì)兔和小白鼠的攻擊試驗(yàn)表明，豬鏈可使家兔發(fā)病，并引起死亡。多為條件致病菌。 …… 鏈球菌分類 ? 根據(jù)溶血現(xiàn)象分類 – 甲型溶血性鏈球菌：稱甲型溶血或 ?溶血， ?溶血環(huán)中的紅細(xì)胞并未完全溶解。 豬鏈球菌培養(yǎng)特性 ? 剛分離的豬鏈球菌，典型的革蘭氏陽性鏈球菌，鏈長(zhǎng)達(dá)二十多個(gè) ? 二代培養(yǎng)后細(xì)菌形態(tài)不典型，結(jié)晶紫作色不良，多為 不成鏈 球桿菌，少數(shù)呈短鏈狀。 ? 可以方便采集組織標(biāo)本的無菌容器 。 ? 標(biāo)本應(yīng)冷藏運(yùn)輸 。 ? 用于分離培養(yǎng)的標(biāo)本應(yīng)在 抗菌治療前采集 。 分離鑒定 ? 形態(tài)學(xué)鑒定 – 挑取平板上可疑菌落革蘭氏染色鏡檢 ? 篩檢生化試驗(yàn) – 豬鏈球菌觸酶試驗(yàn)陰性，可與葡萄球菌區(qū)別 ? 血清學(xué)檢測(cè) – 標(biāo)準(zhǔn)分型診斷血清， 進(jìn)行 乳膠凝集試驗(yàn)或玻片凝集試驗(yàn) – 確定所分離的菌株為 R群，與 2型豬鏈球菌分型血清反應(yīng) – 目前 國(guó)內(nèi)無分型診斷血清供應(yīng) 。94℃ 、 30秒， 60℃ 、 30秒，72℃ 、 30秒， 25個(gè)循環(huán)，最后延伸 72℃ 、
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